孙凌聪 作品数:7 被引量:12 H指数:2 供职机构: 武汉生物制品研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 湖北省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
2,5-己二酮诱导的PC12细胞损伤和凋亡 被引量:5 2005年 目的建立2,5己二酮诱导的PC12细胞凋亡模型。方法以PC12细胞为神经元的细胞模型,将2,5己二酮(30、40、50mmol/L)加入培养的PC12细胞中,四甲基偶氮唑盐检测细胞活性,Hochest33258观察细胞核变化,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂、流式细胞仪检测细胞凋亡率,比较各组间的差异。结果随2,5己二酮浓度增加,细胞存活率下降(P<0.01);荧光显微镜观察有特征性的凋亡细胞核;琼脂糖凝胶电泳有明显的DNAladder;流式细胞仪检测凋亡率随2,5己二酮浓度的增大而增加(P<0.05)。结论一定浓度的2,5己二酮有导致PC12细胞损伤和凋亡的作用。 孙凌聪 杨国成 夏腊菊 朱汉明 张澄宇 刘少平关键词:2,5-己二酮 PC12细胞 凋亡 重组人白细胞介素-10融合表达载体的构建及其在BL21(DE3)pLysE细菌细胞中的表达 被引量:1 2004年 目的 构建重组人白细胞介素 10 (recombinanthumaninterleukin 10 ,rhIL 10 )融合蛋白的表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。方法 应用RT PCR方法扩增IL 10基因 ,克隆PCR产物 ,构建PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10重组质粒 ,以AppiedBiosystems 370 0DNA分析仪进行分析。构建成功的重组质粒转化大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysE细胞 ,经 12 %SDS PAGE鉴定融合表达蛋白。结果 PCRR○T7/NT TOPOR○ 质粒已载入rhIL 10基因 ,其序列与理论设计完全一致 ,表达质粒在BL2 1(DE3)pLysE中得到高效表达 ,产物主要以包涵体形式存在。结论 已成功构建重组PCRR○T7/NT TOPOR○ IL 10质粒载体 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3) 方爱平 杨国成 YEShui-qing 夏腊菊 孙凌聪 刘少平关键词:RHIL-10 包涵体 大肠杆菌 麻疹-流行性乙型脑炎联合减毒活疫苗研制的初步结果 被引量:4 2008年 目的研制麻疹-流行性乙型脑炎(乙脑)联合减毒活疫苗(Measles and Japanese Encephalitis Combined At-tenuated Live Vaccine,M-JEV)。方法选用我国自主开发的麻疹病毒沪-191疫苗株和乙脑病毒SA14-14-2疫苗株,制备单价麻疹减毒活疫苗(Measles Attenuated Live Vaccine,MV)和乙脑减毒活疫苗(Japanese Encephalitis At-tenuated Live Vaccine,JEV)原液,进行干扰试验、配比试验、保护剂筛选试验、稀释液筛选试验、冻干曲线的选择。结果确定了M-JEV的制备工艺,进行了M-JEV的中试。中试M-JEV经全面检定符合2005年版《中华人民共和国药典》三部单价MV和JEV质量标准。动物试验未见病毒间交叉干扰,未见加重反应,未影响小鼠的免疫应答,表现了良好的安全性和免疫原性。结论成功制备了M-JEV。 李萍萍 魏树源 孙凌聪 易玲 桂金拄 吕文利 刘晓娜 夏莉莉 胡德祥 胡志雄 程容华 杨邦玲 田华 邱雁 付格 王新华 杨艳珠关键词:安全性 免疫原性 单唾液酸神经节苷脂对2,5-己二酮诱导的PC12细胞凋亡的影响 被引量:2 2006年 目的研究单唾液酸神经节苷脂(GM1)对2,5-己二酮(2,5-HD)诱导PC12细胞凋亡的保护作用,并探讨其作用机制。方法以PC12细胞为神经元的细胞模型,2,5-HD、GM1及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)抑制剂LY294002单独或联合处理细胞,MTT法检测细胞存活率,Giemsa染色法观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,免疫印迹检测蛋白激酶B(Akt)和磷酸化-Akt(P-Akt)蛋白的表达。结果GM1可以有效地改善凋亡引起的细胞形态学改变,提高细胞存活率(P<0.05),最高可提高36.35%;降低DNA断裂程度,减少凋亡率(P<0.001),最明显可降低69.36%。GM1能够促进Akt磷酸化,LY294002可以阻断这种作用。结论GM1对2,5-HD诱导的PC12细胞凋亡有保护作用。该保护作用可能是通过启动PI3-K信号通路,激活Akt及其下游信号而产生的。 孟祥平 杨国成 刘少平 孙凌聪 刘莉 高兴华 汤贝贝关键词:神经节苷脂 2,5-己二酮 PC12细胞 凋亡 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 正己烷中毒 麻疹腮腺炎乙型脑炎联合减毒活疫苗及其制备方法 一种麻疹腮腺炎乙型脑炎联合减毒活疫苗的制备方法,其步骤包括:(1)分别制备麻疹疫苗原液、腮腺炎疫苗原液和乙型脑炎疫苗原液;(2)将三种单价疫苗原液分别与疫苗保护剂明胶蔗糖和人血白蛋白混合,得麻疹、腮腺炎、乙型脑炎三种单价... 李萍萍 贾丽丽 杨晓明 方志正 董关木 孙凌聪 易玲 桂金柱 吕文利 岳广智 刘晓娜 夏莉莉 刘钢 胡德祥 胡志雄 王志伟 徐宏山 刘欣玉文献传递 小鼠2.5s神经生长因子对2,5-己二酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用 2006年 目的建立神经生长因子(NGF)对2,5己二酮(HD)诱导的PC12细胞凋亡保护作用的模型,并探讨其作用机制。方法以PC12细胞为神经元的细胞模型,将HD和不同浓度的NGF加入培养的PC12细胞中,四甲基偶氮唑盐检测细胞活性,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Westernblot检测p53蛋白表达,比较各组间的差异。结果随NGF浓度增加,细胞存活率升高,差异有统计学意义(P<0.01);DNA断裂减少;细胞凋亡率减小(P<0.01);p53表达量下降(P<0.05)。结论NGF对PC12细胞可能具有直接的神经营养作用,且可保护PC12细胞免于2,5HD诱导的损伤以及具有抗凋亡作用。 孙凌聪 夏腊菊 孟祥平 刘莉 高兴华 杨国成关键词:神经生长因子 PC12细胞 凋亡 2,5-己二酮 己二酮诱导PC12细胞中毒模型的建立及神经生长因子的保护作用 目的:建立2,5-己二酮诱导的PC12细胞凋亡模型和神经生长因子对2,5-己二酮诱导的PC12细胞凋亡保护作用的模型,并分别探讨其机制。方法:以分化的PC12细胞为神经元的细胞模型,将不同浓度的2,5-己二酮和NGF加入... 孙凌聪关键词:神经生长因子 2,5-己二酮 PC12细胞 文献传递