鲁欣
- 作品数：15 被引量：20H指数：3
- 供职机构：华南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- nm23-H1过表达对人白血病细胞系HL60细胞周期和分化的影响被引量：1
- 2007年
- 目的探讨nm23-H1基因过表达对人早幼粒白血病细胞株HL60细胞周期及分化的影响。方法构建nm23-H1cDNA的真核表达载体pEGFP-N1-nm23H1,脂质体介导瞬时转染HL60细胞;在荧光显微镜下观察nm23-H1-EGFP融合蛋白的表达情况;流式细胞术分析细胞周期变化;NBT还原比色法检测细胞的诱导分化能力。结果转染48hnm23-H1-EGFP融合蛋白在HL60细胞内表达量最高,此时细胞周期处于S期的细胞明显增多,对分化诱导剂DMSO的敏感性下降。结论nm23-H1基因的过表达能促进HL60细胞的增殖和抑制其分化。
- 袁茵鲁欣张美英黄树林王一飞
- 关键词：NM23-H1基因白血病细胞周期
- 具细菌群体感应抑制活性海洋细菌的筛选鉴定被引量：6
- 2006年
- 目的:从海洋环境中筛选对细菌群体感应有抑制作用的活性菌株,为以致病菌群体感应系统为靶点的新型疗法提供新的药用资源。方法:从海水中分离纯化细菌菌株,采用根癌农杆菌平板筛选模型筛选细菌群体感应抑制活性细菌,对筛选出的海洋细菌进行生理生化和16S rDNA序列测定,根据《伯杰氏手册》进行菌种分类鉴定。结果:从217株海洋细菌中筛选出1株能显著抑制细菌群体感应效应的海洋细菌Y2,该海洋细菌具有蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的典型特征,其16S rDNA序列与GenBank中蜡样芽孢杆菌16S rDNA的部分序列有100%的同源性。结论:海洋环境中也存在具有抑制细菌群体感应活性的微生物。
- 袁茵鲁欣
- 关键词：海洋细菌蜡样芽孢杆菌
- 银杏叶提取物对叔丁基过氧化氢损伤人脐带间充质干细胞的干预作用被引量：3
- 2015年
- 【目的】观察银杏叶提取物EGb761对叔丁基过氧化氢（t-BHP）诱导人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）损伤的干预作用。【方法】取原代培养的hUC-MSCs，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖，确定建立氧化应激损伤细胞模型所需的t-BHP浓度以及EGb761的最适作用浓度；采用Annexin V异硫氰酸荧光素/碘化丙啶（FITC/PI）双染流式细胞术测定100 mg/L EGb761对100μmol/L t-BHP所致hUC-MSCs凋亡的影响，同时检测脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化，并采用实时荧光定量PCR观察p53和p21Cip1/Waf1表达水平的改变。【结果】用10～200 mg/L的EGb761预处理3 h可降低hUC-MSCs对100μmol/L t-BHP所致细胞增殖抑制的敏感性，浓度超过100 mg/L后EGb761对hUC-MSCs的保护效果无明显提高；100 mg/L EGb761可显著抑制100μmol/L t-BHP作用6 h后对hUC-MSCs凋亡及其胞内MDA的诱导作用，保持hUC-MSCs内的SOD活性，并显著降低t-BHP损伤的hUC-MSCs内p53和p21Cip1/Waf1的表达。【结论】 EGb761具有保护被氧化应激损伤的hUC-MSCs的作用，其机制可能与p53/p21信号通路的下调有关。
- 袁茵王辉鲁欣
- 关键词：人脐带间充质干细胞基因表达调控
- 相同供体来源人脐带间充质干细胞的多批次原代分离被引量：1
- 2019年
- 目的建立一种相同供体来源人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的多批次原代分离技术,提高脐带标本利用度和干细胞产量。方法采用组织块贴壁法分离hUC-MSCs。脐带组织块贴壁培养前预先用血清浸泡;收获首批hUC-MSCs的同时,回收仅利用1次的脐带组织块,重新铺板培养,相同供体来源的脐带组织块共反复培养3次,即:分3批次从组织块中分离hUC-MSCs;同时,收集第1、2批次原代培养体系的培养上清,转瓶后单独孵育,从中收获hUC-MSCs。比较各批次hUC-MSCs的最早出现时间、第1次传代时间、细胞数量等,并鉴定其细胞形态、免疫表型、增殖及分化能力。结果用血清预先浸泡脐带组织块,可显著缩短原代细胞收获时间、提高组织块培养成功率和增加细胞产量。与初次培养的脐带组织块相比,回收的脐带组织块及其培养上清均可在较短时间内获得数量更多的原代细胞。脐带组织块通过3次贴壁培养和2次上清回收孵育所获得的原代细胞总数,为相同实验条件下传统分离方法的(27.48±3.98)倍。各批次细胞均具有典型的间充质干细胞形态、免疫表型,以及正常和相近的增殖、分化能力。结论脐带组织块具有持续多次产出hUC-MSCs的能力,其培养上清也可作为hUC-MSCs的来源,基于此建立的多批次分离方法极大地提高了源自同一脐带标本的原代干细胞的分离效率和产量,实现了相同供体hUC-MSCs的高质量、多批次稳定分离。
- 黄思瑞匡梅娜袁茵鲁欣陈丹亮
- 关键词：间充质干细胞脐带
- 洛铂抑制鼻咽癌CNE-2细胞增殖及其机制的初探被引量：4
- 2016年
- 目的:观察洛铂(LBP)对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其中机制.方法:将不同浓度的洛铂加入对数生长期的CNE-2细胞,采用倒置显微镜观察各细胞生长状态;四甲基氮唑蓝(MTT)法观察其对细胞的增殖抑制;共聚焦显微镜观察洛铂促凋亡作用;Western blot方法分析CNE-2细胞内Bcl-2蛋白表达变化.结果:共聚焦显微镜下观察洛铂作用CNE-2细胞后出现明显的凋亡学形态特征.MTT法显示洛铂能抑制细胞增殖,并呈浓度及时间依赖关系.Western blot结果显示洛铂能使CNE-2细胞Bcl-2蛋白表达水平下降.结论:洛铂能明显抑制CNE-2细胞增殖,诱导凋亡,可能与调节Bcl-2蛋白表达水平相关.
- 邹宇邓梦夏鲁欣
- 关键词：洛铂鼻咽癌CNE-2细胞BCL-2蛋白
- 去分化联合IDO基因修饰增强人脐带间充质干细胞的抗氧化应激存活及Treg细胞诱导能力被引量：1
- 2019年
- 【目的】研究去分化处理联合吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)基因修饰,对人脐带间充质干细胞(hMSC)抗氧化应激生存能力及诱导调节性T淋巴细胞(Treg)能力的影响。【方法】通过对hMSC的短暂成脂分化诱导和恢复培养,获得去分化hMSC(De-hMSC)。实验组De-hMSC感染携带IDO基因的重组逆转录病毒,对照组为感染绿色荧光蛋白(ZsGreen1)基因的De-hMSC以及正常培养的未感染De-hMSC和hMSC。通过Western blot检测被感染细胞的IDO蛋白表达,应用流式细胞术测定IDO基因修饰型De-hMSC(IDO/De-hMSC)的免疫表型,同时鉴定其成骨和成脂分化能力。利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术比较各组细胞在300μmol/L t-BHP作用下的抗氧化应激生存能力,采用三色荧光标记流式细胞术测定含各组细胞培养上清的条件培养基对正常人外周血单个核细胞(PBMC)中Treg细胞含量的影响。【结果】IDO/De-hMSC仍具有间充质干细胞的免疫表型和成骨、成脂分化能力。在300μmol/L t-BHP作用下,De-hMSC的细胞存活率较hMSC明显增加(P<0.05),经IDO基因修饰后De-hMSC的细胞存活优势无明显改变(P>0.05)。与未修饰的各对照组相比,含IDO/De-hMSC上清的条件培养基能明显上调PBMC中CD4^+CD25^+CD127^(low)Treg细胞的含量(P<0.05)。【结论】成脂去分化联合IDO基因修饰不影响hMSC的干细胞特性,并能同时增强h MSC的抗氧化应激生存能力及其对Treg细胞的诱导能力,是一种有望在免疫抑制治疗中发挥作用的间充质干细胞修饰策略。
- 匡梅娜黄思瑞鲁欣周畅胡耀华唐震林袁茵
- 关键词：人脐带间充质干细胞去分化基因修饰
- 人脐带间充质干细胞外泌体递送外源miR-130a-3p抑制人肺癌A549细胞的研究被引量：1
- 2021年
- 目的观察人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)外泌体介导的外源miR-130a-3p摄取对肺癌A549细胞的影响。方法采用超速离心法分离hUC-MSCs外泌体,透射电子显微镜鉴定外泌体形态和大小,Westernblot检测外泌体标志性蛋白(CD63、CD81)表达,纳米粒度分析仪(NTA)测定外泌体颗粒浓度和粒径分布;通过瞬时转染制备负载miR-130a-3p mimic的hUC-MSCs外泌体(130a-exo),用130a-exo处理A549细胞,RT-qPCR检测A549胞内miR-130a-3p含量,CCK-8法测定细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞凋亡。结果从hUC-MSCs培养上清中分离的纳米颗粒符合外泌体的典型特征。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,130a-exo组A549细胞的miR-130a-3p水平显著升高(P<0.01)。与对照组相比,130a-exo组A549细胞的增殖能力显著降低(P<0.01),体外迁移能力明显下降(P<0.05),早期凋亡率显著升高(P<0.05),晚期凋亡率亦明显增加(P<0.01)。结论hUC-MSCs外泌体可将外源miR-130a-3p递送至肺癌A549细胞而发挥抑癌作用。
- 李锦华陈丹亮鲁欣王宇恒唐震林袁茵
- 关键词：外泌体脐带间充质干细胞肺癌细胞系
- OP9-DL1细胞共培养系统在T细胞体外定向诱导分化中的应用
- 2012年
- T细胞是一类在机体免疫应答中起核心作用的免疫活性细胞。T细胞的分化发育指来自骨髓的淋巴样祖细胞(lymph-oid pregnitors)进入胸腺增殖、分化,并从胸腺皮质迁移至髓质,成为成熟T细胞的过程。长期以来,T细胞发育的体内外研究一直依赖于胸腺。但人或鼠的胸腺组织来源有限且取材困难,加大了T细胞发育的研究难度。近年来,随着T细胞发育过程中一些关键分子的发现及其研究的不断深入,一种可高效诱导造血干/祖细胞在体外向T细胞分化的简单模型骨髓基质细胞OP9-DL1体外培养系统得以建立,这种系统的出现大大简化了T细胞分化发育的研究,本文将就其在T细胞体外定向诱导分化中的应用作一综述。
- 袁茵鲁欣王辉邵红伟黄树林
- 关键词：基质细胞T淋巴细胞分化
- NDPK-A过表达对膀胱癌细胞株T24增殖和超微结构的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨NDPK-A过表达对人膀胱癌细胞株T24增殖能力和超微结构的影响。方法通过脂质体转染和G418筛选,建立稳定表达外源NDPK-A的T24细胞株,免疫细胞化学法检测细胞内NDPK-A表达,MTT法测定细胞增殖能力,透射电镜观察细胞的线粒体超微形态。结果 NDPK-A过表达对T24细胞的增殖有抑制作用,引起了T24细胞内线粒体的固缩、内嵴变形,或发生肿胀和内部空洞化。结论 NDPK-A对膀胱癌细胞T24的线粒体有破坏作用,可能通过抑制细胞的新陈代谢而抑制其增殖。
- 袁茵鲁欣
- 关键词：膀胱癌超微结构增殖抑制
- nm23-H1基因对乳腺癌细胞MCF-7S增殖及移动特性的影响被引量：2
- 2003年
- 目的:探讨nm23-H1基因转染乳腺癌细胞后对其增殖和转移能力的影响。方法:用人nm23-H1基因与真核表达质粒pcDNA3.1(-)构建成重组表达质粒pcDNA3.1-NMH1,转染人乳腺癌细胞MCF-7S,经G418筛选4周后,筛选出稳定表达nm23-H1的细胞株,绘制其生长曲线,检测其增殖、移动能力,用SPSS统计软件处理实验数据,分析nm23-H1基因对乳腺癌细胞的作用。结果:与对照组相比,转染nm23-H1基因的MCF-7S细胞的对数生长期延长,细胞增殖速度减慢,移动距离缩短,克隆形成率降低。结论:nm23-H1基因在乳腺癌细胞的体外实验中有抑制癌细胞生长、增殖、转移能力的作用。
- 鲁欣王一飞张美英肖巧学熊盛李久香
- 关键词：NM23基因乳腺癌脂质体抑癌基因
