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极端嗜热酸性α-淀粉酶PFA在枯草芽孢杆菌中的高效分泌表达被引量：5: 2018年; 为探索极端嗜热酸性α-淀粉酶PFA在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WB600)中的高效分泌表达条件,对来源于枯草芽孢杆菌的9种Sec分泌途径信号肽进行筛选,结果显示信号肽Yfk N的引导分泌效率最高。在此基础上,为进一步优化PFA的分泌表达,对信号肽Yfk N的Ile3和Gln4进行饱和突变,并比较不同突变体的引导分泌效率。结果表明突变体I3G/Q4R的引导分泌效率最高,重组枯草芽孢杆菌的胞外α-淀粉酶活力高达715 U/m L。重组α-淀粉酶PFA的最适反应p H值为5.0,最适反应温度为100℃,于100℃的半衰期长达13 h,并且不依赖于Ca^(2+)。结果表明,采用信号肽I3G/Q4R,极端嗜热酸性α-淀粉酶PFA能够在枯草芽孢杆菌中高效分泌表达,这有利于其在淀粉液化工艺中的应用。; 袁林曾静郭建军郭浩杨罡陈俊; 关键词：枯草芽孢杆菌信号肽分泌表达

一种快速分离筛选纤维素分解真菌的方法: 本发明公开了一种快速分离筛选纤维素分解真菌的方法，包括如下步骤：A、选择性富集培养与初筛；B、多孔细胞培养板复筛；C、平板培养复筛；D、菌种保存。本发明采用纤维素内切酶检测底物作为筛选指示剂和筛选培养基的唯一碳源，并通过...; 袁林傅筱冲郭建军曾静邱小忠杨罡; 文献传递

一种高产无色素普鲁兰多糖的茁芽短梗霉及其培养和制备普鲁兰多糖的方法: 本发明公开了一种高产无色素普鲁兰多糖的茁芽短梗霉，保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏号为CCTCC M 2013611。本发明还公开了一种高产无色素普鲁兰多糖的茁芽短梗霉的诱变筛选方法及其培养方法以及一种高...; 曾静郭建军袁林邱小忠杨罡; 文献传递

一种粘质沙雷氏菌及其分离方法和应用: 本发明公开了一种粘质沙雷氏菌及其分离方法和应用。本发明的一种粘质沙雷氏菌菌株，该菌株为粘质沙雷氏菌；保藏名称为粘质沙雷氏菌LS‑1；保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山武汉...; 靳亮关丽梅占智高王金昌邱小忠杨罡

樟巢螟致病菌的分离鉴定及其杀虫活性测定被引量：1: 2018年; 从樟巢螟自然死亡的虫尸体内分离得到1株具有较高毒力的致病菌LS-1,对其生防潜能进行评估。经过形态学特征、16S r DNA序列分析,确定该菌株LS-1为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens);以浓度为3.38×10~8cfu/m L的该菌对樟巢螟幼虫进行室内生物测定:感染第3天和第5天,樟巢螟的死亡率分别为50%和71.67%,校正死亡率分别为47.36%和69.1%;以浓度为3.38×10~8cfu/m L、3.38×10~7cfu/m L、3.38×10~6cfu/m L、3.38×10~5cfu/m L 4个浓度梯度对二化螟幼虫进行室内生物测定,感染第4天,水稻二化螟幼虫的死亡率分别为90.67%、86.67%、84%、82.67%,校正死亡率分别为87.51%、82.17%、78.57%、76.79%。结果说明该菌株对控制螟蛾类害虫具有较好的效果,研究为下一步开发螟蛾类绿色生物杀虫剂提供了研究基础。; 关丽梅占智高王金昌杨罡王洪秀朱海栋金玉川张婷靳亮; 关键词：樟巢螟致病菌粘质沙雷氏菌水稻二化螟

极端嗜热α-淀粉酶ApkA的高温活性和热稳定性的优化研究被引量：3: 2017年; 旨在获得高温活性和热稳定性提高的α-淀粉酶。通过向α-淀粉酶Apk A中引入目前已知的最稳定的α-淀粉酶PFA的Zn^(2+)结合位点,获得Zn^(2+)结合位点突变体ApkAds K152H/A166C。酶学性质分析表明,ApkAds K152H/A166C的高温活性和热稳定性明显提高,最适反应温度由90℃提高至100℃,对应的酶比活力为5 201.08 U/mg。ApkAds K152H/A166C于90℃的半衰期由5 h延长至10 h,于100℃的半衰期由7.5 min延长至80 min。重组α-淀粉酶中Zn^(2+)含量测定结果显示ApkAds K152H/A166C结合了一个Zn^(2+)。结果表明,向ApkA中引入Zn^(2+)结合位点有利于提高其高温活性和热稳定性。; 曾静郭建军袁林杨罡陈俊; 关键词：定点突变热稳定性

16S rRNA基因的PCR-DGGE技术分析茶尺蠖幼虫肠道细菌种群结构及多样性被引量：11: 2013年; 利用16S rRNA的PCR-DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术分析研究了茶尺蠖肠道内细菌的种类与多样性。通过对16S rRNA序列分析,从茶尺蠖野外种群肠道中鉴定了11种细菌,这些细菌分属于沃尔巴克氏菌(Wolbachia)、肠杆菌属(Enterobacter)、沙雷氏菌属(Serratia)、梭菌属(Clostridium)、肠球菌属(Enterococcus)、暂定类群EO1;其中以肠杆菌、沃尔巴克氏菌、沙雷氏菌属最为常见。另外,也鉴定了一种茶树叶绿体上的16S rRNA基因。茶尺蠖幼虫体内的共生菌多样性分析结果,将会为害虫综合治理提供一条全新的探索途径。; 靳亮王金昌王洪秀张贱根杨罡靳海燕; 关键词：茶尺蠖肠道细菌 RRNA序列变性梯度凝胶电泳多样性

大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在干酪乳杆菌中的分泌表达被引量：3: 2013年; 以大肠杆菌和乳酸菌穿梭表达型载体pMG36e为基本模型,采用重叠延伸PCR方法拼接相关调控元件构建一种乳酸杆菌组成型分泌表达载体;将编码LTB蛋白的eltb基因片段插入干酪乳杆菌分泌型表达载体中,构建重组质粒pMG36e-UP/L-LTB,电转化于干酪乳杆菌393中,筛选获得重组干酪乳杆菌,应用western blot方法鉴定LTB表达情况。Western-blot分析显示,约有12 KDa的目的蛋白以分泌形式表达,可被LTB阳性血清识别。表明LTB蛋白在重组干酪乳杆菌获得了表达,并且具有免疫反应活性和佐剂活性,为以LTB为分子佐剂研制乳酸菌黏膜疫苗奠定基础。; 付锦楠杨罡何顺华龚小华郭建军; 关键词：干酪乳杆菌分泌表达

马尾松毛虫质型多角体病毒结构蛋白的抗体制备及免疫性: 2014年; 质型多角体病毒的病毒粒子结构蛋白是由衣壳蛋白VP1(Capsid protein,CP)、塔状蛋白VP3(Turret protein,TP)和大突起蛋白VP5(Large protrusion protein,LPP)组成,这3个蛋白分别由病毒基因组片段S1、S4和S7编码.为了解质型多角体病毒结构蛋白的免疫定位情况,本研究从马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株中提取病毒核酸,回收、纯化S1、S4和S7片段,经RT-PCR扩增得到对应片段的ORF全长或抗原区的片段,克隆于原核表达载体上,在大肠杆菌BL21菌株中进行了表达,免疫家兔制备了多克隆抗体.Western blot结果显示DpCPV基因组的S1、S4和S7片段分别编码其结构蛋白VP1、VP3和VP5,与推测的结果一致.免疫胶体金的方法也证明S1、S4和S7编码的蛋白定位于病毒粒子衣壳的外表面.本研究首次通过免疫学方法确定了质型多角体病毒结构蛋白在病毒粒子上的定位,为质型多角体病毒的结构蛋白功能和侵染机制研究提供了免疫学方面的基础,对质型多角体病毒的研究有较重要的意义.; 靳亮王洪秀刘金瑾王金昌张莉莉杨罡张小华郑国华; 关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒结构蛋白免疫定位

微生物基因工程与农业产业化发展探究被引量：1: 2020年; 微生物可以用于提高农业生产效益,基于此,介绍和探讨饲料用植酸酶、固氮微生物肥料以及微生物农药的研究与开发,如微生物农药中细菌杀虫剂、真菌杀虫剂、病毒杀虫剂和杀虫抗生素等的最新研究进展。同时,建议加强微生物基因工程的基础研究,明确确定研究重点,为后续革新生产工艺,调整研发结构,促进产业发展奠定基础。; 邱小忠杨罡陈俊黄国昌龚小华连晨姿; 关键词：微生物基因工程农业产业化

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杨罡

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