刘中兵
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 供职机构：泸州医学院药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目四川省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 星点设计优化非病毒载体前阳离子脂质体的制备工艺被引量：3
- 2007年
- 目的采用星点设计优化前阳离子脂质体的制备工艺并考察前阳离子脂质体的有关性质。方法以薄膜分散膜挤压法制备前阳离子脂质体,以平均粒径、转染效率为指标,考察鱼精蛋白(Protamine)与质粒DNA的比例、脂质体骨架材料CHETA浓度、CHETA与质粒DNA的比例3个因素对制备条件的影响,将实验结果用数学方法处理并进行方程模型拟合,根据拟合方程及反应曲面图确定指标的最优值和各因素相对应的最佳取值范围。以LacZ为报告基因转染肝癌细胞HepG2,定量测定β-半乳糖苷酶活性和总蛋白含量,并计算转染效率。结果影响平均粒径、转染效率的3个主要因子的最佳取值分别为:Protamine/DNA(2.5:1);CHETA(45%);CHETA/DNA(4:1)。所制前阳离子脂质体形态近似于球体,平均粒径228.9±8 nm,多分散指数为0.122±0.02,Zeta电位为?25.08±2.5 mV,载基因前阳离子脂质体转染HepG2肝癌细胞转染效率为24.26±2.6 mU.mg-1。结论星点设计应用简便、预测性好,制备的前阳离子脂质体符合设计要求。
- 刘中兵宋庆国
- 关键词：星点设计鱼精蛋白转染效率
- 脂质超声微泡增强AAV介导的致密结构细胞的基因转导
- 2013年
- 目的:探讨超声介导的脂质微泡能否增强腺相关病毒(AAV)对具有致密结构的细胞的转导效率。方法:制备载AAV-eGFP的脂质超声微泡,以Malvern粒度检测仪检测微泡粒径及分布,选用人支气管上皮细胞16HBE14o-为模型细胞,采用Transwell小室细胞培养技术培养具有紧密结构的人支气管上皮细胞16HBE14o-,利用倒置荧光显微镜定性观察转导效率,采用流式细胞技术进一步定量检测转导效率。结果:本试验制备的载AAV脂质超声微泡呈圆球形均匀分布,平均粒径为2.46±1.2μm;脂质微泡携同超声处理能显著增强AAV对形成致密结构的人支气管上皮细胞16HBE14o-转导效率。结论:超声介导脂质微泡为AAV在基因治疗中的应用提供了一种新的途径,为AAV在体内的靶向应用奠定了基础。
- 刘中兵钟志容傅秀娟李劲薇兰欢余昕何颖左正云
- 关键词：腺相关病毒基因转导人支气管上皮细胞
- 中心组合设计法优化前阳离子脂质体的制备工艺被引量：2
- 2007年
- 目的:采用中心组合设计法优化前阳离子脂质体的制备工艺,考察前阳离子脂质体的有关性质。方法:以薄膜分散膜挤压法制备前阳离子脂质体,以平均粒径、转染效率为指标,对鱼精蛋白(protamine)与质粒DNA的质量比、CHETA([2[[4-[羧甲基]二硫-1-亚氨丁基]氨基]乙基]氨基甲酸胆固醇酯)摩尔百分比浓度、CHETA与质粒DNA的质量比3个自变量的各个水平进行二项式拟合,通过响应面分析选取较佳工艺条件。以LacZ为报告基因转染HepG2细胞,定量测定β-半乳糖苷酶活性和总蛋白含量计算转染效率。结果:影响平均粒径、转染效率的3个主要因子的最佳取值分别为:protamine/DNA,2.5∶1;CHETA(mol%),45;CHETA/DNA,4∶1。优化条件制备的前阳离子脂质体形态近似于球体,平均粒径为(228.9±8)nm,多分散指数为0.122±0.02(n=3),Zeta电位为-(25.08±2.5)mV(n=3),载基因前阳离子脂质体转染HepG2肝癌细胞转染效率为(24.26±2.6)mUβ-半乳糖苷酶/mg protein。结论:中心组合设计应用简便、预测性好,制备的前阳离子脂质体符合设计要求。
- 钟志容刘中兵张志荣何勤
- 关键词：鱼精蛋白转染效率
- 阴离子脂质体介导的腺病毒/卡莫司汀共转运系统载药量测定
- 2012年
- 目的建立一套有效可靠的检测方法,以测定阴离子脂质体介导的腺病毒和化疗药卡莫司汀共转运载体系统中腺病毒和卡莫司汀的含量。方法以钙离子融合法制备共转运载体复合物;根据腺病毒(Ad5)的hexon基因序列设计用于Taqman探针荧光定量聚合酶链式反应(PCR)的引物和探针序列,优化反应体系,从而准确测定腺病毒含量;优化色谱条件,建立针对共转运载体复合物检测卡莫司汀含量的高效液相色谱法。结果以荧光定量聚合酶链式反应法测得共转运载体复合物中腺病毒载药量为(23.2±1.8)%;高效液相色谱法测得卡莫司汀在共转运载体复合物中的载药量为(55±2.8)%。结论本实验成功建立了分别用于测定共转运载体系统中腺病毒和卡莫司汀含量的荧光定量聚合酶链式反应和高效液相色谱法;这两种检测方法操作简便、准确可靠,具有一定的普遍适用性。
- 钟志容刘中兵高岑万瑜石三军张志荣孙逊冯朝林曹立辉
- 关键词：腺病毒荧光定量PCR法高效液相色谱法
- 中心组合设计在阿司匹林软膏处方优化中的应用被引量：1
- 2014年
- 目的确定阿司匹林软膏剂的最佳处方。方法以6 h累积渗透量和皮肤刺激性为考察指标,选择阿司匹林软膏处方中对指标影响较显著的3个因素:十二烷基硫酸钠、枸橼酸三钠、三乙醇胺为考察对象,采用中心组合设计法对阿司匹林软膏处方进行优化。结果阿司匹林软膏的最佳处方是:十二烷基硫酸钠1.41%,枸橼酸三钠3.50%,三乙醇胺3.00%。按照优化处方制备了3批阿司匹林软膏样品,其6 h平均累积渗透量为990.18μg·cm-2,产品无明显刺激性。结论中心组合设计法应用简便、预测性好,制备的阿司匹林软膏符合设计要求。
- 李劲薇刘中兵余昕蒋兴景沛熊丹刘易陇钟志容
- 关键词：处方优化
- 杜绝垃圾邮件的两种方案
- 现今，网络上电子邮件广告满天飞。造成这种状况的一个主要原因就是，标准的电子邮件传输协议(( SMTP)在传输邮件时，不进行用户身份认证，邮件可以被匿名l冒名发送。解决以上问题有两种方案，一种为采用SMTP认证，即用户发送...
- 刘中兵
- 关键词：电子邮件垃圾邮件用户身份认证邮件传输协议
- 文献传递
