杨璧铖
- 作品数:14 被引量:27H指数:2
- 供职机构:北京大学第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金江苏省卫生厅医学科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 淫羊藿次苷Ⅱ通过miR-155/eNOS改善人阴茎海绵体血管内皮细胞功能的研究被引量:7
- 2016年
- 目的探讨淫羊藿次苷Ⅱ(ICAⅡ)通过mi R-155/内皮型一氧化氮合酶(e NOS)通路改善糖尿病性人阴茎海绵体血管内皮细胞(HCECs)功能障碍的作用机制。方法经原代分离培养HCECs,随机分为三组:正常+BSA对照组(NC组),Age-BSA联合高糖糖尿病组(DM组),ICAⅡ治疗组(DM+ICAⅡ组,ICAⅡ0.1、1、10μmol/L)。Western blot检测e NOS、晚期糖基化终产物受体(RAGE)蛋白的表达;实时定量PCR检测e NOS及其潜在上游mi RNAs(mi R-155、mi R-543、mi R-31、mi R-429、mi R-200c、mi R-200b)的表达;DAF-FM DA荧光探针法和硝酸盐/亚硝酸盐还原法检测细胞一氧化氮含量;进一步mi R-155过表达慢病毒感染,观察ICAⅡ对HCECs中mi R-155、e NOS和一氧化氮表达的影响。结果 Age-BSA联合高糖刺激下,HCECs中e NOS和RAGE蛋白表达水平分别显著下调和上调;而不同浓度的ICAⅡ可逆转e NOS和RAGE蛋白的表达(P<0.05);且随着ICAⅡ浓度的提高其作用逐渐增强。当HCECs发生糖尿病性功能障碍时,可调控e NOS表达的潜在上游mi RNAs中mi R-155的表达变化最为明显(P<0.05)。且在ICAⅡ干预下,发现糖尿病性功能障碍HCECs中e NOS和一氧化氮的表达恢复上调与mi R-155表达受到抑制有关。进一步利用mi R-155过表达慢病毒感染HCECs后,发现mi R-155表达显著升高,而ICAⅡ可明显抑制其表达(P<0.05);相应地,HCECs过表达mi R-155后,观察到其下游e NOS及一氧化氮表达明显降低,而ICAⅡ干预可显著恢复其表达(P<0.05)。结论 mi R-155/e NOS通路可能在糖尿病性HCECs功能障碍的发生中发挥重要作用,而ICAⅡ可能通过调控mi R-155/e NOS信号通路而发挥改善糖尿病性内皮细胞功能的作用。
- 关瑞礼雷洪恩杨璧铖李辉喜王林郭应禄辛钟成
- 关键词:勃起功能障碍MIR-155一氧化氮合酶内皮细胞功能障碍
- miR-155、miR-15a和miR-181c在糖尿病环境下对人阴茎海绵体血管内皮细胞功能的影响
- 2015年
- 目的:晚期糖基化终产物AGEs联合高糖(AGE-BSA+高糖)刺激人阴茎海绵体血管内皮细胞(HCECs)诱导糖尿病环境,观察其对内皮功能相关的miR-155、miR-15a和miR-181c及其靶基因的表达变化影响。方法利用人阴茎海绵体分离鉴定的HCECs,随机分为两组:正常+BSA组(NC组)、AGE-BSA+高糖(DM组)。采用蛋白印迹实验检测RAGE蛋白表达确定诱导体外糖尿病环境;采用实时定量PCR来检测miR-155、miR-15a和miR-181c及对应靶基因eNOS、TXNIP、VEGFA、IRS1和KLF6的mRNA表达变化;采用蛋白印迹实验验证靶基因的蛋白表达变化。结果与NC组相比,DM组在AGE-BSA+高糖刺激下,RAGE基因的mRNA水平和蛋白水平均明显升高;同时观察到miR-155表达明显升高而miR-15a和miR-181c的表达明显降低。miR-155对应的靶基因eNOS的mRNA水平和蛋白水平明显降低;miR-15a对应的靶基因TXNIP的mRNA水平和蛋白水平明显升高,靶基因IRS1的mRNA水平明显升高但蛋白水平变化不明显,靶基因VEGFA的mRNA水平没有显著变化;miR-181c对应的靶基因KLF6的mRNA水平和蛋白表达水平明显升高,而靶基因IRS1的mRNA水平明显升高但蛋白水平变化不明显。结论 HCECs在AGE-BSA+高糖刺激的糖尿病环境下,miR-155、miR-15a和miR-181c均有显著的表达差异,并负调控它们对应的靶基因eNOS、TXNIP及KLF6发生不同程度的表达变化。结果提示糖尿病环境下的HCECs中多种miRNAs可能参与了糖尿病内皮功能障碍的发生发展过程,其具体的机制有待进一步深入研究。
- 关瑞礼雷洪恩许永德杨璧铖李辉喜王林辛钟成
- 关键词:微RNAS糖基化终产物糖尿病勃起功能障碍
- 褪黑素对糖尿病性勃起功能障碍大鼠的神经保护作用及可能的机制研究被引量:2
- 2016年
- 目的探讨褪黑素(melatonin,MT)对糖尿病性勃起功能障碍大鼠的神经保护作用及可能机制。方法 28只SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,8周后,糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠随机分为DM组和MT组,分别每天腹腔注射磷酸盐缓冲液(PBS)和MT。另外12只正常大鼠为N组,每天腹腔注射PBS。治疗4周后,检测各组大鼠阴茎海绵体内压、平均动脉压、阴茎背神经(dorsal penile nerve,DPN)和盆神经节(major pelvic ganglion,MPG)病变情况。对阴茎海绵体纤维化情况、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、p38和p-p38水平也进行了测定。结果 DM组糖尿病大鼠勃起功能明显下降,DPN和MPG发生了明显的神经退行性病变,同时阴茎海绵体内胶原蛋白沉积增多,氧化应激和p-p38蛋白水平升高。褪黑素治疗显著提高了糖尿病大鼠的勃起功能,改善DPN和MPG神经病变,减少胶原纤维沉积并且降低了氧化应激与p-p38蛋白水平。结论 MT治疗可以有效提高糖尿病大鼠的勃起功能,改善阴茎背神经、盆神经节病变,减轻阴茎纤维化情况。其机制可能是通过降低糖尿病大鼠阴茎内氧化应激水平以及抑制p38MAPK信号通路。
- 惠宇周峰雷洪恩杨璧铖辛钟成侯建全
- 关键词:勃起功能障碍糖尿病褪黑素神经保护作用抗氧化P-P38
- MPCNL治疗简单和复杂肾结石的回顾性比较研究被引量:1
- 2013年
- 目的:比较研究经皮肾镜取石术(MPCNL)治疗简单和复杂肾结石的安全性和有效性.方法:回顾分析MPCNL治疗5 761例(41.2%)简单肾结石和8 223例(58.8%)复杂肾结石的临床资料,对其安全性及有效性进行比较研究.结果:复杂性结石患者结石较大(1 763.0 ∶1 018.6 mm2,P<0.05).简单肾结石患者手术时间较短(72.4~28.4∶90.4~41.9 min,P<0.001),更少使用多通道取石(1.9%∶20.7%,P<0.001),血红蛋白下降较少(12.3±10.7∶14.4±11.6)g/L,(P<0.001).在患者接受的首次取石术中,简单肾结石获得更高的结石清除率(77.6%∶66.4%,P<0.05).但患者在接受二期手术治疗后简单肾结石和复杂肾结石患者的结石清除率差异无统计学意义(81.3%∶80.1%,P>0.05).两组的并发症发生率(25.17%∶26.32%,P>0.05)和输血率(2.2%∶3.2%,P>0.05)差异无统计学意义.但在复杂肾结石中,肾血管栓塞较简单肾结石多(0.28%∶0.67%,P<0.05).结论:MPCNL是治疗复杂肾结石安全有效的术式,两组结石清除率无差异,但复杂结石组手术时间长,所需通道多,且出血栓塞更多.
- 杨璧铖赵志健钟文麦赞林吴文起袁坚曾国华
- 关键词:微创经皮肾镜肾结石
- 过表达人SLC2A9基因的慢病毒载体对HK-2细胞尿酸转运功能的影响
- 2014年
- 目的构建含人SLC2A9基因的过表达慢病毒载体,探讨其对人肾脏近曲小管上皮细胞株HK-2尿酸转运功能的影响。方法 PCR反应扩增目的基因后连入慢病毒表达载体中构建重组载体pLEX-SLC2A9,使用PCR及测序的方法对其进行鉴定,并与辅助包装质粒共感染293T细胞。慢病毒颗粒感染HK-2细胞后,用PCR和Western blot检测SLC2A9基因的过表达效率,并检测SLC2A9过表达对其尿酸转运功能的影响。结果 PCR及测序结果表明重组慢病毒载体pLEX-SLC2A9的插入序列完全正确,重组慢病毒载体感染HK-2细胞后,细胞内的mRNA及蛋白水平增高,并且可以增强HK-2细胞对尿酸的转运。结论过表达SLC2A9基因后能显著增强HK-2细胞对尿酸的转运。
- 吴文正段小鹿杨璧铖李舒珏梁叶萍欧莉莉曾国华
- 关键词:慢病毒过表达尿酸结石HK-2细胞
- miR-155、miR-15a和miR-181c在糖尿病环境下对人阴茎海绵体血管内皮细胞功能障碍的影响
- 关瑞礼雷洪恩许永德杨璧铖李辉喜王林辛钟成
- 靶向TRPV5启动子区域的小激活RNA对HK2细胞钙离子转运的作用研究
- 杨璧铖段小鹿吴文正纪卫东吴文起李舒珏李佳胜曾国华
- saRNA介导的TRPV5表达对HK2细胞钙离子转运的作用研究
- 泌尿系结石的高复发率凸显了预防其复发在避免患者反复接受手术治疗中的重要意义。而高钙尿是泌尿系统含钙结石发生的重要危险因素。高选择性钙离子通道TRPV5主要分布于肾远端小管上皮细胞顶膜侧,其介导的钙离子由顶膜侧向细胞内的转...
- 杨璧铖
- 关键词:TRPV5钙转运
- 文献传递
- 裸鼠肾被膜下阴茎海绵体组织和盆神经节移植的可行性
- 2016年
- 目的:基于组织异体移植技术,研究将正常SD(Sprague-Dawley)大鼠阴茎海绵体组织和盆神经节移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下的可行性。方法:无菌条件下获取SD大鼠阴茎组织和盆神经节,在手术显微镜下将上述组织移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下,分别于移植后1周和4周检测移植物的组织病理学变化及移植物内部细胞增殖情况。结果:移植1周后,移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下的阴茎海绵体组织与正常阴茎海绵体组织形态一致,在阴茎海绵体窦内充满血液;移植4周后,靠近肾的阴茎海绵体组织接近正常组织形态,而远离肾的阴茎海绵体组织表现为纤维化,仍可在阴茎海绵体窦观察到血液。盆神经节移植后1周,移植物内部组织结构与正常盆神经节相近,可见多个"细胞团"样结构存在,在靠近肾的部位有新生血管样结构形成;移植后4周,在远离肾的盆神经节组织内观察到血管存在,"细胞团"样结构仍较明显。此外,移植后4周,移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下的海绵体组织和盆神经节中可见ki67阳性的细胞存在,提示移植物内部分细胞仍存在增殖活性。结论:将正常SD大鼠阴茎海绵体组织和盆神经节移植到裸鼠肾被膜下后,至少可以存活4周,移植物内部组织结构与正常SD大鼠阴茎海绵体和盆神经节组织结构基本一致,可能与肾被膜下提供了移植物所需的局部微环境及移植物内部逐渐形成血液循环有关。
- 许永德关瑞礼吴元翼雷洪恩杨璧铖李辉喜王林郭应禄辛钟成
- 关键词:阴茎海绵体盆神经节
- TRPV5与钙调节及其影响因素研究进展
- 2013年
- TRPV5(transientreceptorp。tentialcati。nchannel,subfamilyV,member5)作为瞬时性受体电位通道(TRP)vanilloid受体亚类成员之一,是介导远曲小管和集合管对钙主动重吸收的主要蛋白。钙离子、PH和激素等因素参与其表达水平或活性的调控。鉴于TRPV5在调节尿钙水平中的重要作用,我们对TRPV5与钙调节及其影响因素的相关研究作一综述。
- 杨璧铖曾国华
- 关键词:钙