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陶家发: 作品数：86 被引量：163H指数：7; 供职机构：中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>; 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目中国水产科学研究院基本科研业务费专项基金国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>

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嗜水气单胞菌J-1株灭活疫苗生产工艺的改进被引量：1: 2011年; 目的改进嗜水气单胞菌J-1株灭活疫苗的生产工艺,提高培养效率。方法采用改良培养基和产毒素培养基,利用机械式通风搅拌培养J-1菌株,确定发酵培养时间,并比较两种培养基的培养效果;用摇瓶灭活和罐灭活J-1菌株培养液,比较不同浓度甲醛的灭活效果。结果用机械搅拌发酵罐培养J-1菌株,菌体生长12～14 h达峰值,产毒素培养基菌液活菌数平均为102×108 CFU/ml,改良培养基活菌数平均为216×108 CFU/ml,较产毒素培养基提高了111.7%,活菌数最大可达300×108 CFU/ml;改良培养基培养J-1菌株,培养液毒力略高于产毒素培养基;0.3%的福尔马林于37℃灭活24 h,可完全灭活J-1菌株培养液,且制备的灭活疫苗福尔马林残留量符合质量标准。结论改良培养基培养J-1菌株的效果明显优于产毒素培养基,机械式搅拌发酵罐培养嗜水气单胞菌,可比原工艺缩短培养时间一半。; 陶家发赖迎迢任燕江小燕康光辉张悠石存斌吴淑勤; 关键词：嗜水气单胞菌生产工艺

一种融合基因、其所编码的蛋白及其在鱼类弹状病毒口服疫苗的应用: 本发明公开了一种融合基因、其所编码的蛋白及其在鱼类弹状病毒口服疫苗的应用。所述融合基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明方案通过将经密码子优化后的融合基因经原核表达，制备得到Lactococcus lact...; 赖迎迢黄志斌巩华陶家发; 文献传递

嗜水气单胞菌GYK1株培养基的优化被引量：4: 2006年; 在营养肉汤培养基的基础上,经过一系列嗜水气单胞菌GYK1株培养试验,结果证明,成本价格较低的蔗糖、酵母膏可以代替葡萄糖、牛肉膏,从而降低培养基原料成本;添加少量的K2HPO4和微量元素溶液(Mg2+、Fe2+、Zn2+、Mn2+)可明显提高培养液的活菌数;通过正交试验得到低成本、高得率的适合嗜水气单胞菌GYK1菌株生长的培养基配方,该培养基组成(g/L):蛋白胨10.0、酵母膏10.0、蔗糖15.0、K2HPO42.28;NaCl 5.0微量元素(硫酸镁0.1,硫酸亚铁0.04,硫酸锌0.00375,二氯化锰0.0021)。24 h摇瓶培养,菌液中的最高活菌数可达316×108cfu/mL,比营养肉汤培养基活菌数(151×108cfu/mL)提高100%以上。; 陶家发吴淑勤潘厚军石存斌; 关键词：嗜水气单胞菌培养基

一种用于防治水产养殖水霉病的组合物及其制备方法: 本发明提出了一种用于防治水产养殖水霉病的组合物，包括如下质量百分含量的组分：20～30％的苦参粉末，10～20％的五倍子粉末，10～30％的水杨酸，30～50％的硼酸，此外，本发明还提出了其制备方法。本发明提出的技术方案...; 巩华陈总会孙承文陶家发林明辉罗霞黄志斌; 文献传递

鳜鱼脑部细胞培养研究: 本文以本实验室建立的鳜鱼脑部细胞(CPB)系为实验材料,目的是比较该细胞在不同培养条件下的生长状况,通过筛选和优化该细胞培养各种条件,为后续工厂化大规模生产鳜鱼疫苗做基础。通过对不同培养基、不同血清浓度、不同PH值等培养...; 赖迎迢付小哲陶家发张悠石存斌; 关键词：鳜鱼病毒疫苗; 文献传递

五条鰤源美人鱼发光杆菌杀鱼亚种的分离鉴定及药物敏感试验被引量：4: 2012年; 2007年5月广东汕尾红海湾网箱养殖的五条鰤爆发主要症状为脾脏、肾脏出现许多灰白色小结节的疾病。从病鱼体内分离出1株优势菌株,命名为SWZX5,为革兰氏阴性杆菌。SWZX5对剑尾鱼有强致病性,其半数致死量为5.8×105CFU/g。综合细菌在形态、生理生化特性及16S rRNA系统发育树等方面的研究结果,确认分离菌株SWZX5属于美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida)。15种中草药提取液的抑菌和杀菌试验显示,五倍子的功效最好,MIC和MBC均为0.05mg/mL;其次是黄连、石榴皮,两者MIC均为0.20 mg/mL,MBC均为0.40 mg/mL;黄芪功效较差。20种化学抗菌类药物的抑菌试验显示,分离菌株SWZX5对供试的氨曲南、恩诺沙星、左旋氧氟沙星、头孢呋辛钠等16种抗菌药物敏感;对卡那霉素、苯唑西林等4种抗菌药物中度敏感或耐药。; 任燕石存斌常藕琴付小哲陶家发吴淑勤; 关键词：中草药

罗非鱼无乳链球菌Sip-Pgk融合蛋白乳酸菌口服疫苗制备及其免疫效果的研究被引量：2: 2019年; 为研制比无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)单个蛋白抗原免疫效果更佳的多蛋白重组罗非鱼(Oreochromis sp.)链球菌病口服疫苗,该研究利用同源重组法构建表达无乳链球菌Sip-Pgk融合蛋白的pNZ8148-sippgk质粒,通过电转化乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)NZ9000中获得L.lactis NZ9000 pNZ8148-sip-pgk重组乳酸菌,使用nisin诱导表达并进行Western blot鉴定,制备Sip-Pgk融合蛋白乳酸菌口服疫苗,通过不同免疫次数隔周免疫的方式灌胃罗非鱼。ELISA检测免疫后的血清抗体水平,在灌胃免疫结束后的第18天通过腹腔注射无乳链球菌攻毒获得相对免疫保护率。结果显示,构建的重组乳酸菌诱导表达的蛋白大小为92 kD,与目的蛋白大小一致。与2次免疫比较,3次免疫该融合蛋白乳酸菌疫苗能显著提高罗非鱼的血清抗体水平和对无乳链球菌的免疫保护效果。3次免疫Sip-Pgk融合蛋白乳酸菌疫苗的血清水平显著高于单一蛋白组和PBS组,其相对免疫保护率最高(45.56%)。; 袁玉梅石存斌陶家发张德锋孙承文巩华黄志斌赖迎迢; 关键词：罗非鱼无乳链球菌融合蛋白

大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗生产工艺条件的优化被引量：2: 2019年; 目的优化大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗的生产工艺条件。方法通过对大菱鲆鳗弧菌VAM003株培养基(TSB和LB)、培养基盐度(1. 5%、2. 0%、2. 5%、3. 0%、3. 5%NaCl)、接种量(5%、10%、15%)、发酵时间(6～12 h)进行筛选,采用最适发酵条件制备大菱鲆鳗弧菌VAM003株发酵菌液,分别加入不同终浓度的甲醛(0. 1%、0. 2%、0. 3%、0. 4%)灭活24、48、72 h,确定最适灭活条件。采用最适生产工艺制备2批大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗,并进行安全性及效力试验。结果大菱鲆鳗弧菌VAM003株最适发酵培养条件为:用含2. 5%NaCl的TSB培养基,在接种量10%条件下发酵培养10～12 h,活菌量达5×109 CFU/m L以上;最适灭活条件为:甲醛终浓度0. 2%灭活24 h。大菱鲆注射灭活疫苗后,全部健活,未出现临床症状,摄食、游姿及体色均正常,注射部位无红肿,内脏器官无病变;疫苗的免疫保护率达90%以上。结论成功优化了大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗规模化生产工艺条件,制备的灭活疫苗具有良好的安全性及效力,可用于大菱鲆鳗弧菌病的预防。; 孙承文李杰赖迎迢江小燕莫照兰黄志斌陶家发; 关键词：大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗安全性效力

重组外膜蛋白OmpK规模化高密度培养和诱导表达被引量：2: 2013年; 目的:为提高重组外膜蛋白Ompk规模化培养得率。方法:利用高密度培养,进行不同时间补料和升温诱导表达,测定不同培养方法的菌体量和蛋白诱导表达效果。结果:经5、50、500 L发酵罐多批次培养效果比较,采用培养4 h开始补料,6 h开始诱导表达培养,工程菌体和外膜蛋白得率效果最佳。在5、50、500L发酵罐菌体得率分别为17.2、14.8、26.6 g/L,均高于普通发酵培养的菌体得率(平均得率不到5 g/L);在50、500L发酵罐外膜蛋白得率分别为61.6、198.0 mg/L,均高于其它批次。结论:初步确定了重组蛋白工程菌高密度规模化诱导表达培养方法。; 陶家发赖迎迢孙承文任燕; 关键词：外膜蛋白亚单位疫苗

一株鲈塘源植物乳杆菌的分离鉴定及其对养殖水体影响研究: 2020年; 利用MRS培养基和LB培养基对广东顺德大口黑鲈养殖池塘水体样品进行了乳酸菌的分离和筛选,共获得27株乳酸菌。以引起大口黑鲈"烂身病"的嗜水气单胞菌为指示菌进行拮抗作用试验,筛选获得一株具有显著抑菌活性的乳酸菌XTL3,并对该菌株进行了生理生化试验、16Sr DNA序列分析及其对大口黑鲈池塘养殖的安全性和效果进行了研究。结果表明,菌株XTL3对嗜水气单胞菌的生长具有较好抑制作用。生理生化试验、16S r DNA序列分析表明,XTL3与植物乳杆菌的相似性为100%,初步鉴定该菌株为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)。室外养殖池塘安全性和效力检验结果表明,在使用过程中的一个月内,无异常死亡,无病害发生,池塘的溶氧变化差异不显著(P>0.05),氨氮的变化差异显著(P<0.05),实验塘的水环境保持更稳定。筛选的植物乳杆菌具有良好的抑菌和调水能力,且其生长特性适应大口黑鲈的池塘养殖环境,这为大口黑鲈疾病的生态防控及乳酸菌资源的开发利用奠定了基础。; 巩华张洪业赖迎迢孙承文刘春花陶家发焦彩虹; 关键词：植物乳杆菌大口黑鲈池塘水质

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