袁茵 作品数:27 被引量:57 H指数:4 供职机构: 广东药学院生命科学与生物制药学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省医学科学技术研究基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 文化科学 更多>>
利用作图函数和实验方法讲解减数分裂重组值的教学方法 2012年 减数分裂教学中重组值的教学,是高等医药院校遗传学中教学的关键点和难点。作者利用泊松分布的作图函数和蝗虫的精子形成过程装片制作、观察实验教学相结合的方法,不仅使学生掌握了减数分裂的基本知识,同时也使学生掌握了减数分裂最大重组值不超过50%的教学难点。 田素娟 袁茵关键词:减数分裂 pQE-hbFGF表达系统的构建及其蛋白质的表达和纯化 2005年 目的 构建pQE hishbFGF表达载体 ,通过一步纯化得到 6×HishbFGF蛋白质。方法 用PCR扩增目的基因hbFGF ,连接到pQE4 0载体上 ,转化到Top10菌株筛选重组子 ,经测序后将质粒转化到表达菌M15上 ,经IPTG诱导表达 ,超声波破菌后通过镍离子螯合层析一步纯化得 6×HishbFGF蛋白质 ,ELISA鉴定产物 ,用MTT法检测产物促细胞增殖的生物活性。结果 hbFGF基因插入pQE载体中 ,在M15中 6×HishbFGF的表达量达到 2 0 % ,且为可溶性表达。经一步纯化后得到N端带 6个组氨酸的hbFGF蛋白 ,纯度为 96 % ,6×HishbFGF具有免疫原性及促进NIH3T3细胞增殖的活性。结论 6×HishbFGF蛋白质在M15中可溶性地高效表达 ,并经一步亲和层析得到纯度高活性高的产物 ,降低了生产成本 。 刘秋英 王一飞 熊盛 胡红梅 钱垂文 张美英 冉延超 袁茵 吴志聪关键词:人碱性成纤维细胞生长因子 可溶性表达 银杏叶提取物对叔丁基过氧化氢损伤人脐带间充质干细胞的干预作用 被引量:3 2015年 【目的】观察银杏叶提取物EGb761对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)损伤的干预作用。【方法】取原代培养的hUC-MSCs,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,确定建立氧化应激损伤细胞模型所需的t-BHP浓度以及EGb761的最适作用浓度;采用Annexin V异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(FITC/PI)双染流式细胞术测定100 mg/L EGb761对100μmol/L t-BHP所致hUC-MSCs凋亡的影响,同时检测脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,并采用实时荧光定量PCR观察p53和p21Cip1/Waf1表达水平的改变。【结果】用10~200 mg/L的EGb761预处理3 h可降低hUC-MSCs对100μmol/L t-BHP所致细胞增殖抑制的敏感性,浓度超过100 mg/L后EGb761对hUC-MSCs的保护效果无明显提高;100 mg/L EGb761可显著抑制100μmol/L t-BHP作用6 h后对hUC-MSCs凋亡及其胞内MDA的诱导作用,保持hUC-MSCs内的SOD活性,并显著降低t-BHP损伤的hUC-MSCs内p53和p21Cip1/Waf1的表达。【结论】 EGb761具有保护被氧化应激损伤的hUC-MSCs的作用,其机制可能与p53/p21信号通路的下调有关。 袁茵 王辉 鲁欣关键词:人脐带间充质干细胞 基因表达调控 Cultural and luminescent Conditions of a Marine luminous Bacterium 2008年 Study of marine noctilucence in marine is important to fishery, environmental monitoring and military affairs. A luminous bacterial strain D2 was isolated from the marine sediment samples collected near Donghai Island in Zhanjiang, China. The primary cultural and luminescent conditions of luminous bacterium D2 which was identified as Vibrio sp. were determined in liquid culture. The results showed that pH 7.0, 35 ℃, with 2.0 % NaCI, were the best growth conditions, and pH5 - 6, 20℃, OD600 0.08, with 3.0 % NaCI, were the optimal luminescent conditions. 方宏达 董燕红 袁茵 李秀芹 易斌RNAi技术的医疗应用潜力 被引量:1 2003年 RNA干扰是指双链RNA在细胞内特异性地诱导同源互补的mRNA降解 ,从而阻断相应基因表达的现象。RNAi发展成为一种新型的基因治疗方式的进程取决于哺乳动物RNAi的研究进展。在大多数哺乳动物细胞中 ,直接导入长dsRNA引发的非特异性基因沉默掩盖了RNAi效应 ,而多种有效的双链RNA导入方式在一定程度上解决了这一问题。初步的实验结果表明 ,用RNAi治疗癌症。 袁茵 王一飞关键词:RNAI技术 基因治疗 SIRNA RNA干扰 经典研究案例分析在大学遗传学教学中的应用 被引量:3 2013年 反映遗传学家原创性工作的一系列经典研究案例构成了遗传学发展史的主线,是遗传学进步的原动力,也是一批优秀的遗传学教学素材,具有潜在的教育和教学功能.实践证明,将经典研究案例应用于遗传学教学能使学生顺利地掌握遗传学的核心知识、提高学生的遗传分析能力和科学素养.在具体的教学过程中须重视在展现研究案例的同时强化教学大纲中相关的知识点,使科研案例真正为教学服务. 袁茵关键词:遗传学 教学 人乙酰肝素酶基因真核表达载体的构建与表达 2011年 目的构建人乙酰肝素酶基因(HPA)的真核表达载体pEGFP-N1/HPA,初步探讨其在人胚肾细胞293T中的表达情况。方法以pOTB7/HPA质粒为模板,PCR扩增HPA基因,经限制性内切酶酶切后,连接到pEGFP-N1载体上,并对重组表达载体pEGFP-N1/HPA进行酶切与测序鉴定。用脂质体lipefectmine2000为介导转染至293T细胞中,观察该基因在293T细胞中的表达情况。结果经限制性内切酶酶切鉴定及测序分析证实pEGFP-N1/HPA基因在771 bp处碱基c突变成t;在919 bp处碱基a突变成g,两处突变均为同义突变。该基因转染293T细胞48 h后,在荧光显微镜下可见转染的293T细胞有绿色荧光蛋白表达。结论成功构建人乙酰肝素酶基因的真核表达载体pEGFP-N1/HPA,并在人293T细胞中成功表达。 林月霞 吴志坚 袁茵 董斌 田素娟关键词:真核表达载体 转染 nm23-H1过表达对人白血病细胞系HL60细胞周期和分化的影响 被引量:1 2007年 目的探讨nm23-H1基因过表达对人早幼粒白血病细胞株HL60细胞周期及分化的影响。方法构建nm23-H1cDNA的真核表达载体pEGFP-N1-nm23H1,脂质体介导瞬时转染HL60细胞;在荧光显微镜下观察nm23-H1-EGFP融合蛋白的表达情况;流式细胞术分析细胞周期变化;NBT还原比色法检测细胞的诱导分化能力。结果转染48hnm23-H1-EGFP融合蛋白在HL60细胞内表达量最高,此时细胞周期处于S期的细胞明显增多,对分化诱导剂DMSO的敏感性下降。结论nm23-H1基因的过表达能促进HL60细胞的增殖和抑制其分化。 袁茵 鲁欣 张美英 黄树林 王一飞关键词:NM23-H1基因 白血病 细胞周期 人脐带间充质干细胞培养上清对正常人淋巴细胞各亚群比例的影响 被引量:5 2014年 目的:研究人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)培养上清对正常人外周血单个核细胞(PBMC)活化、生存及其各淋巴细胞亚群比例的影响。方法:通过密度梯度离心法分离PBMC,加入OKT3刺激,用含有hUC-MSCs培养上清的条件培养基(MSC-CM)处理PBMC,流式细胞术分析比较处理组和对照组各淋巴细胞亚群比例的变化,ELISA法检测MSC-CM对PBMC分泌IFN-γ、IL-10的影响,Annexin V/PI双染确定活化PBMC的凋亡情况。结果:MSC-CM下调了CD4+/CD8+T细胞比值,上调了PBMC中CD4+CD25+CD127lowTreg细胞的含量,而对其他淋巴细胞亚群的比例无显著影响;MSC-CM抑制了PBMCs分泌IFN-γ的能力,但对IL-10的分泌有促进作用;此外,MSC-CM对PBMCs有保护作用,降低了PBMC在OKT3刺激下的凋亡程度。结论:人脐带间充质干细胞的免疫抑制功能可不依赖于与免疫细胞的直接或间接接触,并且与诱导免疫细胞凋亡无关,促进Treg细胞的增殖和活化可能是人脐带间充质干细胞发挥其免疫抑制功能的途径之一。 陈璇 袁茵 邵红伟 卢志毅 张柳华 黄树林关键词:人脐带间充质干细胞 调节性T淋巴细胞 免疫调节 具细菌群体感应抑制活性海洋细菌的筛选鉴定 被引量:6 2006年 目的:从海洋环境中筛选对细菌群体感应有抑制作用的活性菌株,为以致病菌群体感应系统为靶点的新型疗法提供新的药用资源。方法:从海水中分离纯化细菌菌株,采用根癌农杆菌平板筛选模型筛选细菌群体感应抑制活性细菌,对筛选出的海洋细菌进行生理生化和16S rDNA序列测定,根据《伯杰氏手册》进行菌种分类鉴定。结果:从217株海洋细菌中筛选出1株能显著抑制细菌群体感应效应的海洋细菌Y2,该海洋细菌具有蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的典型特征,其16S rDNA序列与GenBank中蜡样芽孢杆菌16S rDNA的部分序列有100%的同源性。结论:海洋环境中也存在具有抑制细菌群体感应活性的微生物。 袁茵 鲁欣关键词:海洋细菌 蜡样芽孢杆菌