胡婷婷
- 作品数:15 被引量:68H指数:4
- 供职机构:复旦大学附属华山医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家临床重点专科建设项目上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- MS—HRM检测结直肠癌患者外周血AKAP12基因及其临床意义被引量:4
- 2010年
- 目的 探讨MS-HRM法定量检测结直肠癌患者外周血中AKAP12基因甲基化程度及其临床意义.方法 采用MS-HRM法定量检测80例结直肠癌患者和20名健康人外周血中AKAP12基因的甲基化水平,并分析评价其与病理分期分级的关系.同时对MS-HRM法的重复性和与传统MSP法检测的灵敏度和检出率进行比较.结果 MS-HRM法从80例结直肠癌患者中检测到38例(47.5%)AKAP12基因启动子区域不同程度的甲基化患者(甲基化1%~20%的24例,20%~60%的12例,60%~100%的2例),20名健康人中仅检测到甲基化〈10%的2名.MS-HRM法检测AKAP12基因甲基化的灵敏度(1%)优于传统的MSP法(10%).AKAP12基因甲基化水平与结直肠癌患者的年龄、性别的差异无统计学意义(x2分别为3.13、1.70,P均〉0.05),但与结直肠癌的Dukes分期和分化程度的差异均有统计学意义(x2分别为5.93、8.41,P均=0.01).结论 外周血MS-HRM定量检测AKAP12基因甲基化程度的方法比传统MSP法灵敏度更高,AKAP12基因甲基化有望成为结直肠癌进展评估的分子指标.
- 刘维薇关明李骥胡婷婷李敏刘春芳林勇魏取好吕元
- 关键词:甲基化结直肠肿瘤
- 原发性血小板增多症及原发性骨髓纤维化患者MPL515突变的筛查被引量:3
- 2012年
- 目的建立一种能够简便、灵敏地检测原发性血小板增多症(ET)及原发性骨髓纤维化(PMF)患者外周血MPLS15突变的方法,探讨我国ET和PMF患者的MPLS15突变频率及JAK2V617F突变情况。方法选取2008至2010年复旦大学附属华山医院ET患者261例和PMF患者25例,提取患者外周血DNA。使用SYBRGreenI荧光定量PCR检测标本的JAK2V617F突变。分别采用针对MPLS15wt、MPLW515L和MPLW515K这3种基因型设计的Taqman探针,使用荧光定量PCR法检测MPLS15突变,并通过T—A克隆挑取纯克隆测序确认。结果在261例ET患者中,检测到JAK2V617F突变119例(45.6%),MPLS15突变7例(2.7%),包括5例MPLW515L突变、1例MPLW515K突变和1例MPLW515L+K突变。25例PMF患者中,JAK2V617F突变为10例(40.0%),MPL515突变为3例(12.0%),包括1例MPLW515L突变和2例MPLW515L+K突变。1例MPLW515K突变的ET患者同时伴有JAK2V617F突变。结论JAK2V617F是ET和PMF的分子标志物,而在JAK2V617F阴性的病例中,MPLS15突变则是一个重要、有益的补充。
- 许笑张心菊吴之源许小平陈波斌胡婷婷陈宇明关明
- 关键词:血小板增多骨髓纤维化JANUS激酶2突变
- 采用多重PCR结合高分辨熔解曲线法单管同时检测JAK2V617F突变和JAK2外显子12突变被引量:2
- 2014年
- 目的 建立能单管同时检测JAK2 V617F突变和外显子12突变的方法.方法 以PC-3细胞株DNA为野生型对照,分别以HEL细胞株DNA和含有JAK2外显子12突变的质粒作为JAK2V617F突变和外显子12突变的阳性对照,采用多重PCR扩增不同DNA片段,并结合高分辨熔解曲线法建立检测JAK2V617F和外显子12突变的联合检测体系.同时选取42例真性红细胞增多症患者,分别采用上述方法和常规方法在外周血中检测JAK2的2种突变.结果 采用多重PCR结合高分辨熔解曲线法成功建立了JAK2突变联合检测体系,能够同时检测JAK2V617F突变和外显子12突变,2种突变的检测灵敏度皆可达5%,2种扩增片段的溶解温度(Tm)的批间及批内变异系数都小于0.01%.42例真性红细胞增多症患者中,发现37例携有JAK2V617F突变,在5例JAK2V617F突变阴性真性红细胞增多症病例中检出2例JAK2外显子12突变.与常规方法相比,结果符合率达到100%.2例JAK2外显子12突变经克隆测序确认突变类型为H538K539delinsL和F537-I546dul10+F547L.结论 该方法可同时在外周血中检测出JAK2的2种突变,将有助于对骨髓增殖性肿瘤尤其是真性红细胞增多症的分子诊断.
- 许笑陈宇明吴之源张心菊胡婷婷张瑾关明
- 关键词:JANUS激酶2突变多重聚合酶链反应高分辨率熔解曲线
- 运用不同荧光定量PCR系统检测HBV-DNA定量检测的偏差评估
- 目的使用患者样本在不同荧光定量PCR分析系统中检测HBV-DNA,进行方法比较及偏差评估。方法采用40例慢性乙型肝炎患者血清分别在ABI PRISM7000荧光定量PCR仪和Roche LightCycler 480II...
- 胡婷婷刘维薇陈宇明袁超关明
- 从286例原发性血小板增多症及原发性骨髓纤维化患者中筛查MPL515突变
- 目的骨髓增殖性肿瘤(MPN),包括慢性粒细胞白血病(CML)、真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)和原发性骨髓纤维化(PMF)等疾病。如今,研究者们陆续发现了多种与MPN发病密切相关分子生物学证据,其中J...
- 许笑张心菊吴之源许小平陈波斌胡婷婷陈宇明关明
- 医学实验室质量和能力认可准则(ISO15189:2012)专用要求概述被引量:45
- 2013年
- 为了更好地适应国际标准管理规范对医学实验室的要求,本文从ISO 15189:2007版与ISO 15189:2012版的不同之处入手,对2012年新版相关条款作详细的解读。并以此作为切入点,旨在加深对实验室质量和能力认可体系的认识。
- 胡婷婷刘维薇
- 关键词:ISO
- 运用不同荧光定量PCR系统检测HBV—DNA定量检测的偏差评估被引量:2
- 2012年
- 随着定量PCR在实验诊断领域的广泛应用,许多PCR实验室同时使用两台以上不同的荧光定量PCR仪参与日常检验报告的发送。但是,由于不同的检测系统间存在着差异,导致在结果判读时产生疑问:不同仪器系统检测的结果之间究竟存在多大的差异?是否在可接受范围之内?是否需要对结果进行修正?然而,目前国内在评估定量PCR检测的结果时,对于同一实验室内所出具的报告之间一致性并没有明确的体系可供参考。室内、室间质评的监测也只能说明质控合格的系统所出具的报告是可接受的,但无法对不同系统之间的结果进行比较分析。
- 胡婷婷刘维薇陈宇明袁超关明
- 关键词:CR系统DNAHBV定量PCR检测
- 乙型肝炎病毒耐药基因测序检测性能验证被引量:2
- 2014年
- 目的:探讨在ISO15189以及美国病理学家协会( CAP)实验室认可体系下,建立使用一代测序(Sanger测序法)进行乙型肝炎病毒(HBV)耐药基因检测的项目性能验证标准。方法方法学建立。2012年8至12月收集复旦大学附属华山医院肝炎门诊及住院患者中临床表现HBV耐药患者25例。从测定下限、精密度、正确性、分析特异性、可报告范围/参考范围等方面进行性能评估。测序质量的验证基于整体测序图谱的荧光信号值、性噪比、测序峰图、QV值等评估参数进行。结果可检测出正常背景下10%~20%的突变;有较好的精密度;正确性100%;未发现有明显干扰及交叉污染。结论测序方法的性能验证要结合实际应用。特别是测序分析的质量评估需要针对不同的检测目的以及检测对象建立相关标准并适当进行调整以符合临床需要。本试验方法检测乙型肝炎耐药基因可应用于临床检测。
- 胡婷婷陈宇明关明刘维薇
- 关键词:肝炎病毒乙型病毒病毒病毒载量DNA
- JAK2 46/1单倍体与中国上海地区汉族骨髓增殖性肿瘤患者的相关性研究
- 目的研究中国汉族人群中JAK2 46/1单倍体的标签SNP rs 12343867的基因型与骨髓增殖性肿瘤(myeloprol iferative neoplasms,MPNs)患病易感性关系以及与JAK2 V617F突...
- 胡婷婷张心菊关明
- 文献传递
- 快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因的PCR方法学评价
- 2013年
- 目的对PCR法直接检测标本中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药基因mecA的可靠性进行评估。方法用经细菌表型鉴定的70株临床标本分离株进行方法学评估,其中MRSA 22株,非MRSA 48株,检测其最低检测限、重复性、灵敏度和特异性。同时对269份临床标本,包括67份痰液、82份血液、68份尿液以及52份无菌体液进行PCR检测和细菌表型鉴定,分析结果符合率。结果 PCR法的最低检测限为5×104CFU/mL;菌数5×106和5×104CFU/mL标本的批内变异系数(CV)为0.81%、0.94%,批间CV为1.48%、2.03%;检测经表型鉴定的菌株,敏感性和特异性均达到100%。痰液标本PCR检测和细菌表型鉴定符合率为98%,血液、尿液和其他体液标本均为100%。结论 PCR法检测mecA耐药基因,方便、快速且最低检测下限和重复性等性能指标均比较理想,与表型鉴定符合率较高,适于临床应用。
- 陈宇明胡婷婷倪洁王蓓蒋晓飞关明徐峰刘维薇
- 关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MECA基因