龚辉
- 作品数：2 被引量：19H指数：2
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 黑曲霉糖化酶在酿酒酵母中的表达和分泌被引量：11
- 1994年
- 从黑曲霉糖化酶高产株T21合成的糖化酶cDNA,经5＇端和3＇端改造后克隆到酵母质粒YFD18上,转化酿酒酵母。转化子的淀粉培养基平板检测,培养滤液蛋白电泳和糖化酶活力分析都表明,含有糖化酶基因表达质粒的酵母转化子能有效地分泌有功能的糖化酶到细胞外。实验证明酵母α因子启动子和分泌信号序列能促使黑曲霉糖化酶cDNA在酵母中表达和分泌,实验还表明,黑曲霉糖化酶原的翻译后加工序列很可能亦能被酵母识别,加工生成有功能的成熟的糖化酶。以上成功为构建有实用意义的淀粉水解酵母工程菌迈出了重要的一步。
- 唐国敏龚辉钟丽蝉杨开宇
- 关键词：糖化酶酿酒酵母分泌黑曲霉
- 黑曲霉糖化酶高产株糖化酶cDNA的合成、克隆和序列分析被引量：9
- 1993年
- 从黑曲霉糖化酶高产株T21分离总Poly(A)^+RNA,经反转录合成cDNA,建立cDNA库。以糖化酶基因片段为探针从cDNA库进行筛选,阳性率达1.6%。由限制酶酶切图谱确定30%的阳性克隆携带全长的糖化酶cDNA。序列分析结果表明,荫株T21虽经多次诱变获得,但糖化酶基因编码区序列与文献报道的黑曲霉糖化酶基冈编码区序列一致。从菌株T21构建的cDNA库中含糖化酶cDNA插入片段的克隆的高比率充分证明,菌株T21中稳态糖化酶mRNA含量很高,显然这是突变株T21糖化酶高产的重要原因之一。
- 唐国敏徐雁漪龚辉钟丽婵杨开宇
- 关键词：黑曲霉糖化酶CDNA
