黄凯
- 作品数：4 被引量：15H指数：1
- 供职机构：天津市第五中心医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胶质瘤中miR-34a靶向作用于MAPK13 mRNA并抑制其表达被引量：1
- 2011年
- 目的预测并验证miR-34a与促分裂原活化蛋白激酶13(MAPK13)的靶向作用关系,寻找胶质瘤基因治疗的新方法。方法将miR-34a相似物转染入胶质瘤细胞A172中,实时定量PCR检测miR-34a在胶质瘤中的表达。目的基因的mRNA水平用实时定量PCR来评估,蛋白水平分别用荧光素酶试验和蛋白印迹来评估。miR-34a与目的基因3'非翻译区(3'UTR)的结合用MAPK13报告实验确认。结果 miR-34a相似物转染入胶质瘤细胞A172后在A172细胞中大量表达,实时定量PCR、蛋白印迹和免疫荧光证明miR-34a降低MAPK13的表达量,MAPK13荧光素酶报告实验显示,MAPK13荧光素酶活性被miR-34a降低。结论 miR-34a通过与MAPK13 3'UTR区的特异结合作用发挥对胶质瘤责任基因MAPK13的靶向沉默作用,可能成为未来胶质瘤基因治疗的新选择。
- 王亮黄凯刘晓智李罡苏治国王骏飞赵玉军刘洪良陈镭
- 关键词：神经胶质瘤基因治疗
- 叶酸／聚酰胺-胺介导miR-7治疗小鼠胶质瘤被引量：14
- 2012年
- 目的探讨叶酸／聚酰胺-胺（FA／PAMAM）介导的微小RNA-7（miR-7）基因治疗体内胶质瘤的实际效果。方法以络合物FA／PAMAM为基因载体转染miR-7至人脑胶质瘤细胞系U251，荧光下观察转染效率，逆转录定量PCR（qRT-PCR）检测miR-7水平。制备去胸腺小鼠颅内U251胶质瘤模型，于成瘤后第3天在肿瘤原位实施络合物移植，M砒动态观察荷瘤小鼠颅内肿瘤体积及水肿变化，记录小鼠生存期。荷瘤小鼠瘤组织切片行原位凋亡检测，免疫组织化学法检测细胞增殖活性抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9的表达，Westernblot法检测表皮生长因子受体（ECFR）和丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶2（AKT-2）的蛋白表达量。结果与脂质体转染比较，FA／PAMAM对miR-7具有更高的基因转染效率。M砌显示，FA/PAMAh量／miR-7组的肿瘤体积增长速度明显低于脂质体／mia-7组，小鼠生存期延长。对照组的细胞凋亡率为（5．3±0．9）％，脂质体／miR-7组的细胞凋亡率为（11．4±2．4）％，FA／PAMAM／miR-7组的细胞凋亡率为（17．7±3．7）％，FA／PAMAM／miR-7组的细胞凋亡率明显增加。免疫组化结果显示，PCNA、MMP-2和MMP-9在对照组中的阳性率分别为（57．3±7．4）％、（45．4±6．9）％和（55．1±7．3）％，在脂质体／miR-7组中分别为（49．3±5．9）％、（31．7±7．1）％和（39．4±6．4）％，在FA／PAMAM／miR-7组中分别为（34．6±5．4）％、（24．5s4．1）％和（25．4S5．1）％。EC,FR和AKT-2蛋白在对照组中的相对表达强度分别为1．09±0．12和0．62±0．10，在脂质体/miR-7组中分别为0．63±0．11和0．43s0．07，在FA／PMM／面R-7组中分别为0．47s0．09和O．31S0．04。FA／PAMAM／miR-7组中PCNA、MMP-2、MMP-9、EGFR和AKT-2蛋白的表达水平均有不同程度下降（均P〈0．05）。结论FA／PAMAM具有较脂质体更高的基因转染效率，药物作用时间�
- 刘晓智苏治国姜忠敏李罡宋军黄凯王亮陈镭刘振林
- 关键词：胶质瘤微小RNA表皮生长因子受体小鼠络合物
- 骨髓基质干细胞大鼠颅内移植致瘤3例报告
- 目的报告3例动物实验中意外发现的骨髓基质干细胞(BMSCs)颅内移植后恶变致瘤病例。方法在研究20例BMSCs大鼠体内移植实验中发现3例对侧肢体偏瘫症状逐渐加重的实验鼠,MRI检测示颅内占位性改变,观察记录动物生存期,获...
- 刘晓智刘振林苏治国李罡黄凯
- 关键词：干细胞致瘤性增殖
- 文献传递
- 小白菊内酯抑制人脑胶质瘤细胞U251生长的体外研究
- 目的信号通路异常是肿瘤形成的重要分子生物学机制,在此探讨小白菊内酯(Parthenolide)(NFκB抑制剂)在体外对人脑胶质瘤细胞系U251增殖活性和侵袭能力的抑制作用。方法应用MTT法;流式细胞术和Transwel...
- 黄凯
- 关键词：胶质瘤小白菊内酯
- 文献传递
