沈行燕
- 作品数：10 被引量：49H指数：5
- 供职机构：浙江大学动物科学学院动物预防医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省重点科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸡传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株(ZJ971)株S2基因的克隆及序列分析被引量：5
- 2001年
- 采用特异性引物对鸡传染性支气管炎病毒 (IBV )嗜腺胃毒株 (ZJ971毒株 )进行 RT- PCR扩增 ,将扩增到的 S2基因 c DNA克隆入 p Bluescript SK质粒载体中 ,经鉴定后测序。结果显示 ,扩增的 ZJ971毒株 S2基因全长为 1872 nt,编码 1条由 5 30个氨基酸组成的多肽 ,与 Beaudette株、M41株、Ark99株比较 ,其核苷酸同源性分别为 97.34 %、97.72 %、96 .30 % ;3′端核苷酸相对于 5′端保守 ,在 5′端第 184～ 2 83位之间的核苷酸为高可变区。同时 ,IBV - ZJ971株S2基因第 16 2 1位的碱基由 G突变为 T,导致
- 沈行燕周继勇丁红梅吴建祥严庆丰
- 关键词：传染性支气管炎病毒S2基因基因克隆
- 传染性支气管炎病毒S基因的克隆及在原核细胞中的表达
- 鸡传染性支气管炎/(Infectious bronchitis，IB/)是由传染性支气管炎病毒/(Infectious Bronchitis Virus，IBV/)引起的一种急性高度接触性传染病，在世界范围内广泛流行，造...
- 沈行燕
- 关键词：传染性支气管炎病毒S基因克隆
- 文献传递
- 传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因克隆及在E.coli中的表达被引量：9
- 2002年
- 核衣壳蛋白基因 (N基因 )是传染性支气管炎病毒的重要结构基因 .根据已报道的序列设计引物 ,利用RT PCR技术从病毒RNA中扩增和克隆到了N基因的cDNA ,并测定了核苷酸序列 .克隆的N基因片段ORF全长 12 30bp ,编码 4 0 9个氨基酸 .将该片段序列与其他IBV病毒株比较 ,核苷酸的同一性为 87 0 %～ 98 6 %,氨基酸的同一性为 91 0 %～ 98 1%.将该cDNA亚克隆到pBV2 2 0表达载体 ,转化大肠杆菌DH5α菌株 ,Western印迹检测 ,获得了分子量约 4
- 周继勇丁红梅程丽琴沈行燕
- 关键词：禽病毒传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因克隆E.COLI
- 新的禽传染性支气管炎病毒变异毒株S基因克隆
- 从鸡腺胃肿大的病例中鉴定了一株新的禽传染性支气管炎病毒变异毒株(2J971株),对该毒株进行RT—PCR扩增,将得到的S基因cDNA克隆入pBS SK(+)质粒中。结果显示,传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株2J971株S基因...
- 周继勇沈行燕程丽琴丁红梅吴建祥
- 关键词：S基因克隆
- 禽传染性支气管炎病毒S1基因植物表达载体的构建被引量：4
- 2001年
- :以含传染性支气管炎病毒 ( ZJ971毒株 ) S1基因的质粒 PBS为模板 ,根据其序列设计引物进行PCR扩增 ,得到 1.7kb左右的 S1基因产物 ;用 Xbal I和 Bam HI酶切纯化 ,并在 T4 DNA连接酶的作用下 ,定向克隆到植物表达载体 PBI12 1中 ,PCR及酶切鉴定表明 。
- 吴建祥周继勇程丽琴沈行燕丁红梅
- 关键词：禽传染性支气管炎病毒S1基因植物表达载体定向克隆
- 鸡传染性支气管炎病毒H52毒株S基因的克隆及序列分析
- 2002年
- 将含有鸡传染性支气管炎病毒 (IBV) H5 2毒株的尿囊液浓缩 ,用 TRIzol试剂抽提病毒 RNA作为反转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)的模板 ,参照已发表的 IBV- Beaudette株 S基因序列 ,设计并合成一对特异性引物 ,扩增得到长度约 3.6 kb的 S基因片段 ,利用引物设计中 Eco R I和 Bam H I酶切位点插入到克隆载体 p Blue Script SK的多克隆位点中 ,转化感受态 E.coli DH5 α。经酶切分析和 PCR等方法鉴定 ,筛选出阳性克隆 ,进行核苷酸序列测定 ,证实获得了 S基因的全长序列。利用 DNAstar等分析软件与 Gen Bank中其它 IBV毒株的核苷酸及其推导的氨基酸进行序列同源性比较分析 ,结果表明 ,H5 2毒株与已报道的核苷酸的同源性在 83.4 5 %～ 99.71%之间 ,氨基酸的同源性在 82 .10 %～ 99.2 6 %之间。
- 程丽琴周继勇沈行燕陈吉刚陈声明
- 关键词：S基因克隆
- 鸡传染性支气管炎病毒腺胃分离株的分子鉴定被引量：5
- 2003年
- 从发病鸡场中收集的腺胃肿大病料(编号为2/97、3/97和1/98),经匀浆和无菌处理后在SPF鸡胚中传代、分离和鉴定。结果显示,接种病料培养的鸡胚可干扰新城疫病毒的复制;这些分离毒株可与阳性标准参考株IBV抗血清反应,但表现出较低的中和反应能力。在理化和血凝特性等鉴定的基础上,参照已发表的IBV Beaudette毒株S1基因序列,设计并合成1对含有EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的特异性引物,利用RT-PCR技术扩增到分离毒株3/97、2/97、1/98长度为1.93kb的cDNA片段,并将其cDNA片段插入到克隆载体pBlueScript-SK(+)中,进行核苷酸序列的测定,确证所扩增和克隆的cDNA片段由1930个碱基组成,并编码1条由620个氨基酸组成的多肽。与GenBank中其它IBV S1基因序列进行比较,发现3/97、2/97和1/98毒株与所比较的IBV毒株核苷酸的一致性为73.6％～99.7％,氨基酸的一致性为78.4％～99.7％。
- 程丽琴周继勇JohnDikki沈行燕陈吉刚张德勇
- 关键词：传染性支气管炎分离株分子鉴定克隆
- 禽传染性支气管炎病毒嗜肾毒株(X株)核衣壳基因的克隆和序列分析被引量：7
- 2002年
- 根据已发表的禽传染性支气管炎病毒 (IBV) Beaudette株核衣壳基因序列 ,设计了 1对特异性引物 ,采用 RT-PCR方法 ,克隆了禽传染性支气管炎病毒嗜肾毒株 (X株 )的核衣壳基因 ,并测定了其序列。 X株 IBV与来自 Gen Bank的其他 10株 IBV相比 ,共存在 136个点突变 ,其中有 15处是连续突变区域 ,这些点突变总体呈散在分布。X株与其他毒株的核衣壳蛋白同源性在 90 .2 %～ 99.0 %之间 ,X株 IBV与同为肾型的 N株同源性最高。
- 张德勇周继勇陈吉刚丁红梅沈行燕
- 关键词：禽传染性支气管炎病毒基因克隆
