刘少平
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 供职机构：武汉大学基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人白细胞介素-10融合表达载体的构建及其在BL21(DE3)pLysE细菌细胞中的表达被引量：1
- 2004年
- 目的 构建重组人白细胞介素 10 (recombinanthumaninterleukin 10 ,rhIL 10 )融合蛋白的表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。方法 应用RT PCR方法扩增IL 10基因 ,克隆PCR产物 ,构建PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10重组质粒 ,以AppiedBiosystems 370 0DNA分析仪进行分析。构建成功的重组质粒转化大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysE细胞 ,经 12 %SDS PAGE鉴定融合表达蛋白。结果 PCRR○T7/NT TOPOR○ 质粒已载入rhIL 10基因 ,其序列与理论设计完全一致 ,表达质粒在BL2 1(DE3)pLysE中得到高效表达 ,产物主要以包涵体形式存在。结论 已成功构建重组PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10质粒载体 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3)
- 方爱平杨国成YEShui-qing夏腊菊孙凌聪刘少平
- 关键词：RHIL-10包涵体大肠杆菌
- 小鼠颌下腺2.5S神经生长因子生物活性评估标准的建立被引量：2
- 2005年
- 目的 观察小鼠颌下腺 2 5S神经生长因子 (NGF)对鸡胚背根神经节 (DRG)细胞生长的作用 ,建立一套对神经生长因子在生物活性的评估标准。方法 分离培养鸡胚背根神经节 ,加入不同浓度NGF、NGF标准品 ,另设空白和NGF与NGF抗体对照组 ,共培养 4 8h后观察各组神经节周围神经突起的生长情况。结果 NGF促进神经节细胞突起生长 ,随浓度升高突起而增多增长 ,与标准品相似 ,而不加NGF或加NGF与NGF抗体则无或仅有少量突起生长。结论 小鼠颌下腺 2 5SNGF呈剂量依赖性促进背根神经节细胞生长的作用 ,依神经节突起生长的不同程度可将NGF的生物活性划分为五个等级标准。
- 刘少平杨国成孟祥平夏腊菊朱汉民
- 关键词：神经生长因子生物活性背根神经节
- 单唾液酸神经节苷脂对2,5-己二酮诱导的PC12细胞凋亡的影响被引量：2
- 2006年
- 目的研究单唾液酸神经节苷脂(GM1)对2,5-己二酮(2,5-HD)诱导PC12细胞凋亡的保护作用,并探讨其作用机制。方法以PC12细胞为神经元的细胞模型,2,5-HD、GM1及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)抑制剂LY294002单独或联合处理细胞,MTT法检测细胞存活率,Giemsa染色法观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,免疫印迹检测蛋白激酶B(Akt)和磷酸化-Akt(P-Akt)蛋白的表达。结果GM1可以有效地改善凋亡引起的细胞形态学改变,提高细胞存活率(P<0.05),最高可提高36.35%;降低DNA断裂程度,减少凋亡率(P<0.001),最明显可降低69.36%。GM1能够促进Akt磷酸化,LY294002可以阻断这种作用。结论GM1对2,5-HD诱导的PC12细胞凋亡有保护作用。该保护作用可能是通过启动PI3-K信号通路,激活Akt及其下游信号而产生的。
- 孟祥平杨国成刘少平孙凌聪刘莉高兴华汤贝贝
- 关键词：神经节苷脂2,5-己二酮PC12细胞凋亡磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B正己烷中毒
- NGF和神经节苷脂GM_1对2,5-己二酮中毒性PC12细胞的协同保护作用被引量：5
- 2006年
- 目的:研究神经生长因子(Nerve Growth Fac-tor,NGF)和神经节苷脂GM1(Ganglioside GM1)对2,5-己二酮(2,5-HD)中毒的保护作用。方法:将细胞随机分为对照组和实验组,对照组于正常培养基生长,实验组以2,5-HD、NGF和GM1处理。采用Giemsa染色法在倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞存活率,流式细胞计数法检测细胞凋亡率。结果:2,5-HD处理后,细胞损伤存活率降低(P<0.01),凋亡率上升(P<0.01);以NGF和GM1预处理的细胞显示出明显的抗损伤性,细胞存活率提高(P<0.05),凋亡率下降(P<0.05),且在联合时较单独应用效果更显著(P<0.01)。结论:2,5-HD抑制PC12细胞存活和增殖,诱导细损伤和凋亡。NGF和GM1对2,5-HD中毒性PC12细胞显示出协同保护作用。
- 刘莉杨国成刘少平孟祥平高兴华汤贝贝
- 关键词：神经节苷脂GM12,5-己二酮协同保护作用
- 2,5-己二酮诱导的PC12细胞损伤和凋亡被引量：5
- 2005年
- 目的建立2,5己二酮诱导的PC12细胞凋亡模型。方法以PC12细胞为神经元的细胞模型,将2,5己二酮(30、40、50mmol/L)加入培养的PC12细胞中,四甲基偶氮唑盐检测细胞活性,Hochest33258观察细胞核变化,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂、流式细胞仪检测细胞凋亡率,比较各组间的差异。结果随2,5己二酮浓度增加,细胞存活率下降(P<0.01);荧光显微镜观察有特征性的凋亡细胞核;琼脂糖凝胶电泳有明显的DNAladder;流式细胞仪检测凋亡率随2,5己二酮浓度的增大而增加(P<0.05)。结论一定浓度的2,5己二酮有导致PC12细胞损伤和凋亡的作用。
- 孙凌聪杨国成夏腊菊朱汉明张澄宇刘少平
- 关键词：2,5-己二酮PC12细胞凋亡
