丁选亚
- 作品数：8 被引量：18H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
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- 猪流感病毒HA基因原核表达及其初步应用
- 利用RT-PCR方法扩增猪流感病毒A/Swine/Henan/11/2005(H1N1)HA基因,克隆于PMD18-T载体进行测序。以PMD18-HA为模板、利用带酶切位点的引物再次扩增HA基因的开放阅读框(ORF),克...
- 陈艳乔传玲丁选亚杨焕良辛晓光韩庆功陈化兰
- 关键词：猪流感病毒HA基因原核表达
- 文献传递
- H3N2亚型猪流感病毒进化分析及重组HA1蛋白间接ELISA诊断方法的建立
- H3N2亚型猪流感病毒在全世界猪群中广泛存在，不仅给养猪业带来了巨大的经济损失，而且对人类健康造成威胁。为了了解我国2004～2005年猪流感病毒流行情况，我们对中国某些省市猪群进行猪流感血清学和病原调查研究，从1238...
- 丁选亚
- 关键词：H3N2猪流感病毒原核表达系统间接ELISA
- 文献传递
- H3N2亚型猪流感病毒重组HA1蛋白间接ELISA诊断方法的建立被引量：9
- 2008年
- 以pMD18-HA质粒为模板,PCR扩增HA1基因片段并与pET30a连接后,转化宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导表达HA1蛋白,对表达蛋白进行SDS-PAGE及Western blotting检测。结果表明,表达的重组HA1蛋白具有良好的反应原性,分子量约为45 ku。表达产物经过纯化作为包被抗原建立了检测H3亚型猪流感抗体的间接ELISA方法。该方法具有较高的特异性和敏感性,重复性良好,通过检测40份血清,与HI检测结果相比较,其符合率达86.5%。该方法为检测H3亚型猪流感抗体提供了一种快速、准确、简便的技术手段。
- 丁选亚乔传玲陈艳杨焕良辛晓光韩庆功陈化兰
- 关键词：猪流感病毒间接ELISA
- 猪流感病毒血凝素基因原核表达及其在间接ELISA中的初步应用被引量：6
- 2008年
- 利用RT-PCR方法扩增猪流感病毒A/Swine/Henan/11/2005(H1N1)血凝素(HA)基因,克隆于pMD18-T载体进行测序。以pMD18-HA为模板、利用带酶切位点的引物再次扩增HA基因的开放阅读框(ORF),克隆到表达载体pET32a中,经双酶切、测序及PCR鉴定得到阳性重组表达质粒pET-HA,将质粒转化到表达宿主菌BL21(DE3)中,经终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示,HA蛋白获得了高效表达,经Western-blot检测证实表达产物具有良好的免疫学活性,在间接ELISA中的初步应用表明具有良好的抗原反应性。本研究为以重组HA蛋白为抗原建立H1亚型猪流感抗体的ELISA检测方法奠定了基础。
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- 关键词：猪流感病毒HA基因原核表达
- 猪源H9N2亚型流感病毒HA基因的序列测定及真核表达被引量：1
- 2007年
- 利用RT-PCR扩增猪流感病毒A/Swine/Zhejiang/7/2004(H9N2)(SW/ZhJ7/04)HA基因,测序后将其克隆到真核表达载体pCAGGS上,经酶切分析、PCR鉴定和测序验证,得到重组表达质粒pCAGGS-HA,之后将其转染293T细胞,48h后收集转染细胞样品,进行SDS-PAGE分析,结果显示HA蛋白获得了表达。经Western blot检测,结果表明pCAGGS-HA能够在体外瞬时表达具有免疫学活性的HA蛋白,通过免疫小鼠,对其免疫效果进行了初步研究。
- 韩庆功乔传玲杨焕良陈艳辛晓光丁选亚陈化兰
- 关键词：猪流感病毒HA基因真核表达
- H1N1亚型猪流感病毒HA基因的序列测定及原核表达
- 利用RT-PCR方法扩增出猪流感病毒A/Swine/Henan/11/2005(H1N1)HA基因,然后克隆到PMD18-T载体上,并进行测序和构建其系统进化树.根据测出的HA序列设计出带酶切位点的一对引物,并以PMD1...
- 丁选亚乔传玲韩庆功杨焕良陈艳辛晓光陈化兰
- 关键词：猪流感病毒HA基因原核表达基因序列
- 文献传递
- 猪流感病毒HA基因原核表达及其初步应用
- 利用RT-PCR方法扩增猪流感病毒A/Swine/Henan/11/2005(H1N1)HA基因，克隆于PMD18-T载体进行测序。以PMD18-HA为模板、利用带酶切位点的引物再次扩增HA基因的开放阅读框(ORF)，克...
- 陈艳乔传玲丁选亚杨焕良辛晓光韩庆功陈化兰
- 关键词：猪流感病毒HA基因原核表达RT-PCR方法
- H3N2亚型猪流感病毒进化分析及重组HA1蛋白间接ELISA诊断方法的建立
- 对2004～2005年中国某些省市猪群进行猪流感血清学和病原学调查研究,从1238份猪鼻棉拭子样品和死亡猪肺、气管样品中分离到5株H3N2亚型猪流感病毒。通过比较发现这5株病毒的HA基因同源性较高,达99%以上。对其中的...
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- 文献传递
