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抗凝血酶基因10381T缺失导致的Ⅰ型抗凝血酶缺陷症被引量：3: 2014年; 目的对1例遗传性抗凝血酶(AT)缺陷症先症者及其家系进行表型诊断和基因诊断,并探讨其家系成员发病机制。方法用发色底物法检测该家系9名成员的AT活性(AT∶A)、蛋白S活性(PS∶A)、蛋白C活性(PC∶A),用免疫比浊法检测AT抗原量(AT∶Ag),用Western blot检测血浆中的AT分子质量和含量,抽提外周血基因组DNA,用PCR对AT基因的7个外显子及其侧翼序列进行扩增,用直接测序法对该家系所有成员的扩增产物进行测序分析并进行基因突变检测,同时筛查100例正常人以排除基因突变的多态性。结果该家系先症者AT∶A和AT∶Ag分别为48%和121 mg/L,先症者AT基因的第6外显子发现10381T del。其家系的部分成员检测到相同的移码突变。结论该家系先症者及部分成员存在Ⅰ型遗传性抗凝血酶缺陷症,是由AT基因10381T del移码突变所致。; 李正民宫璀璀吕金利方盼盼王广兰伦永志白洁; 关键词：抗凝血酶基因突变易栓症

HIF-1α和RelA基因在急进高原正常人外周血单个核细胞中的表达及其与急性高原反应的关联性被引量：2: 2013年; 目的:观察急进高原前后正常人单个核细胞中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和核转录因子NF-κB p65亚基(RelA)表达水平的变化,探讨HIF-1α和RelA在急性高原反应(AMS)发生中的作用及机制。方法:对某部赴玉树抗震的士兵分别于进入高原前和进入高原后48h采集外周血,提取单个核细胞中的mRNA和蛋白,采用RT-PCR方法检测RelA和HIF-1αmRNA表达水平,Western blotting法检测HIF-1α蛋白表达水平。Spearman相关分析法分析RelA和HIF-1α基因表达与AMS发生的相关性。结果:与急进高原前比较,进入高原后HIF-1α和RelA mRNA及HIF-1α蛋白表达水平均显著增高(P<0.01);HIF-1αmRNA和RelA mRNA表达呈正相关关系(r=0.806,P<0.01);HIF-1α蛋白表达与AMS的发生率呈正相关关系(r=0.875,P<0.01);HIF-1α和RelA表达不同性别之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HIF-1α蛋白表达水平可作为预测和干预AMS的监测指标。急进高原后HIF-1α和RelA mRNA表达水平显著增加且呈显著正相关关系,提示在其信号传导通路之间存在cross-talk现象。; 方盼盼宫璀璀仓宝成李正民李宗杰李文莉朱传杰王迎涛; 关键词：急性高原反应核转录因子KAPPAB CROSS-TALK

人脐带间充质干细胞不同冻存方法探讨被引量：5: 2012年; 目的观察不同冻存条件对人脐带间充质干细胞(HUC-MSC)冻存效果的影响。方法将HUC-MSC传代培养增殖后,设立4个因素和3个水平,分为9个实验组,分别观察不同冻存条件下对各组HUC-MSC的存活率、回收率、免疫抗原CD34和CD44的影响。结果第9组HUC-MSC解冻复苏后,其存活率、回收率以及免疫抗原CD44积分值均高于其他组(P<0.01),冻存前后其细胞形态无明显差别,细胞免疫抗原CD34均为阴性。结论以90%血清+10%二甲基亚砜(DMSO)作为冻存液,取106/mL以下浓度的HUC-MSC放入厚壁聚乙烯泡沫盒中,立即封存置-80℃冻存24h,再投入液氮中冻存,为最佳冻存方法。; 李正民宫璀璀; 关键词：间质干细胞连续传代细胞培养技术正交试验

急进高原后外周血单个核细胞内相关易感基因表达与急性高原反应分析: 2013年; 目的探讨低氧诱导因子1(HIF-1α)、P38 MAPK和血管内皮生长因子(VEGF)在急进高原后外周血单个核细胞的表达变化,以及其与急性高原反应(AMS)的关系。方法对某部队赴青海省玉树抗震的官兵分别于进入高原前后48 h采集外周血,提取单个核细胞用RT-PCR法检测P38 MAPK及HIF-1αmRNA表达,Western blot法检测HIF-1α及VEGF蛋白表达。按照《急性高原反应的诊断和处理原则》诊断AMS。结果与进入高原前相比,HIF-1αmRNA和蛋白表达水平及P38 MAPK mRNA表达水平均明显增高(P<0.001);VEGF蛋白水平也上调(P<0.01);HIF-1α及VEGF蛋白表达水平与AMS的发病程度高度相关,相关系数分别为0.875和0.675(P<0.001)。结论 HIF-1α、P38 MAPK和VEGF在急进高原48 h后表达水平均显著增加,HIF-1α和VEGF蛋白表达水平与AMS发病呈显著正相关。; 方盼盼宫璀璀仓宝成李正民李宗杰李文莉朱传杰王迎涛; 关键词：急性高原反应低氧诱导因子1

遗传性抗凝血酶缺陷症基因突变的研究进展被引量：2: 2014年; 人体的抗凝系统主要有抗凝血酶（antithrombin，AT）系统（包括抗凝血酶和肝素，主要抑制具有丝氨酸蛋白酶活性的凝血因子，如：FXa，凝血酶等）和蛋白 C 系统（包括蛋白 C，蛋白 S，血栓调节蛋白，内皮细胞蛋白 C 受体等，主要灭活凝血因子Ⅴ和Ⅷ等），而抗凝血酶系统中的抗凝血酶是人体最重要的抗凝因子之一，约占抗凝活性的70％。抗凝血酶是一种丝氨酸蛋白酶（serpins）抑制剂，主要具有抑制丝氨酸蛋白酶活性的凝血酶、FXa 等因子，在人体抗凝系统中发挥着重要作用。; 李正民宫璀催方盼盼徐立博; 关键词：基因突变丝氨酸蛋白酶蛋白酶活性 SERPINS 抗凝系统

医院细胞培养层流洁净室的运行、维护与保养: 目的为了使细胞培养层流洁净室的工作能够正常开展，确保室内各指标能够达到标准，保证临床治疗所用细胞的质量。方法我们必须对细胞培养层流洁净室的运行建立相应的管理制度、并定期进行维护与保养。结果与结论通过建立细胞培养层流...; 李正民宫璀璀

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李正民