刘晓宇
- 作品数：4 被引量：13H指数：1
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- 羟基磷灰石纳米颗粒载体介导hGM-CSF基因转染HepG2细胞及对其生长的影响被引量：13
- 2008年
- 目的:研究羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)纳米颗粒载体携带人粒-巨噬细胞集落刺激因子(human granulocyte mac-rophage colony stimulating factor,hGM-CSF)基因转染HepG2细胞,以及其对细胞生长的影响,为基因修饰的肝癌肿瘤疫苗的临床研究奠定基础。方法:采用MTT法检测HA纳米颗粒载体对HepG2细胞生长的影响;采用HA纳米颗粒载体转染技术,将携带有hGM-CSF基因的表达质粒导入HepG2细胞中,G418筛选抗性细胞,限制性稀释法挑选单克隆;RT-PCR法鉴定hGM-CSF的整合和表达,ELISA法测定细胞培养液中的hGM-CSF分泌量和持续的时间;FCM法分析hGM-CSF基因对HepG2细胞生长的影响。结果:MTT结果提示HA纳米颗粒混悬液浓度在80μg/mL以下对HepG2细胞生长的影响与对照组比较差异无统计学意义。RT-PCR结果显示hGM-CSF基因在HepG2细胞中已整合并稳定表达。ELISA检测结果显示转入hGM-CSF基因的HepG2细胞能稳定分泌hGM-CSF,其分泌量为(216.22±45.78)ng/106cells每24h。FCM检测结果则显示hGM-CSF基因不促进细胞凋亡,且对细胞的生长周期无明显影响。结论:HA纳米颗粒载体可以安全地将目的基因hGM-CSF导入HepG2细胞中且稳定表达,其对细胞的生长无明显影响,为基因修饰的肝癌疫苗的后继研究提供了实验基础。
- 郭淦华段晓明刘晓宇曹建国贺修胜
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子转染生物相容性材料
- c-myc反义寡核苷酸对转染FHIT基因胃癌细胞MKN28的影响
- 目的:肿瘤死亡率高,生存期短,严重威胁人们的健康。随着分子生物技术的发展,肿瘤的基因治疗已成为目前研究的热点。本课题通过研究c-myc反义寡核苷酸对转染FHIT胃癌细胞MKN28增殖和凋亡的影响,进一步探讨癌基因与抑癌基...
- 刘晓宇
- 关键词：基因,C-MYC转染
- 文献传递
- 反义c-myc寡核苷酸对转染FHIT基因胃癌细胞MKN28的影响
- 2008年
- 目的:探讨脂质体介导的c-myc反义寡核苷酸对导入脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的胃癌细胞增殖及凋亡的影响.方法:通过脂质体将重组FHIT基因PRC/ CMV质粒和空载体转染到人类胃癌细胞系MKN28,并分别转染c-myc反义寡核苷酸,RT- PCR和Westen blot法检测FHIT基因的转染,Western blot法检测细胞c-myc的表达,MTT法分析细胞增殖,AO/EB染色法和流式细胞分析技术检测细胞凋亡.结果:转染FHIT基因后,MKN28细胞检测到FHIT基因片段和FHIT蛋白,而未转染的细胞及转染空载体的细胞未检测到FHIT基因片段及FHIT蛋白.转染c-myc反义寡核苷酸后.对MKN28细胞c-myc的表达有明显的抑制作用,并呈明显的时间依赖性;c-myc asODN对FHIT^+ MKN28细胞抑制率(F=177.480,P<0.05),凋亡率(F=41.500,P<0.05)和凋亡比例明显高于FHIT MKN28细胞。结论:癌基因c-myc的表达抑制联合FHIT基因的表达可以发挥较强的抗肿瘤细胞作用,为多基因治疗肿瘤提供了理论基础.
- 刘晓宇郭淦华段晓明陈建曹建国贺修胜
- 关键词：脆性组氨酸三联体反义C-MYC寡核苷酸转染逆转录聚合酶链式反应
- c-myc反义寡核苷酸对转染FHIT基因的胃癌细胞的影响
- 目的:肿瘤死亡率高,生存期短,严重威胁人们的健康。随着分子生物技术的发展,肿瘤的基因治疗已成为目前研究的热点。本课题通过研究c-myc反义寡核苷酸对转染FHIT胃癌细胞MKN28增殖和凋亡的影响,进一步探讨癌基因与抑癌基...
- 刘晓宇
- 关键词：胃癌细胞C-MYC反义寡核苷酸FHIT基因细胞凋亡增殖抑制
- 文献传递
