许永德 作品数:15 被引量:48 H指数:3 供职机构: 中国人民解放军总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 军队临床高新技术重大项目 北京市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 一般工业技术 自动化与计算机技术 电气工程 更多>>
CKJ-Ⅱ(QLX-Ⅱ)型高场强旋磁治疗仪对前列腺癌细胞(PC-3)及前列腺增生细胞(BPH-1)的作用效果及机制 目的:应用北京旋磁医疗设备有限公司CKJ-Ⅱ(QLX-Ⅱ)型高场强旋磁治疗仪,通过细胞增殖、流式细胞术试验及蛋白印迹试验等分子生物学手段,评估旋磁治疗仪在防治前列腺癌及前列腺增生的潜在效果及作用机制.方法:分别培养前列腺... 雷洪恩 许永德 关瑞礼 高喆珠 辛钟成miR-155、miR-15a和miR-181c在糖尿病环境下对人阴茎海绵体血管内皮细胞功能的影响 2015年 目的:晚期糖基化终产物AGEs联合高糖(AGE-BSA+高糖)刺激人阴茎海绵体血管内皮细胞(HCECs)诱导糖尿病环境,观察其对内皮功能相关的miR-155、miR-15a和miR-181c及其靶基因的表达变化影响。方法利用人阴茎海绵体分离鉴定的HCECs,随机分为两组:正常+BSA组(NC组)、AGE-BSA+高糖(DM组)。采用蛋白印迹实验检测RAGE蛋白表达确定诱导体外糖尿病环境;采用实时定量PCR来检测miR-155、miR-15a和miR-181c及对应靶基因eNOS、TXNIP、VEGFA、IRS1和KLF6的mRNA表达变化;采用蛋白印迹实验验证靶基因的蛋白表达变化。结果与NC组相比,DM组在AGE-BSA+高糖刺激下,RAGE基因的mRNA水平和蛋白水平均明显升高;同时观察到miR-155表达明显升高而miR-15a和miR-181c的表达明显降低。miR-155对应的靶基因eNOS的mRNA水平和蛋白水平明显降低;miR-15a对应的靶基因TXNIP的mRNA水平和蛋白水平明显升高,靶基因IRS1的mRNA水平明显升高但蛋白水平变化不明显,靶基因VEGFA的mRNA水平没有显著变化;miR-181c对应的靶基因KLF6的mRNA水平和蛋白表达水平明显升高,而靶基因IRS1的mRNA水平明显升高但蛋白水平变化不明显。结论 HCECs在AGE-BSA+高糖刺激的糖尿病环境下,miR-155、miR-15a和miR-181c均有显著的表达差异,并负调控它们对应的靶基因eNOS、TXNIP及KLF6发生不同程度的表达变化。结果提示糖尿病环境下的HCECs中多种miRNAs可能参与了糖尿病内皮功能障碍的发生发展过程,其具体的机制有待进一步深入研究。 关瑞礼 雷洪恩 许永德 杨璧铖 李辉喜 王林 辛钟成关键词:微RNAS 糖基化终产物 糖尿病 勃起功能障碍 第14届亚太地区性医学学会(APSSM2013)在日本金沢隆重召开 2013年 2013年5月31日至6月2日,第14届亚太地区性医学学会在日本金浞隆重召开。 许永德 宋卫东关键词:本金 输尿管种子细胞分离及组织工程输尿管网状支架构建 被引量:2 2012年 目的探讨输尿管上皮种子细胞的分离培养和增殖规律,以及构建种植种子细胞输尿管组织工程网状支架的可行性。方法采用自制输尿管翻转分离器,分离实验用小型猪输尿管上皮种子细胞。体外培养并鉴定输尿管上皮种子细胞。观察输尿管种子细胞形态变化,噻唑蓝(MTT)比色法检测原代、第3代、第5代和第7代种子细胞增殖特性。后将输尿管种子细胞种植到电纺丝输尿管网状支架,于支架孵育第1、3、5、7、9天检测种子细胞增殖活性,并绘制细胞生长曲线。结果成功分离培养输尿管上皮种子细胞,角蛋白抗体和尿路上皮特异抗体UroplakinⅡ证实为输尿管尿路上皮细胞。输尿管上皮种子细胞接种24h基本贴壁,呈多角形团簇样生长,8d时细胞融合70%以上,呈铺路石状排列。输尿管上皮种子细胞在电纺丝输尿管网状支架上生长增殖良好。结论改良输尿管上皮细胞分离方法可获得大量纯化的输尿管上皮种子细胞,其在输尿管网状支架上生长增殖良好,成功构建输尿管组织工程网状支架有望应用于输尿管损伤替代修复。 许永德 符伟军 谭海颂 史建国 李钢 王忠新 马鑫 王晓雄 张旭关键词:输尿管 上皮细胞 聚乳酸 miR-155、miR-15a和miR-181c在糖尿病环境下对人阴茎海绵体血管内皮细胞功能障碍的影响 关瑞礼 雷洪恩 许永德 杨璧铖 李辉喜 王林 辛钟成他达拉非5 mg治疗前列腺增生继发下尿路症状的荟萃分析 被引量:4 2020年 目的评价他达拉非(tadalafil)5 mg治疗前列腺增生继发下尿路症状(BPH/LUTS)的疗效及安全性。方法计算机及手工检索相关的随机对照研究(RCTs)。计算机检索时间限定为数据库建立至2018年10月,数据库包括万方数据库、中国期刊全文数据库(CNKI)、中国科技期刊数据库(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM),EMBASE、PubMed、Cochrane Library、Clinicaltrials.gov。对符合纳入标准的研究进行质量评估,提取数据并使用RevMan 5.3软件进行荟萃分析。结果本次分析纳入9个RCTs,共计3501例患者,其中他达拉非5 mg组1758例,安慰剂对照组1743例。与安慰剂组相比,他达拉非5 mg组可降低国际前列腺症状评分(IPSS)[MD=-1.79,95%CI(-2.19,-1.39)],改善生活质量(IPSS-Qol)[MD=-0.26,95%CI(-0.36,-0.16)],但对最大尿流率(Qmax)没有明显改善[MD=0.15,95%CI(-0.35,0.64),P=0.55]。与安慰剂组相比,他达拉非5 mg组不会明显增加因不良事件而退出的患者比例[RR=1.54,95%CI(0.96,2.49),P=0.08,I 2=0%]。结论他达拉非5 mg治疗前列腺增生可改善患者的下尿路症状,并具有良好的耐受性。 郑瀚 许永德 孙吉磊 杨勇关键词:他达拉非 前列腺增生 下尿路症状 HRM-非标记探针法检测CCL2-2518T>C突变方法的建立 被引量:2 2014年 目的建立一种高分辨率熔解曲线(HRM)-非标记探针的方法用于检测CCL2-2518T>C的单核苷酸多态性(SNP)。方法针对CCL2-2518 T>C,分别设计出针对野生型和突变型的两个非标记探针,采用HRM-非标记探针法对71名健康人群CCL2-2518位点的SNP进行检测,并采用TaqMan分型法进行验证。结果 HRM-非标记法的两个探针与TaqMan分型法分型结果一致,准确率100%;针对突变型(C)的探针明显好于针对野生型(T)的探针,其检测野生纯合型和突变纯合型的探针峰的温度之差分别为5.5℃和2.1℃。结论本研究建立的CCL2-2518 T>C位点突变检测的HRM-非标记探针方法是一种简单、廉价、灵敏、准确和快速的技术,适用于临床检测。 雷洪恩 高喆珠 许永德 辛钟成 郭应禄 关瑞礼关键词:多态性 单核苷酸 第四届国际性医学专家学术会(4th ICSM)会议纪要 2015年 第四届国际性医学专家学术会(the 4th International Consultationon Sexual Medicine,4thICSM)于2015年6月19至21日在西班牙马德里召开。此次大会是由国际性医学学会(International Society for Sexual Medicine,ISSM)主办,其附属的7个区域性性医学分会包括亚太性医学学会(APSSM)联合主办。4th ICSM旨在促进将本领域内的最新研究进展转化为临床诊治指南。 雷洪恩 许永德 关瑞礼关键词:性医学 裸鼠肾被膜下阴茎海绵体组织和盆神经节移植的可行性 2016年 目的:基于组织异体移植技术,研究将正常SD(Sprague-Dawley)大鼠阴茎海绵体组织和盆神经节移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下的可行性。方法:无菌条件下获取SD大鼠阴茎组织和盆神经节,在手术显微镜下将上述组织移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下,分别于移植后1周和4周检测移植物的组织病理学变化及移植物内部细胞增殖情况。结果:移植1周后,移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下的阴茎海绵体组织与正常阴茎海绵体组织形态一致,在阴茎海绵体窦内充满血液;移植4周后,靠近肾的阴茎海绵体组织接近正常组织形态,而远离肾的阴茎海绵体组织表现为纤维化,仍可在阴茎海绵体窦观察到血液。盆神经节移植后1周,移植物内部组织结构与正常盆神经节相近,可见多个"细胞团"样结构存在,在靠近肾的部位有新生血管样结构形成;移植后4周,在远离肾的盆神经节组织内观察到血管存在,"细胞团"样结构仍较明显。此外,移植后4周,移植到Nu/Nu裸鼠肾被膜下的海绵体组织和盆神经节中可见ki67阳性的细胞存在,提示移植物内部分细胞仍存在增殖活性。结论:将正常SD大鼠阴茎海绵体组织和盆神经节移植到裸鼠肾被膜下后,至少可以存活4周,移植物内部组织结构与正常SD大鼠阴茎海绵体和盆神经节组织结构基本一致,可能与肾被膜下提供了移植物所需的局部微环境及移植物内部逐渐形成血液循环有关。 许永德 关瑞礼 吴元翼 雷洪恩 杨璧铖 李辉喜 王林 郭应禄 辛钟成关键词:阴茎海绵体 盆神经节 人脂肪间充质干细胞诱导分化尿路上皮细胞的研究 被引量:12 2012年 目的探讨间接共培养法诱导人脂肪间充质干细胞向尿路上皮细胞定向分化的可行性。方法人脂肪间充质干细胞提取自吸脂术患者的废弃脂肪组织中,经流式细胞法来鉴定人脂肪间充质干细胞的表型。应用Transwell培养系统构建间接共培养模型,上层种植输尿管上皮细胞(1×104/cm2),下层种植脂肪间充质干细胞(0.5×10^4/cm2),共培养14d。采用免疫荧光方法鉴定尿路上皮标志物[细胞角蛋白-18(CK-18),尿斑蛋白2(UP2)]表达。将诱导后的细胞种植于I型胶原+聚乳酸混合电纺丝输尿管支架材料上,体外培养7d,免疫荧光法鉴定诱导后的细胞在输尿管支架材料上尿路上皮标志物表达。苏木素-伊红(HE)染色、Livedead法检测观察诱导后细胞生长。结果共培养7d后,诱导后的细胞形态呈现尿路上皮细胞样,14d后,免疫荧光检测表明,40%~50%的干细胞表达尿路上皮标志物(CK-18及UP2)。诱导后的细胞种植在输尿管支架材料上,细胞增殖生长良好,呈铺展状态生长,活细胞占总数的90%以上(Livedead),并且表达尿路上皮标志物。结论使用间接共培养法能成功诱导人脂肪间充质干细胞向尿路上皮细胞分化,为输尿管等泌尿系统组织工程研究提供了一种新的种子细胞。 符伟军 史建国 王晓雄 许永德 谭海颂 杜芝燕 张旭关键词:脂肪间充质干细胞 尿路上皮 共培养