陈晓晖
- 作品数：10 被引量：18H指数：3
- 供职机构：合肥工业大学更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 琥珀酸的固定化细胞单罐高强度连续发酵工艺
- 本发明公开了琥珀酸的固定化细胞单罐高强度连续发酵工艺方法，涉及如下步骤：(1)制备高活性产琥珀酸放线杆菌种子液；(2)菌种的10L罐扩培；(3)10L罐固定化细胞的制备；(4)10L罐单罐反复发酵：无菌接入新鲜培养基，第...
- 潘丽军姜绍通李兴江郑志罗水忠陈晓晖
- 文献传递
- 基于代谢通量分析的琥珀酸放线杆菌高产选育研究被引量：6
- 2008年
- 在对产琥珀酸放线杆菌代谢分析的基础上选育出高产突变株对琥珀酸的工业生物转化有重要意义。在矩阵分析代谢通量基础上,围绕柔性节点下的副产物乙酸及乙醇的降低分别实施软X诱变及定点突变选育,并对比分析了突变株与出发株相关酶活及基因序列变化。针对出发株的流量分析显示产物琥珀酸的代谢通量为1.78(mmol/g/h),主要副产物乙酸与乙醇的代谢通量分别为(0.60mmol/g/h)和(1.04mmol/g/h),并发现乙醇代谢加剧了琥珀酸合成中的H电子供体的不足;筛选出的氟乙酸抗性突变株S.JST1的乙酸代谢通量降低了96%,为0.024(mmol/g/h),酶活检测表明磷酸乙酰转移酶(Pta)的酶比活力从602降低到74,进一步的序列对比分析发现pta突变基因中产生了一个突变位点;adh定点复合突变株S.JST2的乙醇代谢通量降低了98%,为0.020(mmol/g/h),酶活检测表明Adh的酶比活力从585降低到62,最终突变株S.JST2琥珀酸累积产量达65.7g/L。围绕产琥珀酸放线杆菌Pta及Adh酶活的降低实施定向选育,在降低副产物流量的同时,有助于改善细胞H供体代谢平衡进而提高琥珀酸的流量。所获突变株具有工业应用潜力。
- 潘丽军李兴江姜绍通魏兆军陈晓晖蔡理铖王鹤峰蒋继军
- 关键词：产琥珀酸放线杆菌代谢通量选育乙醇脱氢酶
- 琥珀酸的固定化细胞单罐高强度连续发酵工艺
- 本发明公开了琥珀酸的固定化细胞单罐高强度连续发酵工艺方法，涉及如下步骤：(1)制备高活性产琥珀酸放线杆菌种子液；(2)菌种的10L罐扩培；(3)10L罐固定化细胞的制备；(4)10L罐单罐反复发酵：无菌接入新鲜培养基，第...
- 潘丽军姜绍通李兴江郑志罗水忠陈晓晖
- 文献传递
- 一株丁二酸产生菌的选育及代谢分析被引量：2
- 2008年
- 【目的】了解细胞代谢过程,并最终选育出高产突变株,对丁二酸的工业生物转化有重要意义。【方法】在菌株生化及分子鉴定基础上,讨论了菌株的代谢途径,便于实施有针对性的诱变选育,利用矩阵计算了流量分布以及用扰动法分析了代谢节点。【结果】菌株S.JST经鉴定为产丁二酸放线杆菌,酶活检测表明磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、苹果酸脱氢酶在丁二酸代谢过程中具有较高酶活,出发株的流量分布显示副产物乙醇的流量仅次于丁二酸的流量,选育获得的突变株乙醇脱氢酶酶活显著降低,丁二酸与乙醇的流量分别有34%升高与93%的降低,序列分析发现突变株的乙醇脱氢酶酶基因中存在一个突变位点,且生物信息学表明该位点编码的氨基酸序列与该酶的NADH连接活性有联系。【结论】对产丁二酸放线杆菌采用定向选育的方法能够有效改善细胞代谢,并最终提高丁二酸产量。
- 姜绍通李兴江潘丽军魏兆军陈晓晖章建国唐学英熊建春袁媛张袁园
- 关键词：丁二酸代谢通量选育
- 牛瘤胃中琥珀酸产生菌的分离鉴定研究被引量：4
- 2007年
- 通过添加地克球利进行富集培养,结合溴甲酚绿中性平板从牛瘤胃中初步筛选得300株产酸菌,TLC法点样分离出31株菌有不同程度的琥珀酸生产能力,进一步地HPLC法定性定量,复筛得8株发酵性状较优菌株,其中最有潜力的一株菌NO.4发酵琥珀酸累积产量达16.8 g/L。针对菌株的细胞及菌落形态研究表明,菌落为圆形凸起,表面光滑,不透明或半透明,呈浅兰色或乳白色,边缘整齐,菌体呈球状,细胞大多数单个或成双甚至成串出现,菌体兼性厌氧,呈革兰氏阳性,无内生芽孢,有荚膜,可运动。对菌株的进一步生理生化和16s-rRNA分析确认为Leuconostoc mesenteroides,最终将菌株NO.4命名为L.mesenteroides JST。
- 李兴江潘丽军姜绍通魏兆军陈晓晖程先锋
- 关键词：瘤胃琥珀酸肠膜明串珠菌
- 琥珀酸产生菌的快速选育被引量：2
- 2008年
- 以牛瘤胃内容物为菌源,在高浓度CO2下向培养基额外添加莫能菌素和富马酸钠实现选择性富集培养。溴甲酚绿中性平板变色圈作为筛选标记,以变色区域大小初步筛选得到500株产酸菌株。结合TLC法快速地确定了其中含有28株产琥珀酸菌株。在HPLC和HPCE对发酵液检测的对比过程中优选HPCE法,检测发酵液得到6株优良菌株,其中发现15号菌株琥珀酸产量达11.5 g/L,有较少的甲酸和乙酸产生。验证试验表明:该方法对牛瘤胃中的琥珀酸产生菌可以实现快速、有效的分离筛选,具有很好的重现性。
- 陈晓晖潘丽军李兴江操丽丽罗炳华
- 关键词：牛瘤胃琥珀酸TLC毛细管电泳
- 琥珀酸产生菌的分离鉴定、诱变选育及发酵条件优化
- 细菌发酵生产琥珀酸成本低廉、对环境污染少。由于其生产原料可再生，并能吸收利用温室气体CO<,2>，使之成为近年来国内外生物质能源转化的研究热点。‘本研究通过采用选择性较强的富集培养和快速准确筛选程序，从牛瘤胃中分离出适于...
- 陈晓晖
- 关键词：琥珀酸菌株分离诱变育种发酵工艺
- 文献传递
- 利用秸秆水解液五、六碳糖共发酵产琥珀酸放线杆菌的酶活分析及定向选育被引量：2
- 2009年
- 目的:在产琥珀酸放线杆菌主要酶活分析基础上选育出高产突变株对工业规模生物转化农作物秸秆制备琥珀酸具有重要意义。方法:采用酸解方法处理原料秸秆并利用高效液相检测降解糖分,在菌株主要酶活分析及调控的基础上,利用软X射线诱变结合丙烯醇抗性平板进行定向选育以降低乙醇流量,并对代谢酶活进行了分析。结果:秸秆水解液的检测表明200g的秸秆干粉酶解得约47g的葡萄糖和约26g的木糖,酶活分析表明,Pepck、Pc及Mdh是琥珀酸合成重要代谢酶且酶活可调控,发现乙醇脱氢酶(Adh)的高酶活造成了大量副产物乙醇的生成。筛选出的丙烯醇抗性突变株S.JST01的乙醇产量由8.9g/L降为1.4g/L,降低了84%,而琥珀酸流量产量由54.2g/L升至63.1g/L,升高了16%。酶活检测表明Adh的酶活力单位从614U降低到108U。结论:围绕产琥珀酸放线杆菌Adh酶活降低实施定向选育有助于提高琥珀酸的流量,突变株的末端产物琥珀酸累积达63.1g/L,具有工业应用潜力。
- 李兴江姜绍通潘丽军魏兆军陈晓晖
- 关键词：产琥珀酸放线杆菌乙醇脱氢酶丙烯醇定向选育
- 农作物秸秆生物转化制备琥珀酸工艺
- 本发明涉及农作物秸秆生物转化制备琥珀酸工艺。解决了目前浪费或低利用农作物秸秆这一木质纤维材料的问题。本发明工艺步骤包括：(1)秸秆的稀碱液预处理20min；(2)超声处理10min；(3)添加硫酸中和处理；(4)添加纤维...
- 姜绍通潘丽军李兴江陈晓晖
- 文献传递
- 农作物秸秆生物转化制备琥珀酸工艺
- 本发明涉及农作物秸秆生物转化制备琥珀酸工艺。解决了目前浪费或低利用农作物秸秆这一木质纤维材料的问题。本发明工艺步骤包括：(1)秸秆的稀碱液预处理20min；(2)超声处理10min；(3)添加硫酸中和处理；(4)添加纤维...
- 姜绍通潘丽军李兴江陈晓晖
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