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抗血管内皮细胞生长因子受体单抗的制备及鉴定被引量：6: 1998年; 目的：制备血管内皮细胞生长因子受体（ｋｉｎａｓｅｉｎｓｅｒｔｄｏｍａｉｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＫＤＲ）的单克隆抗体并鉴定其特异性。方法：在大肠杆菌中表达重组ＫＤＲ融合蛋白。融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞，用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基喋呤与胸苷选择性培养。单克隆杂交瘤上清经ＥＬＩＳＡ双筛和ＳＰ免疫组化筛选并鉴定其亚类。结果：经ＥＬＩＳＡ双筛和组化筛选获得了一株能稳定分泌人ＫＤＲ单克隆抗体的杂交瘤细胞株（命名为ＳＳＷ２），其分泌抗体亚类为ＩｇＧ１，产生的腹水效价可达１×１０－６。结论：ＳＳＷ２同血管内皮细胞尤其是肿瘤组织的血管内皮细胞有较强的阳性反应。; 宋述梅吴健寿成超; 关键词：KDR 单克隆抗体

VEGF的单抗制备及胃癌细胞MGC803表达VEGF的鉴定被引量：10: 1999年; 目的从胃癌细胞ＭＧＣ８０３克隆并在体外表达血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ），利用ＶＥＧＦ１２１单克隆抗体对其产物进行鉴定，为进一步明确肿瘤组织中ＶＥＧＦ来源，并以ＶＥＧＦ为靶点治疗肿瘤奠定基础。方法用杂交瘤技术制备ＶＥＧＦ１２１单克隆抗体（ＭｃＡｂ），通过ＥＬＩＳＡ、３ＨＴｄＲ掺入检测其活性；用ＲＴＰＣＲ从ＭＧＣ８０３细胞克隆ＶＥＧＦ基因，与原核表达载体ＰＧＥＸ２Ｔ重组，在大肠杆菌中进行表达，以Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ对表达产物进行鉴定。结果所制备的ＶＥＧＦＭｃＡｂ能特异性地同ＶＥＧＦ结合，并能中和ＶＥＧＦ对内皮细胞的促增殖作用；利用ＲＴＰＣＲ扩增出特异的ＶＥＧＦ基因片段，重组到ＰＧＥＸ２Ｔ表达载体中，在大肠杆菌ＸＬ１ｂｌｕｅ中得到了稳定高效表达的蛋白产物，并能特异性地被ＶＥＧＦ抗体所识别。结论在ＭＧＣ８０３细胞中存在ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达，提示肿瘤细胞是肿瘤组织中ＶＥＧＦ的重要来源。ＶＥＧＦＭｃＡｂ不仅可对其存在进行检测，而且可有效抑制ＶＥＧＦ对内皮细胞的促增殖作用。; 田学军吴健孟麟寿成超董志伟; 关键词：胃肿瘤 VEGF 单克隆抗体

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吴健

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