王芳
- 作品数：52 被引量：112H指数：5
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科技统筹创新工程计划项目长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教文化科学更多>>
- 带有小鼠CD40L基因的汉滩病毒糖蛋白表达载体的构建
- 2017年
- 目的:构建汉滩病毒包膜糖蛋白基因的真核表达载体,并加入可增强免疫应答效应的细胞因子CD40L基因,检测其可否在真核细胞中表达。方法与结果:参照GenBank中汉滩病毒M基因和小鼠CD40L的全基因序列设计引物,通过聚合酶链反应(PCR)获得M和CD40L基因片段,将其与pCI-neo载体相连,测序证实该载体构建成功后,将此真核表达载体以脂质体转染法转染至哺乳动物细胞CHO-K1中,利用间接免疫荧光法(IFA)检测发现M基因和CD40L基因可以同时表达于CHO-K1细胞中。结论:构建了带有CD40L基因的汉滩病毒包膜糖蛋白重组质粒并获得表达,为深入研究汉滩病毒感染后包膜糖蛋白引起的特异性免疫应答规律奠定了实验基础。
- 冯伟张尧张晓晓应旗康刘梓谕吴兴安王芳
- 关键词：汉滩病毒包膜糖蛋白CD40L
- 汉滩病毒感染小鼠腹腔巨噬细胞模型的建立
- 2017年
- 目的:建立汉滩病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞模型。方法:PBS灌洗6~8周龄C57BL/6小鼠腹腔,分离获取小鼠腹腔巨噬细胞后,以100 TCID50汉滩病毒76-118株感染小鼠腹腔巨噬细胞,通过间接免疫荧光、ELISA和Realtime PCR检测病毒感染情况。结果:病毒感染3 d后,间接免疫荧光和ELISA检测到病毒核衣壳蛋白的表达,Realtime PCR检测到病毒核酸的表达。结论:建立了汉滩病毒感染小鼠腹腔巨噬细胞的模型,为进一步阐明汉滩病毒的发病机制奠定了基础。
- 张尧冯伟张晓晓应旗康刘梓谕吴兴安王芳
- 关键词：汉滩病毒小鼠腹腔巨噬细胞
- 汉滩病毒感染SCID小鼠动物模型的建立
- 2016年
- 目的通过检测汉滩病毒(HTNV)76-118株感染SCID小鼠组织中的特异性病毒抗原、核酸的分布以及病理学变化,以建立汉滩病毒感染动物的评价体系。方法取汉滩病毒76-118株病毒液通过肌肉注射接种SCID小鼠,接种3 d后,取小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等组织,并分别利用ELISA法检测各组织中的病毒特异性抗原;利用q RT-PCR法检测各组织中的病毒RNA;利用HE染色法检测各组织中的病理学变化。结果SCID小鼠感染汉滩病毒后,用夹心ELISA法可在其心、肝、脾、肺、肾组织中检测到HTNV特异性抗原,平均P/N值分别为2.33、7.41、8.13、7.40、2.89,其中脾病毒抗原含量最高;以q RT-PCR法检测小鼠各脏器组织中的HTNV核酸,在实验组小鼠的心、肝、脾、肺、肾中均可检测到病毒核酸,与对照组相比,其相对量分别达到2^(2.11)、2^(6.23)、2^(8.21)、2^(5.26)、2^(3.79)倍,其中脾病毒核酸含量最多;HE染色法可见肝、脾、肺中伴有显著的病理学变化。结论成功检测了汉滩病毒感染SCID小鼠后组织中特异性抗原、核酸的分布以及病理学变化,从而为建立汉滩病毒感染动物的评价体系提供一种参考。
- 马瑞雪程林峰马铁军王敬增应旗康张晓晓刘蓉蓉王芳张芳琳吴兴安
- 关键词：汉滩病毒SCID小鼠抗原病理学变化
- 计算机发展对现代教育技术的影响被引量：1
- 2005年
- 周智明卢虹冰王舒宜张国鹏王芳
- 关键词：现代教育技术教育领域教育界优化教育高素质人才
- 柴桂安神胶囊质量标准研究被引量：2
- 2011年
- 目的:建立柴桂安神胶囊的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对本方中的桂枝、川芎、白术进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法对处方中主要成分阿魏酸进行含量测定。结果:在TLC色谱中,待检测药材斑点清晰,与其他成分分离度好;阿魏酸在0.03μg～0.5μg范围呈良好的线性关系,r=0.998,平均回收率100.27%,RSD为0.89%。结论:所建立的方法可靠准确地进行定性、定量检测,可用于该制剂的质量控制。
- 王芳吴昱刘玉林刘子冬
- 关键词：阿魏酸薄层色谱法高效液相色谱法
- 糖脉宁胶囊药效学研究被引量：2
- 2014年
- 目的:研究糖脉宁胶囊对糖尿病及其并发症的药理作用。方法:采用高血糖模型大鼠、高血脂模型大鼠及视神经损害大鼠模型,分成正常对照组、模型对照组、阳性对照组、糖脉宁胶囊低、中、高剂量组(8 g/kg、16 g/kg、24g/kg),共6组进行糖脉宁胶囊药效学研究。结果:中、高剂量组糖脉宁胶囊能显著降低造模大鼠的血糖、血脂水平,对视神经损伤的大鼠有一定疗效。结论:糖脉宁胶囊能显著降低高血糖大鼠的血糖、血脂水平,对视神经损伤的大鼠有一定疗效。
- 王芳刘子冬张星刘玉林
- 关键词：血糖血脂视神经损伤
- HTNV嵌合VLP促进小鼠骨髓细胞活化的实验研究被引量：1
- 2016年
- 目的探讨嵌合有免疫刺激分子CD40配体(CD40L)或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的汉滩病毒(HTNV)样颗粒(VLP)对小鼠骨髓细胞活化的影响,以确定嵌合汉滩病毒样颗粒的生物学活性。方法利用真核细胞瞬时表达VLP、VLP-CD40L、VLP-GM-CSF,纯化后与小鼠骨髓细胞共培养,通过流式细胞术检测小鼠骨髓细胞活化情况。结果三种汉滩病毒VLP均能促进小鼠骨髓细胞活化(P<0.05),其中嵌合有GM-CSF因子的VLP促进小鼠骨髓细胞活化更为明显(P<0.01)。结论真核细胞表达的三种汉滩病毒VLP均有一定的生物学活性,为进一步研究汉滩病毒VLP疫苗奠定基础。
- 马铁军张晓晓刘蓉蓉应旗康马瑞雪王敬增程林峰刘梓谕王芳吴兴安
- 关键词：汉滩病毒CD40LGM-CSF
- 新兵利他主义及其心理社会影响因素研究被引量：5
- 2011年
- 目的探讨新兵利他主义与心理社会影响因素的相关性,为其心理健康教育提供依据。方法采用人性的哲学量表中的利他主义分量表、症状自评量表、卡特尔16种人格因素问卷、生活事件量表对562名新兵进行心理测评。统计处理采用秩变换单因素方差分析、Spearm an相关分析及Am os路径分析。结果新兵利他主义在受教育程度维度上存在显著差异;新兵利他主义与个性因素（r=0.115~0.321,P〈0.01）、SCL-90总分及因子（r=0.109~0.262,P〈0.01）存在显著相关;新兵利他主义正性与负性事件总分、负性工作学习事件存在显著相关（r=-0.099,-0.084,P〈0.05）;Am os路径分析显示存在3条显著路径：①心理健康→个性→正性利他主义;②个性→负性利他主义;③心理健康→个性→负性利他主义。揭示个性对新兵利他主义的直接效应（β=0.38,P〈0.001）及其在心理健康与利他主义之间的间接效应显著（β=0.12,0.19,P〈0.001）。结论新兵利他主义受心理健康、个性、生活事件因素的影响,且个性因素起着重要的作用。
- 陈曦刘传勇娄振山王芳
- 关键词：新兵利他主义心理社会因素
- qRT-PCR快速检测汉滩病毒抗体中和活性实验方法的建立
- 2017年
- 目的:建立一种基于qRT-PCR的微量细胞中和实验改良法,快速、定量检测汉滩病毒感染中的中和抗体活性。方法:将本室前期制备的抗汉滩病毒高中和活性鼠源性单抗3G1、鼠/人嵌合单抗1D9和感染剂量为100 TCID50的病毒混合液于37℃孵育1 h后感染Vero-E6细胞,提取细胞总RNA。根据GenBank数据库中汉滩病毒76-118株S基因序列设计特异性引物,在上述实验基础上以细胞总RNA为检测样品,建立qRT-PCR快速、定量检测汉滩病毒感染中中和抗体活性的实验方法。结果和结论:建立了一种基于qRT-PCR的微量细胞中和实验改良法,可定量测定汉滩病毒感染中的中和抗体活性,该法具有快速、灵敏、特异和重复性好等优点。
- 张晓晓张尧冯伟程林峰王芳应旗康马瑞雪马铁军刘梓谕刘蓉蓉张亮叶伟张芳琳徐志凯吴兴安
- 关键词：汉滩病毒QRT-PCR中和抗体肾综合征出血热
- 重组抗HER2 ScFv／tBid基因的表达对SGC7901胃癌细胞的促凋亡作用
- 2006年
- 目的:构建重组抗HER2 ScFv／tBid载体并观察其对胃癌SGC7901细胞的促凋亡作用。方法:将重组抗HER2 ScFv／tBid基因克隆入真核表达载体pCMV中,转染SGC7901细胞,用RT- PCR方法检测目的基因在mRNA水平的表达,间接免疫荧光法检测目的蛋白表达和细胞形态学变化,通过细胞计数检测转染目的基因后对细胞生长的影响,通过检测细胞周期来观察其促凋亡作用。结果:转染SGC7901细胞后,检测出目的蛋白的表达。细胞计数发现细胞的增殖被明显抑制。细胞周期分析有明显的凋亡峰出现,说明重组抗HER2 ScFv／tBid表达后有促凋亡作用。结论:重组抗HER2 ScFv／tBid基因可以在转染的SGC7901细胞中表达,并且可抑制转染细胞的生长,诱导细胞发生凋亡。
- 王芳王立锋裘秀春许彦鸣鲍炜孟艳玲王成济范清宇杨安钢
