潘丽洁
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：清华大学医学院更多>>
- 发文基金：清华-裕元医学科学研究基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Capsazepine抑制培养海马神经元网络线粒体转运(英文)
- 2009年
- capsazepine(CZP)是辣椒素的合成类似物,也是野香草型瞬时感受器电位通道1(TRPV1)的选择性抑制剂。TRPV1在体内有广泛的表达谱,使CZP有广泛的作用位点。除此之外,以往的研究结果表明CZP除了作用于TRPV1外还有更复杂的信号通路。本课题研究了CZP对体外培养的大鼠海马神经元网络内线粒体转运的作用并分析其可能机制。结果显示:20μmol/L的CZP可有效抑制原代培养海马神经元网络中的线粒体转运。CZP急性作用不引起胞内钙离子浓度的升高,也不引起细胞的调亡。胞外更换为无外钙记录液,或者将GSK3β抑制剂SB415286与CZP共孵育,均不影响CZP对线粒体转运的抑制作用。然而,将BAPTA-AM与CZP共孵育,抑制了CZP对线粒体转运的抑制作用。本研究结果表明,CZP直接通过胞内钙信号通路影响神经元的线粒体转运,与胞外钙流或转运蛋白的磷酸化无关。
- 付敏潘丽洁孙朝晖左焕琮谢佐平
- 关键词：CAPSAZEPINE胞内钙海马
- 人STIM1基因真核表达载体的构建及其在肝细胞中的表达被引量：1
- 2009年
- 目的:构建人STIM1基因真核表达载体,并观察其在人肝细胞株(HL-7702)中的表达.方法:提取HL-7702细胞总RNA,RT-PCR扩增,经纯化回收后将片段克隆至pGM-T载体,酶切琼脂糖凝胶电泳分析鉴定并测序,最后用重组质粒转染HL-7702细胞,通过PCR-电泳和Western blot法检测STIM1基因的表达.结果:PCR扩增的片段长度为342bp,测序结果以及重组质粒pGM-T-STIM1的酶切琼脂糖凝胶电泳鉴定结果均证明STIM1基因成功克隆到真核表达载体中.PCR-电泳和Western blot实验结果分别显示转染重组质粒后的HL-7702细胞在基因与蛋白水平表达STIM1均有所增强.结论:成功构建了人STIM1基因的真核表达载体pGM-T-STIM1,并在人肝细胞株HL-7702中稳定表达,为研究STIM1蛋白在人肝细胞内Ca2+浓度调控方面及其对人肝细胞分泌功能的影响奠定了良好的实验基础.
- 张振亚张宗明潘丽洁
- 关键词：真核表达载体基因表达
- 人TRPC1基因真核表达载体的构建及肝细胞表达被引量：2
- 2009年
- 目的构建人TRPCI基因真核表达载体，并观察其在人肝细胞株（HL-7702）中的表达。方法提取细胞总RNA，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）得到TRPCI基因的编码序列，经纯化回收后克隆入表达载体pGM．T中，酶切及琼脂糖凝胶电泳分析鉴定，最后转染HL-7702细胞，通过电泳和噻唑蓝（MTT）比色法检测基因表达与细胞生长。结果扩增片段长度为455bp，重组质粒pGM—T．TRPCI经酶切鉴定条带位置正确，证明表达载体成功构建。电泳结果显示转染重组质粒后的HL-7702细胞表达TRPCI增强。MTT检测发现转染前后肝细胞生长未受到明显影响（t值分别为0．43、-0．40、-2．01、-1．60、-0．41和-0．72，P值均〉0．05）。结论成功构建人TRPCI基因的真核表达载体pGM—T—TRPCI，并在人肝细胞株HL-7702中稳定表达。
- 张振亚张宗明潘丽洁税朝祥王尧尧
- 关键词：肝细胞真核表达载体基因表达
