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熊凤: 作品数：12 被引量：14H指数：3; 供职机构：中国科学院水生生物研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中国科学院重点部署项目全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>; 相关领域：生物学自动化与计算机技术医药卫生更多>>

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一种定向筛选同源重组PGC的载体及构建方法和应用: 本发明公开了一种定向筛选同源重组PGC的载体及制备方法和应用，将表达框UAS:mRFP-UTRnos1和表达框UAS:puma-UTRnos1串联构建出一种可定向筛选同源重组PGC的载体p(U...; 孙永华熊凤魏志强朱作言; 文献传递

抑制Ligase4或Xrcc6活性增强斑马鱼原始生殖细胞中DNA同源重组的效率(英文)被引量：4: 2015年; 利用斑马鱼作为体内模型,研究旨在提高斑马鱼原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)中同源重组(Homologous recombination,HR)的效率。首先,将UAS:m RFP-nos1载体显微注射到Tg(kop:Kal TA4)转基因胚胎中标记转基因PGCs,结果表明筛选PGCs特异表达m RFP的胚胎能够相对提高转基因的生殖系传递效率。随后建立了PGCs中HR效率的评估体系,并且证明抑制DNA ligase IV(Lig4)和Xrcc6(曾用名Ku70)的活性不但在全胚胎水平,而且在PGCs水平都能够显著提高HR的效率。研究表明Tg(kop:Kal TA4)转基因品系是开展HR介导的基因打靶的一个有效平台。; 魏志强熊凤何牡丹王厚鹏朱作言孙永华; 关键词：斑马鱼原始生殖细胞基因打靶同源重组 LIGASE

国家斑马鱼资源中心的资源、技术和服务建设被引量：5: 2018年; 随着我国斑马鱼研究群体的日益壮大,对各类斑马鱼研究资源和技术的需求日益增加,国家斑马鱼资源中心(China Zebrafish Resource Center,CZRC,网址:http://zfish.cn)于2012年在中国科学院水生生物研究所成立。目前,CZRC已发展成为国内规模最大的单体斑马鱼养殖系统,建成包含1200多个斑马鱼品系和10 000余份冻存精子的斑马鱼资源保藏库,其中有超过200个突变和转基因品系是由CZRC自主创制。在此基础上,CZRC建立了安全规范的斑马鱼养殖和健康平台、高效的基因操作平台和稳定高效的精子冻存平台。CZRC致力于为国内外从事斑马鱼研究的科研人员提供各类服务,包括提供斑马鱼品系等资源服务、转基因和基因敲除等技术服务、养殖和健康等咨询服务,以及技术培训和学术会议服务等。经过5年的建设,CZRC已成为国际学术界公认的全球三大斑马鱼资源库之一。; 熊凤谢训卫潘鲁媛李阔宇柳力月张昀李玲璐孙永华; 关键词：斑马鱼

一种定向筛选同源重组PGC的载体及构建方法和应用: 本发明公开了一种定向筛选同源重组PGC的载体及制备方法和应用，将表达框UAS:mRFP-UTRnos1和表达框UAS:puma-UTRnos1串联构建出一种可定向筛选同源重组PGC的载体p(UAS:mRFP,UAS:pu...; 孙永华熊凤魏志强朱作言; 文献传递

两种密码子优化的Cas9编码基因在斑马鱼胚胎中基因敲除效率的比较被引量：6: 2016年; 为在斑马鱼中获得特异且高效的基因敲除,多个实验室独立人工合成了序列彼此不一的Cas9 c DNA序列,并克隆入不同的体外转录载体。本文选取两种斑马鱼密码子优化的Cas9编码序列(z Cas9_bz和z Cas9_wc),对斑马鱼胚胎中的7个基因(外源egfp及内源chd、hbegfa、th、eef1a1b、tyr、tcf7l1a)分别进行敲除,通过PCR产物测序、克隆测序和表型分析比较了两种Cas9的敲除效率。结果发现,z Cas9_wc在各种情况下都显现出较高的敲除效率,而z Cas9_bz的效率相对较低。; 张峰华王厚鹏黄思雨熊凤朱作言孙永华; 关键词：斑马鱼基因敲除

一种用于原始生殖细胞靶向突变的转基因载体及制备方法和用途: 本发明公开了一种用于原始生殖细胞靶向突变的转基因载体及制备方法和用途。将本发明提供的载体pTol2(UAS:Cas9)导入单细胞期斑马鱼胚胎，获得的Tg(UAS:Cas9)品系与Tg(kop:...; 熊凤孙永华叶鼎朱作言; 文献传递

一种鱼类持续激活生长激素受体基因及制备方法和用途: 本发明公开了一种鱼类持续激活生长激素受体基因及制备方法和用途。通过对鲤鱼GHR信号肽、c-Jun亮氨酸拉链区以及GHR跨膜区和胞内区分别采取PCR扩增，结合又一轮的搭桥PCR扩增，获得持续激活的GHR重组基因片段；将获得...; 孙永华朱作言熊凤伊斯提亚克迈克沃特斯; 文献传递

一种斑马鱼实验管理系统: 本发明公开了一种斑马鱼实验管理系统，包括斑马鱼遗传信息管理模块，斑马鱼遗传信息管理模块包括斑马鱼基因型管理模块、斑马鱼品系管理模块和斑马鱼活体传代管理模块，还包括斑马鱼鱼房管理模块，斑马鱼鱼房管理模块包括斑马鱼鱼房结构设...; 潘鲁湲张昀李玲璐李阔宇柳力月谢训卫熊凤孙永华; 文献传递

一种用于原始生殖细胞靶向突变的转基因载体及制备方法和用途: 本发明公开了一种用于原始生殖细胞靶向突变的转基因载体及制备方法和用途。将本发明提供的载体pTol2(UAS:Cas9)导入单细胞期斑马鱼胚胎，获得的Tg(UAS:Cas9)品系与&l...; 熊凤孙永华叶鼎朱作言; 文献传递

一种鱼类持续激活生长激素受体基因及制备方法和用途: 本发明公开了一种鱼类持续激活生长激素受体基因及制备方法和用途。通过对鲤鱼GHR信号肽、c-Jun亮氨酸拉链区以及GHR跨膜区和胞内区分别采取PCR扩增，结合又一轮的搭桥PCR扩增，获得持续激活的GHR重组基因片段；将获得...; 孙永华朱作言熊凤伊斯提亚克迈克沃特斯