王厚鹏
- 作品数：22 被引量：45H指数：4
- 供职机构：中国科学院水生生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国科学院重点部署项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学自动化与计算机技术航空宇航科学技术更多>>
- 一种提高鱼类omega-3多不饱和脂肪酸的方法及应用
- 本发明公开了一种提高鱼类omega-3多不饱和脂肪酸的方法及应用，其步骤为：1，构建fat2转基因鱼类家系；2，构建fat1转基因鱼类家系；3，以两个转基因家系为亲本，杂交获得同时表达fat2和fat1基因的富含omeg...
- 孙永华庞少臣王厚鹏朱作言康景轩
- 文献传递
- 一种基于靶点内回文序列介导的MMEJ靶向基因组修饰方法和应用
- 本发明属于生物技术领域，公开了一种基于靶点内回文序列介导的MMEJ靶向基因组修饰方法和应用。本发明利用CRISPR/Cas9系统借助内外源同一靶点反向互补后形成6bp的微同源序列可对鱼类基因进行内源修饰标记。以斑马鱼为例...
- 王厚鹏孙永华何牡丹叶鼎王小四
- 文献传递
- 基于冗余资源实时重构的飞行器控制系统及其工作方法
- 本公开的实施例提供了一种基于冗余资源实时重构的飞行器控制系统及其工作方法。所述系统，包括管理节点、一个或多个工作节点；其中，所述管理节点，用于获取控制系统的资源状态信息和任务执行情况信息的全局视图；根据任务需求，实现功能...
- 曹素芝王厚鹏闫蕾
- 稀有鮈鲫ER基因的克隆及内分泌干扰物对其表达的影响
- 内分泌干扰物（Endocrine disrupting chemicals, EDCs）具有类激素的作用，能够干扰生物包括人类在内的正常的内分泌功能，环境雌激素是其中重要的一员。雌激素在脊椎动物的许多生理过程中起着重要的...
- 王厚鹏
- 关键词：雌激素受体内分泌干扰物PCR
- 文献传递
- 团头鲂nanos3基因的克隆鉴定被引量：3
- 2019年
- 为了标记团头鲂(Megalobrama amblycephala)的原始生殖细胞(Primordial Germ Cells, PGCs),首次克隆并鉴定了团头鲂nanos3基因(mananos3)。mananos3全长1027 bp,包括48 bp 5′UTR (5′untranslated Region),490 bp 3′UTR和489 bp开放阅读框(Open Reading Frame, ORF)。该基因编码162个氨基酸。通过序列比对发现Mananos3蛋白和其他物种Nanos蛋白一样,存在一个保守的RNA结合功能域,该功能域包含一个锌指基序(Motif)。系统发育树结果显示, Mananos3与鲤(Cyprinus carpio)的Nanos3最为相近。半定量和定量PCR结果表明, mananos3具有较高的母源表达,并在胚胎发育早期高量表达,而在1000细胞期之后表达量逐渐降低。在成体组织中, mananos3仅在卵巢中检测到表达。mananos3和斑马鱼(Danio rerio) nanos3 (zfnanos3)的3′UTR均可以介导绿色荧光蛋白特异标记团头鲂和斑马鱼胚胎发育早期的PGCs,但是mananos3的3′UTR能够更特异地标记团头鲂的PGCs。通过比对mananos3和zfnanos3的3′UTR发现, mananos3的3′UTR中有一个非经典的miR430识别位点(GCACTA)。通过对该位点的突变研究证实其有利于nanos3在非PGCs组织中的降解。综上所述,团头鲂mananos3的3′UTR序列中的非经典miR430识别位点(GCACTA)可能与介导报告基因在PGCs中特异表达相关。
- 朱林王厚鹏朱作言孙永华叶鼎
- 关键词：团头鲂原始生殖细胞斑马鱼
- 两种密码子优化的Cas9编码基因在斑马鱼胚胎中基因敲除效率的比较被引量：7
- 2016年
- 为在斑马鱼中获得特异且高效的基因敲除,多个实验室独立人工合成了序列彼此不一的Cas9 c DNA序列,并克隆入不同的体外转录载体。本文选取两种斑马鱼密码子优化的Cas9编码序列(z Cas9_bz和z Cas9_wc),对斑马鱼胚胎中的7个基因(外源egfp及内源chd、hbegfa、th、eef1a1b、tyr、tcf7l1a)分别进行敲除,通过PCR产物测序、克隆测序和表型分析比较了两种Cas9的敲除效率。结果发现,z Cas9_wc在各种情况下都显现出较高的敲除效率,而z Cas9_bz的效率相对较低。
- 张峰华王厚鹏黄思雨熊凤朱作言孙永华
- 关键词：斑马鱼基因敲除
- 一种可标记鱼类生殖干细胞的多克隆抗体的制备方法
- 本发明涉及分子生物学领域，具体涉及一种可标记鱼类生殖干细胞的多克隆抗体的制备方法。本发明采用斑马鱼Nanos2蛋白质作为免疫原免疫动物制备得到，制备得到的抗体通过特异性识别生殖干细胞特异性分子标记蛋白质Nanos2，能够...
- 叶鼎孙永华张泉清何牡丹王厚鹏
- 文献传递
- 稀有鮈鲫芳香化酶基因的表达及内分泌干扰物(EDCs)暴露对其表达的影响被引量：5
- 2011年
- 克隆稀有鮈鲫芳香化酶基因（cyp19a和cyp19b）片段,半定量方法检测其组织表达特异性,实时定量PCR检测2基因在孵化后18~50 d幼鱼的发育阶段表达情况,对成鱼进行3 d的乙炔基雌二醇（EE2,1 nmol/L）和壬基酚（NP,1μmol/L）药物暴露试验,实时定量PCR检测它们对2个基因表达的影响。结果显示,克隆获得759 bp的cyp19a和407 bp的cyp19b片段,cyp19a主要在卵巢中表达,cyp19b主要在脑中表达。在幼鱼发育阶段,cyp19a的表达没有显著差异,cyp19b在38 d后出现明显的下降;成体稀有鮈鲫cyp19a受到EE2极显著抑制（0.23倍,P〈0.01）,但NP抑制效果不显著（0.59倍）,cyp19b在EE2和NP暴露后都有上调的趋势（1.83、1.02倍）。说明cyp19基因可以作为EDCs的作用靶分子,有助于对高等脊椎动物包括人类进行预测和风险评估。
- 王晶晶刘小林秦芳王厚鹏吴婷婷胡晓齐王在照
- 关键词：CYP19
- 稀有鮈鲫雄激素受体基因的克隆和内分泌干扰物对其表达的影响被引量：5
- 2011年
- 采用RT-PCR和RACE法分离了稀有鮈鲫（Gobiocypris rarus）精巢雄激素受体基因（AR）的cDNA,其核苷酸序列3 130 bp,编码844个氨基酸。它的氨基酸序列与鲤科鱼类AR的同源性较高。AR基因在稀有鮈鲫的性腺、肝、脑、肠和肌肉等组织中均有表达,在雄性个体中精巢和肝脏的表达量最高,其他组织较低,而在雌性个体除肌肉中表达量较低外,其他组织均为中等水平的表达。0.01和0.1 nmol/L的乙炔基雌二醇暴露3 d后,能够分别非显著和显著地提高稀有鮈鲫幼鱼AR的mRNA表达,而1 nmol/L的乙炔基雌二醇则对其表达有下调的趋势,0.1~10 nmol/L的双酚A对其表达均有显著下调,0.01μmol/L壬基酚对其表达有显著下调,而0.1和1μmol/L壬基酚对其表达均有下调的趋势,因此不同种类内分泌干扰物及其不同暴露浓度对稀有鮈鲫AR的mRNA表达有不同影响。
- 胡晓齐王晶晶王厚鹏吴婷婷秦芳任战军王在照
- 关键词：雄激素受体CDNA克隆内分泌干扰物实时定量PCR
- 斑马鱼ca15b的克隆及在原始生殖细胞中的特异表达被引量：2
- 2014年
- 高保真PCR克隆获得了ca15b基因的全长,利用胚胎整体原位杂交等技术研究了ca15b基因在斑马鱼早期发育过程中的动态表达。结果发现,ca15b在斑马鱼早期发育过程中存在显著的原始生殖细胞(Primordial germ cell,PGC)特异表达模式。ca15b是一个母源性表达的基因:在分裂期的胚胎中,其mRNA集中分布于位于分裂沟的生殖质(Germ plasm);从囊胚期开始,可以观察到其在PGC中的特异表达;在原肠胚中,其mRNA在体细胞中急剧降解,仅特异表达于PGC,这一表达特征一直持续到受精后1d的胚胎。将体外合成的包含5′UTR和3′UTR的ca15b全长mRNA注射到斑马鱼胚胎后,仅能增强原肠期之前胚胎中ca15b的整体杂交信号;在原肠胚期之后,注射的mRNA在体细胞中快速降解。这提示在ca15b mRNA上可能存在某种转录后调控其在早期胚胎体细胞中降解而在PGC中稳定存在的机制。
- 杨明宇王厚鹏朱作言孙永华
- 关键词：斑马鱼原始生殖细胞
