丁红梅
- 作品数：13 被引量：57H指数：5
- 供职机构：浙江大学动物科学学院动物预防医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省重点科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因变异及在大场杆菌中的表达(英文)被引量：3
- 2003年
- 核衣壳蛋白 (N)是传染性支气管炎病毒的主要结构蛋白之一。以前的研究结果显示 IBV- ZJ971毒株以引起腺胃肿大为特征 ,IBV- X和 N毒株以引起肾炎为特征。为了探讨不同组织嗜性传染性支气管炎病毒 N基因的变异 ,我们依据已发表的 IBV- Beaudette毒株 N基因的序列设计和合成引物 ,RT-PCR扩增 IBV- ZJ971、N、X和 H5 2的核衣壳蛋白基因 ,并测序、分析和在 E.coli中进行表达。结果显示 :IBV- ZJ971、N、X和 H5 2毒株的 N基因的 ORF由 12 30 bp组成 ,编码 4 0 9个氨基酸。与来源于 Gen Bank中的 IBV毒株比较 ,IBV- ZJ971、N、X和 H5 2与其它 IBV毒株的核苷酸同源性分别是 87.0 - 98.6 %、86 .6 - 99.7%、86 .3- 99.7%、87.2 % - 98.5 % ,氨基酸的同源性分别是 90 .0 - 97.8%、 90 .5 - 98.8%、 90 .0 -98.8%、 91- 98%。IBV- ZJ971毒株的 N蛋白不同于其他 IBV的独特变异是 111,117,14 2 ,171和 4 0 1位点上的氨基酸改变 ,IBV- N和 X毒株的 N蛋白不同与其它 IBV的独特变异是 4 6 ,4 8,189,190 ,2 2 0 ,2 2 3,2 36 ,2 37,2 4 0 ,2 86 ,2 99,30 1334,335 ,336 and35 1位点上的氨基酸改变。说明 IBV嗜腺胃毒株(ZJ971)和嗜肾毒株 (N和 X)的 N基因以散在的点突变为特征。将 IBV- ZJ971毒株的 N基因在 E.
- 周继勇丁红梅程丽琴Jimmy Kwang
- 关键词：传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因变异大肠杆菌
- 不同组织嗜性传染性支气管炎病毒核衣壳基因的遗传变异性分析被引量：9
- 2003年
- 根据GenBank发表的传染性支气管炎病毒 (infectiousbronchitisvirus,IBV)Beaudette毒株核衣壳 (nucleocap sid ,N)基因序列设计一对特异性引物 ,利用RT -PCR方法分别扩增了疫苗毒株IBV -H5 2、嗜腺胃ZJ971株、嗜肾IBV -X和N株的N基因ORF ,并克隆到质粒载体 pBluescriptSK( +) ,测序后用PCgene和DNAStar软件分析。结果显示 :4株IBV的N基因均含有一个长 12 30bp的ORF ,编码一由 40 9个氨基酸残基组成的N蛋白。嗜肾IBV -X和N毒株的N基因存在HindⅢ酶切位点。与来自GenBank的另外 8株IBV比较 ,ZJ971株与它们的N蛋白的核苷酸及氨基酸序列同源性分别在 88 2 %～ 98 6 %和 91 2 %～ 97 8% ;N株则分别为 86 6 %～ 87 4%和90 5 %～ 91 5 % ;X株分别为 86 3%～ 87 4%和 90 0 %～ 91 5 % ;H5 2分别为 90 4%～ 98 3 %和 92 0 %～98 0 %。ZJ971株、N和X株的N基因的突变特点是散在的点突变。嗜腺胃ZJ971株核衣壳蛋白的氨基酸序列的最显著的遗传变异特征是H111D、S117A、V14 2 L、P171A和E4 0 1D ;嗜肾IBV -X和N株核衣壳蛋白的氨基酸序列的最显著的遗传变异特征是A4 6S、A4 8P、L189R、N190 S、E2 2 0 D、I2 2 3A、V2 3 6Y、S2 37K、K2 4 0 Q、Q2 86R、T2 99K、R30 1E、E33 4 D、V33 5E、V336P和T351S。
- 周继勇张德勇丁红梅程丽琴陈吉刚
- 关键词：传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因克隆
- 传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因克隆及在E.coli中的表达被引量：9
- 2002年
- 核衣壳蛋白基因 (N基因 )是传染性支气管炎病毒的重要结构基因 .根据已报道的序列设计引物 ,利用RT PCR技术从病毒RNA中扩增和克隆到了N基因的cDNA ,并测定了核苷酸序列 .克隆的N基因片段ORF全长 12 30bp ,编码 4 0 9个氨基酸 .将该片段序列与其他IBV病毒株比较 ,核苷酸的同一性为 87 0 %～ 98 6 %,氨基酸的同一性为 91 0 %～ 98 1%.将该cDNA亚克隆到pBV2 2 0表达载体 ,转化大肠杆菌DH5α菌株 ,Western印迹检测 ,获得了分子量约 4
- 周继勇丁红梅程丽琴沈行燕
- 关键词：禽病毒传染性支气管炎病毒核衣壳蛋白基因克隆E.COLI
- 鸡传染性支气管炎病毒N基因及其编码产物的分子生物学被引量：3
- 2001年
- 丁红梅周继勇等
- 关键词：传染性支气管炎病毒N基因PCRN蛋白
- 鸡传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株(ZJ971)株S2基因的克隆及序列分析被引量：5
- 2001年
- 采用特异性引物对鸡传染性支气管炎病毒 (IBV )嗜腺胃毒株 (ZJ971毒株 )进行 RT- PCR扩增 ,将扩增到的 S2基因 c DNA克隆入 p Bluescript SK质粒载体中 ,经鉴定后测序。结果显示 ,扩增的 ZJ971毒株 S2基因全长为 1872 nt,编码 1条由 5 30个氨基酸组成的多肽 ,与 Beaudette株、M41株、Ark99株比较 ,其核苷酸同源性分别为 97.34 %、97.72 %、96 .30 % ;3′端核苷酸相对于 5′端保守 ,在 5′端第 184～ 2 83位之间的核苷酸为高可变区。同时 ,IBV - ZJ971株S2基因第 16 2 1位的碱基由 G突变为 T,导致
- 沈行燕周继勇丁红梅吴建祥严庆丰
- 关键词：传染性支气管炎病毒S2基因基因克隆
- 新的禽传染性支气管炎病毒变异毒株S基因克隆
- 从鸡腺胃肿大的病例中鉴定了一株新的禽传染性支气管炎病毒变异毒株(2J971株),对该毒株进行RT—PCR扩增,将得到的S基因cDNA克隆入pBS SK(+)质粒中。结果显示,传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株2J971株S基因...
- 周继勇沈行燕程丽琴丁红梅吴建祥
- 关键词：S基因克隆
- 禽传染性支气管炎病毒S1基因植物表达载体的构建被引量：4
- 2001年
- :以含传染性支气管炎病毒 ( ZJ971毒株 ) S1基因的质粒 PBS为模板 ,根据其序列设计引物进行PCR扩增 ,得到 1.7kb左右的 S1基因产物 ;用 Xbal I和 Bam HI酶切纯化 ,并在 T4 DNA连接酶的作用下 ,定向克隆到植物表达载体 PBI12 1中 ,PCR及酶切鉴定表明 。
- 吴建祥周继勇程丽琴沈行燕丁红梅
- 关键词：禽传染性支气管炎病毒S1基因植物表达载体定向克隆
- 新技术防治传染性法氏囊病的研究进展和思考被引量：5
- 2001年
- 于涟黄耀伟丁红梅
- 关键词：传染性法氏囊病病毒分子生物学新型疫苗禽病
- 禽传染性支气管炎病毒新的变异株核衣壳基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
- 该文研究用Trizol试剂直接从尿囊液中抽提病毒核酸,参考已报道的IBV-Beaudette核衣壳基因,自行设计一对引物,以IBV-N毒株(肾型)、ZJ971毒株(腺胃型)和一个参考疫苗毒株H52为模板,用RT-PCR扩...
- 丁红梅
- 关键词：核衣壳蛋白鸡传染性支气管炎病毒
- 文献传递
- 禽传染性支气管炎病毒嗜肾毒株(X株)核衣壳基因的克隆和序列分析被引量：7
- 2002年
- 根据已发表的禽传染性支气管炎病毒 (IBV) Beaudette株核衣壳基因序列 ,设计了 1对特异性引物 ,采用 RT-PCR方法 ,克隆了禽传染性支气管炎病毒嗜肾毒株 (X株 )的核衣壳基因 ,并测定了其序列。 X株 IBV与来自 Gen Bank的其他 10株 IBV相比 ,共存在 136个点突变 ,其中有 15处是连续突变区域 ,这些点突变总体呈散在分布。X株与其他毒株的核衣壳蛋白同源性在 90 .2 %～ 99.0 %之间 ,X株 IBV与同为肾型的 N株同源性最高。
- 张德勇周继勇陈吉刚丁红梅沈行燕
- 关键词：禽传染性支气管炎病毒基因克隆
