金迪
- 作品数：11 被引量：30H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金“十二五”科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 脂多糖对泌乳奶牛乳中氨基酸组成及蛋白质代谢相关基因表达的影响被引量：11
- 2012年
- 本试验旨在通过半体内和体外试验研究灌注脂多糖(lipopolysacchride,LPS)对泌乳奶牛乳中氨基酸组成和蛋白质代谢相关基因表达的影响。半体内试验选用6头经产的荷斯坦奶牛[泌乳天数为(186±30)d],随机分为对照组和试验组,每组3头。采用交叉试验设计,每期正试期7 d,间隔期14 d;试验组阴外动脉灌注LPS(大肠杆菌型O111∶B4,0.01μg/kg),对照组阴外动脉灌注生理盐水。体外试验以乳腺上皮细胞为模型,基础培养基中LPS添加水平分别为0、0.1和10.0 ng/mL,培养24 h后,采用实时定量-PCR(qRT-PCR)法检测目的基因的相对表达水平。结果表明,阴外动脉灌注LPS后,乳中必需氨基酸、支链氨基酸含量随着灌注时间的增加呈先升高后降低的趋势(P>0.05),灌注后6 h达到最高;乳中非必需氨基酸含量随着灌注时间的增加呈先降低后升高的趋势(P>0.05),灌注后6 h达到最低。LPS提高了乳腺上皮细胞中p70核糖体蛋白S6激酶-1(S6K1)和真核起始因子4E结合蛋白-1(4EBP1)mRNA的表达水平(P>0.05),且具有剂量效应。LPS对雷帕霉素靶点(mTOR)、Janus激酶2(JAK2)mRNA表达水平影响差异不显著(P>0.05),但有提高的趋势。与对照组相比,LPS显著提高了信号转导和转录激活因子5(STAT5)mRNA表达水平(P<0.05)。综上所述,LPS通过干扰mTOR通路和JAK2/STAT5通路影响了乳蛋白及氨基酸组成。
- 臧长江张养东王加启胡涛卜登攀金迪周凌云李发弟
- 关键词：脂多糖乳腺上皮细胞泌乳奶牛氨基酸蛋白质代谢
- 奶牛瘤胃反-11-油酸氢化细菌分离培养条件的优化
- 目的：旨在建立奶牛瘤胃TVA氢化细菌体外富集和分离培养的优化条件。方法：在厌氧培养基中添加不同浓度TVA (0, 30, 40, 50, 60 μ/mL )，接种瘤胃微生物后进行连续培养，每隔4h采集培养物，用于测定TV...
- 金迪王加启赵圣国李旦卜登攀周凌云
- 关键词：奶牛瘤胃
- 阴外动脉灌注脂多糖对泌乳奶牛乳的成分和脂肪酸组成的影响被引量：1
- 2011年
- 本试验旨在研究阴外动脉灌注脂多糖(LPS)对泌乳奶牛乳成分、乳脂合成前体物和脂肪酸组成的影响。选用6头处于泌乳期第(185±30)天、体重(576±36)kg的经产的荷斯坦奶牛,随机分成2组。采用交叉试验设计,试验组阴外动脉灌注LPS(Escherichia coli O111∶B4,0.01μg/kg BW),对照组灌注生理盐水。试验分2期,每期试验7 d,2期间隔14 d。结果表明:泌乳奶牛干物质采食量受LPS影响差异不显著(P>0.05);LPS显著提高乳中乳蛋白率(P<0.05),对乳脂率无显著影响(P>0.05);LPS极显著降低血浆中乳脂合成前体物非酯化脂肪酸的含量(P<0.01),β-羟丁酸含量呈先降低后升高的趋势(P>0.05);LPS不同程度地降低了乳脂中饱和脂肪酸(P>0.05)和短链脂肪酸(P>0.05)的含量,提高了乳脂中不饱和脂肪酸(P>0.05)和中长链脂肪酸(P>0.05)的含量,并影响脂肪酸的去饱和作用。结果提示,LPS是诱发乳脂合成发生变化的主要激发因子之一。
- 张养东王加启胡涛李珊珊卜登攀金迪孙鹏周凌云
- 关键词：泌乳奶牛脂多糖乳成分乳脂肪酸组成
- 奶牛瘤胃反-11-油酸氢化细菌分离培养条件的优化
- 引言/目的奶牛瘤胃中的氢化过程对乳脂肪组成有重要影响,反-11-油酸(trans-11 18:1,TVA)是氢化的主要中间产物,是牛奶中营养成分共轭亚油酸(CLA)合成的主要前体物。氢化过程的发生是瘤胃微生物代谢活动的结...
- 金迪王加启赵圣国李旦卜登攀周凌云
- 文献传递
- 利用元基因组学方法从瘤胃中筛选的功能酶及酶基因研究进展被引量：3
- 2015年
- 瘤胃微生物群落是一个复杂、庞大的生物体系,其生物多样性极为丰富,蕴藏着巨大的基因和生态资源,是酶制剂开发的重要宝库。元基因组学方法避免了微生物培养条件的限制,通过直接对未培养微生物进行DNA提取、基因筛选与表达,从而不断扩大自然界中的基因数据库,为新型生物催化剂的开发及筛选提供了可能。对元基因组学技术及利用此技术从瘤胃中筛选的功能酶类及酶基因的研究进展进行了综述。
- 张俊赵圣国王加启金迪卜登攀
- 关键词：瘤胃酶类
- 元转录组学在微生物群落研究中的应用被引量：3
- 2012年
- 环境微生物多样性复杂庞大,蕴藏着丰富的基因资源,随着分子生物学研究工具的出现,对未培养微生物的研究愈加深入。元转录组学(Metatranscriptomics)是在元基因组学之后新兴的一门学科,目前已渗透到了当前许多的技术和领域,对于了解微生物代谢等生物过程中所涉及的基因和途径是一种很重要的工具。综述了元转录组学的基本概念,讨论了其与目前被用于基础和应用研究的元基因组学相比的优势,对元转录组学的研究方法及其在微生物研究中的应用进行了重点描述。
- 金迪王加启赵圣国卜登攀孙鹏周凌云
- 关键词：研究方法微生物
- 奶牛瘤胃微生物元基因组文库中二肽基肽酶Ⅳ的筛选与分析被引量：1
- 2013年
- 【目的】研究奶牛瘤胃内参与蛋白质降解过程中二肽基肽酶Ⅳ(dipeptidyl peptidasesⅣ,DPP-Ⅳ)的序列特征和酶学性质。【方法】从奶牛瘤胃微生物Fosmid文库中挑选17 664个克隆,利用dpp-Ⅳ简并引物筛选含dpp-Ⅳ的阳性克隆。提取阳性克隆的质粒,用限制性内切酶HindⅢ进行酶切。PCR扩增含dpp-Ⅳ目的片段,并克隆测序。对阳性克隆的Fosmid末端进行测序。提取阳性克隆粗酶液,利用底物Gly-Pro-pNA检测肽酶活性。【结果】筛选后获得10个含有dpp-Ⅳ的阳性克隆(命名为DP1—DP10)。Fosmid末端序列经BLASTX比对后发现78%的序列可以与数据库的已知序列相匹配,但相似度变化较大(44%—94%)。DPP-Ⅳ序列经BioEdit比对后,发现均含有N端保守区域(DWVYEEE)和C端催化区域(GWSYGG),经BLASTP比对发现阳性克隆的DPP-Ⅳ分别与Cyclobacterium marinum(43%)、Capnocytophaga sp.(63%)、Prevotella ruminicola 23(66%)和Solitalea canadensis(50%)的DPP-Ⅳ相似度高。酶活力检测发现DP7肽酶活力最高,为6.88 U.mg-1。【结论】从瘤胃微生物Fosmid文库中获得了10个含有dpp-Ⅳ的阳性克隆,它们具有不同的dpp-Ⅳ序列特征和肽酶活性。
- 赵静雯王加启赵圣国孙鹏卜登攀胡小丽卢玉飞王丹丹金迪
- 关键词：瘤胃微生物FOSMID文库酶活性
- 奶牛瘤胃反-11-油酸氢化细菌分离培养条件的优化被引量：2
- 2011年
- 本研究旨在建立奶牛瘤胃反-11-油酸(trans-11 18:1,TVA)氢化细菌体外富集和分离培养的优化条件。在厌氧培养基中添加TVA至不同终浓度(0、30、40、50、60μg.mL-1),接种瘤胃微生物后进行连续培养,每隔4h采集培养物,用于测定TVA含量及培养液OD值。另外,在厌氧培养基中添加TVA,使其终浓度为50μg.mL-1,传代培养6代收集每一代富集培养物,利用PCR-DGGE分析TVA氢化细菌种群的变化,并选取DGGE差异条带进行16SrDNA测序分析。结果,添加TVA后,连续培养至4h,培养基中TVA含量快速下降,培养至12h,TVA浓度保持恒定。当TVA添加浓度为50和60μg.mL-1时,培养12h后TVA降解率较其他浓度要高。此外,培养液OD值呈先升高后降低的趋势,且在12h达最大值。传代富集培养时,当传至第4代时,疑似TVA氢化菌种类和数量增加最显著。对差异条带的测序结果表明TVA氢化菌大多属于Lactobacillus gasseri和未培养细菌。本研究确定了奶牛瘤胃中TVA氢化细菌分离培养的适宜TVA添加量、传代时间及富集培养代数,为后续的选择性分离培养奠定了基础。
- 李长皓金迪王加启赵圣国李旦卜登攀周凌云
- 不同粗饲料及蛋白质来源日粮条件下奶牛瘤胃细菌群落多样性变化
- 本研究的目的在于揭示不同粗饲料及蛋白质来源日粮对奶牛瘤胃细菌群落多样性的影响，并分析优势菌群的数量变化。选取48头泌乳日龄及体重相近的健康中国荷斯坦奶牛随机分为3组，饲喂粗饲料及蛋白质来源不同的三种日粮：MF组（苜蓿，玉...
- 金迪
- 关键词：日粮粗饲料瘤胃细菌DGGE
- 文献传递
- 应用DGGE分析秸秆日粮对奶牛瘤胃细菌群落的影响被引量：6
- 2013年
- 【目的】通过与苜蓿日粮比较,揭示秸秆日粮模式下瘤胃固液相细菌群落的独特结构。【方法】选择12头健康且体重相似的装有永久瘤胃瘘管的中国荷斯坦奶牛,分别饲喂以玉米秸秆(CS)和苜蓿、羊草、青贮玉米三者混合物(MF)为粗饲料组成的日粮,正饲期第13周连续3 d分12个时间点采集瘤胃固、液相内容物样品。提取微生物DNA后,利用PCR结合变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)分析细菌群落结构,并进行聚类分析及差异条带的测序分析。【结果】与MF组相比,CS组奶牛瘤胃固、液相细菌DGGE图谱条带的数目和光密度均有一定差异,两处理组都各有一些稍显优势的条带,CS组优势条带要少于MF组。与MF组相比,CS组液相细菌的香浓多样性指数无差异(P>0.05),固相细菌香浓多样性指数显著降低(P<0.01);通过对差异条带进行测序,发现与MF组相比,CS组中瘤胃细菌Prevotella sp.、Acetivibrio ethanolgignens和Clostridium sp.减少,并且大量来源于Bacteroidetes、Firmicutes、Tenericutes和Proteobacteria等菌门的未培养细菌有所变化。【结论】秸秆日粮条件下奶牛瘤胃存在独特的细菌群落结构,细菌多样性较低。
- 金迪王加启卜登攀赵圣国胡小丽赵静雯卢玉飞王丹丹孙鹏
- 关键词：秸秆瘤胃细菌群落DGGE
