王艇
- 作品数：5 被引量：15H指数：2
- 供职机构：大连医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省科技厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 逆转录病毒载体介导人核糖核酸酶抑制因子体内抑制B16黑色素瘤生长
- 该文所用的逆转录病毒载体pLNCX有来源于鼠莫氏白血病病毒和鼠莫氏肉瘤病毒的长末端重复序列(LTR)及巨细胞病毒即早启动子(P<,CMV>)和一个新霉素筛选标记(neo).该载体质粒一旦被转染入包装细胞系PA317即可被...
- 王艇
- 关键词：核糖核酸酶抑制因子逆转录病毒载体B16黑色素瘤基因治疗
- 文献传递
- 融合蛋白GST-hRI的可溶性表达及对CCl_4引起的急性肝损伤的保护作用被引量：4
- 2009年
- 目的:观察可溶性表达的融合蛋白GST-hRI对CCl4引起的急性肝损伤的保护作用。方法:构建pGEX-6p-1-hri表达质粒。在0.5 mol/L IPTG浓度下,调整温度诱导目的融合蛋白的最大可溶性表达。用Western Blotting检测GST-hRI的表达,用亲和层析法对GST-hRI进行分离纯化。将纯化后的GST-hRI腹腔注射给BALB/c小鼠,预先保护7 d后,再腹腔注射CCl4造成急性肝损伤。检测小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平和肝脏的超氧化物歧化酶、黄嘌呤氧化酶、丙二醛、谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧物酶指标,并在光镜下检测肝细胞的损伤程度。结果:0.5 mmol/L IPTG,26℃诱导表达8 h,超声破碎菌体所得到的上清中可溶性GST-hRI的表达量约占超声离心后上清总蛋白4.5%,与沉淀中的比例约为27%。与CCl4损伤组相比,GST-hRI治疗组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶和丙二醛水平明显下降(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽水平明显增加(P<0.05),黄嘌呤氧化酶水平基本没有变化。与hRI治疗组相比,GST-hRI治疗组的各项指标差异有统计学意义(P<0.05)。与维生素C处理组相比,GST-hRI处理组的各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:可溶性表达的融合蛋白GST-hRI具有对抗CCl4对小鼠肝损伤的作用,这为hRI的应用提供了实验基础。
- 杨明洁王艇樊建慧王冬梅崔秀云赵宝昌田余祥
- 关键词：急性肝损伤核糖核酸酶抑制因子CCL4抗氧化作用
- 人核糖核酸酶抑制因子对小鼠B16黑素瘤的基因治疗研究被引量：1
- 2005年
- 目的 观察人核糖核酸酶抑制因子(RI)逆转录病毒真核表达载体(p L NCX- ri)对小鼠B16黑素瘤生长的抑制作用。方法 将转染细胞PA317- p L NCX和PA317- p L NCX- ri分别置于DMEM培养基上,经G4 18筛选培养。用Sepharose CL- 4 B凝胶过滤层析纯化病毒颗粒。经G4 18筛选培养,在倒置相差显微镜下计数克隆细胞数。用RT- PCR方法和Western blotting方法检测被感染的NIH3T3细胞及B16黑素瘤组织中RI基因的表达。给接种B16黑素瘤细胞的C5 7BL/ 6 J小鼠分别皮下注射纯化的p L NCX- ri病毒和空载体病毒,观察C5 7BL/ 6 J小鼠肿瘤的生长状况,并对肿瘤组织称重。镜下观察肿瘤组织切片的血管密度。结果 RI在感染了p L NCX- ri病毒的NIH3T3细胞和B16黑素瘤组织中得到有效表达。p L NCX- ri病毒治疗组的瘤组织重量(0 .6 0±0 .2 6 ) g明显低于p L NCX病毒对照组(1.84±1.6 4 ) g(P<0 .0 1)和生理盐水对照组(1.77±1.13) g(P<0 .0 1)。p L NCX病毒对照组(1.84±1.6 4 ) g和生理盐水对照组(1.77±1.13) g无显著性差异(P>0 .0 5 )。与p L NCX病毒对照组和生理盐水对照组相比,p L NCX- ri病毒治疗组肿瘤组织的血管密度明显减少,而两对照组间无明显差异。结论 人核糖核酸酶抑制因子(RI)
- 田余祥王艇杨明杰张良刘亚斌孙琳李静黄俊崔秀云
- 关键词：蛋白质类转染基因疗法
- 逆转录病毒介导的人核糖核酸酶抑制因子对小鼠黑色素瘤生长的抑制作用研究
- 目的:探讨将人核糖核酸酶抑制因子(RI)基因转染到C57/BL纯系小鼠骨髓造血细胞中使其过表达,从而通过抑制血管生长因子(Ang)的活性来抑制肿瘤血管生成达到抑制肿瘤的生长的可行性.方法:用逆转录病毒感染小鼠骨髓造血细胞...
- 傅攀峰陈俊霞王艇于丽华崔秀云
- 关键词：核糖核酸酶抑制因子逆转录病毒载体肿瘤生长黑色素瘤
- 文献传递
- DNA甲基化抑制剂对肿瘤细胞中核糖核酸酶抑制因子表达下调的影响(英文)被引量：10
- 2004年
- 背景与目的:人核糖核酸酶抑制因子(ribonucleaseinhibitor,RI)RI能有效抑制血管生成因子诱导的血管形成及某些可移植性实体瘤在动物体内的生长。然而,RI抗肿瘤的分子机制还未完全阐明。许多抑癌基因通过启动子区域异常的甲基化而使表达缺失,去甲基化抑制能使其表达恢复。为了进一步了解RI的功能以及探讨RI与肿瘤发生的关系,本实验拟研究甲基化抑制剂5-aza-2'-deoxycytidine(5-Aza-CdR)对肿瘤细胞中RI表达的影响。方法:用5-Aza-CdR作用人乳腺癌细胞系MCF-7、人胃癌细胞系BGC-823、人的前列腺癌细胞系DU-145和人结肠癌细胞系HT-29。通过RT-PCR,蛋白免疫印迹法(Westernblot),免疫荧光(immunofluorescence)和免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术分析RI基因的表达。结果:与对照组比较,5-Aza-CdR能显著提高RI基因在MCF-7、BGC-823和DU-145细胞中的表达,RT-PCR检测结果分别为37.2%、46.0%和32.4%,Westernblot检测结果分别为26.4%、20.9%和24.4%(P<0.01);但对HT-29细胞没有明显的影响。结论:RI基因可能与胃癌、前列腺癌和乳腺癌的发生有关。
- 陈俊霞傅攀峰王艇崔秀云
- 关键词：核糖核酸酶抑制因子肿瘤基因表达
