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孙承文: 作品数：58 被引量：77H指数：4; 供职机构：中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>; 发文基金：中国水产科学研究院基本科研业务费专项基金广东省科技计划工业攻关项目国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>

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罗非鱼无乳链球菌Sip-Pgk融合蛋白乳酸菌口服疫苗制备及其免疫效果的研究被引量：2: 2019年; 为研制比无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)单个蛋白抗原免疫效果更佳的多蛋白重组罗非鱼(Oreochromis sp.)链球菌病口服疫苗,该研究利用同源重组法构建表达无乳链球菌Sip-Pgk融合蛋白的pNZ8148-sippgk质粒,通过电转化乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)NZ9000中获得L.lactis NZ9000 pNZ8148-sip-pgk重组乳酸菌,使用nisin诱导表达并进行Western blot鉴定,制备Sip-Pgk融合蛋白乳酸菌口服疫苗,通过不同免疫次数隔周免疫的方式灌胃罗非鱼。ELISA检测免疫后的血清抗体水平,在灌胃免疫结束后的第18天通过腹腔注射无乳链球菌攻毒获得相对免疫保护率。结果显示,构建的重组乳酸菌诱导表达的蛋白大小为92 kD,与目的蛋白大小一致。与2次免疫比较,3次免疫该融合蛋白乳酸菌疫苗能显著提高罗非鱼的血清抗体水平和对无乳链球菌的免疫保护效果。3次免疫Sip-Pgk融合蛋白乳酸菌疫苗的血清水平显著高于单一蛋白组和PBS组,其相对免疫保护率最高(45.56%)。; 袁玉梅石存斌陶家发张德锋孙承文巩华黄志斌赖迎迢; 关键词：罗非鱼无乳链球菌融合蛋白

大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗生产工艺条件的优化被引量：2: 2019年; 目的优化大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗的生产工艺条件。方法通过对大菱鲆鳗弧菌VAM003株培养基(TSB和LB)、培养基盐度(1. 5%、2. 0%、2. 5%、3. 0%、3. 5%NaCl)、接种量(5%、10%、15%)、发酵时间(6～12 h)进行筛选,采用最适发酵条件制备大菱鲆鳗弧菌VAM003株发酵菌液,分别加入不同终浓度的甲醛(0. 1%、0. 2%、0. 3%、0. 4%)灭活24、48、72 h,确定最适灭活条件。采用最适生产工艺制备2批大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗,并进行安全性及效力试验。结果大菱鲆鳗弧菌VAM003株最适发酵培养条件为:用含2. 5%NaCl的TSB培养基,在接种量10%条件下发酵培养10～12 h,活菌量达5×109 CFU/m L以上;最适灭活条件为:甲醛终浓度0. 2%灭活24 h。大菱鲆注射灭活疫苗后,全部健活,未出现临床症状,摄食、游姿及体色均正常,注射部位无红肿,内脏器官无病变;疫苗的免疫保护率达90%以上。结论成功优化了大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗规模化生产工艺条件,制备的灭活疫苗具有良好的安全性及效力,可用于大菱鲆鳗弧菌病的预防。; 孙承文李杰赖迎迢江小燕莫照兰黄志斌陶家发; 关键词：大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗安全性效力

重组外膜蛋白OmpK规模化高密度培养和诱导表达被引量：2: 2013年; 目的:为提高重组外膜蛋白Ompk规模化培养得率。方法:利用高密度培养,进行不同时间补料和升温诱导表达,测定不同培养方法的菌体量和蛋白诱导表达效果。结果:经5、50、500 L发酵罐多批次培养效果比较,采用培养4 h开始补料,6 h开始诱导表达培养,工程菌体和外膜蛋白得率效果最佳。在5、50、500L发酵罐菌体得率分别为17.2、14.8、26.6 g/L,均高于普通发酵培养的菌体得率(平均得率不到5 g/L);在50、500L发酵罐外膜蛋白得率分别为61.6、198.0 mg/L,均高于其它批次。结论:初步确定了重组蛋白工程菌高密度规模化诱导表达培养方法。; 陶家发赖迎迢孙承文任燕; 关键词：外膜蛋白亚单位疫苗

一种水产养殖用中药组合物及其制备方法和应用: 本发明属于水产养殖技术领域，特别涉及一种水产养殖用中药组合物及其制备方法和应用，按照重量份计，包括：干姜3～5份，青蒿2～4份，辣椒2～3份，厚朴1～2份。本发明对养殖动物毒性小、使用方便，成本低，无毒副作用，无药物残留...; 陈总会巩华赵长臣赖迎迢孙承文江小燕刘春花; 文献传递

一株鲈塘源植物乳杆菌的分离鉴定及其对养殖水体影响研究: 2020年; 利用MRS培养基和LB培养基对广东顺德大口黑鲈养殖池塘水体样品进行了乳酸菌的分离和筛选,共获得27株乳酸菌。以引起大口黑鲈"烂身病"的嗜水气单胞菌为指示菌进行拮抗作用试验,筛选获得一株具有显著抑菌活性的乳酸菌XTL3,并对该菌株进行了生理生化试验、16Sr DNA序列分析及其对大口黑鲈池塘养殖的安全性和效果进行了研究。结果表明,菌株XTL3对嗜水气单胞菌的生长具有较好抑制作用。生理生化试验、16S r DNA序列分析表明,XTL3与植物乳杆菌的相似性为100%,初步鉴定该菌株为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)。室外养殖池塘安全性和效力检验结果表明,在使用过程中的一个月内,无异常死亡,无病害发生,池塘的溶氧变化差异不显著(P>0.05),氨氮的变化差异显著(P<0.05),实验塘的水环境保持更稳定。筛选的植物乳杆菌具有良好的抑菌和调水能力,且其生长特性适应大口黑鲈的池塘养殖环境,这为大口黑鲈疾病的生态防控及乳酸菌资源的开发利用奠定了基础。; 巩华张洪业赖迎迢孙承文刘春花陶家发焦彩虹; 关键词：植物乳杆菌大口黑鲈池塘水质

水产养殖过程中嗜水气单胞菌对喹诺酮药物的敏感性及耐药基因分析被引量：2: 2019年; 对养殖水体中的嗜水气单胞菌进行选择性分离,分析其对不同抗生素药物的敏感性。采用PCR方法对耐药株的耐药基因gyrA、qnrA和qnrS进行检测。结果表明,嗜水气单胞菌对喹诺酮药物的敏感性最强,这与喹诺酮药物的过度使用密切相关。通过对耐药性嗜水气单胞菌和敏感性嗜水气单胞菌的耐药基因扩增结果对比,发现耐药基因gyrA的检出率最高。该研究结果可为水产养殖过程中嗜水气单胞菌的耐药性检测及抗生素的合理使用提供分子生物学依据。; 陈总会赵长臣江小燕孙承文黄志斌巩华; 关键词：嗜水气单胞菌喹诺酮药物耐药基因 GYRA基因

基于响应面法的维氏气单胞菌灭活疫苗菌液发酵工艺优化及免疫效力比较被引量：2: 2021年; 为优化维氏气单胞菌Aeromonas veronii灭活疫苗菌液发酵工艺,通过单因素试验确定温度、培养基初始pH、转速、接种量对菌液活菌数的影响,应用响应面法的Box-Behnken进行优化,对不同发酵条件下发酵菌液制备灭活疫苗的安全性及免疫效力进行了比较。结果表明:当最优发酵条件为温度28℃、培养基初始pH 7.5、摇床转速230 r/min、接种量5%时,维氏气单胞菌CA07株发酵获得最大的活菌数为11.13×10^(9) CFU/mL,较单因素试验确定的最高活菌数值提高20.59%,与预测值基本相符;优化发酵条件能提升发酵菌液活菌数,从而显著提高制备的灭活疫苗的相对免疫保护率,即使制备的灭活疫苗稀释3倍,免疫鲫鱼Carassius auratus的相对保护率仍可达到70%以上,以维氏气单胞菌LY02株攻毒,相对免疫保护率达40%以上。研究表明,通过响应面法优化维氏气单胞菌灭活疫苗发酵工艺,在显著增加菌液产量的同时可提高疫苗的免疫效力。; 孙承文赖迎迢巩华巩华江小燕任燕黄志斌江小燕; 关键词：维氏气单胞菌发酵工艺条件免疫效力

一种用于防治水产养殖水霉病的组合物及其制备方法: 本发明提出了一种用于防治水产养殖水霉病的组合物，包括如下质量百分含量的组分：20～30％的苦参粉末，10～20％的五倍子粉末，10～30％的水杨酸，30～50％的硼酸，此外，本发明还提出了其制备方法。本发明提出的技术方案...; 巩华陈总会孙承文陶家发林明辉罗霞黄志斌; 文献传递

一种生物絮团培养基: 本发明涉及一种生物絮团培养基，由大豆蜜糖、蔗糖糖蜜、芡粉、麦麸粉、乳酸菌、磷酸二氢钾和磷酸二氢钙组成。在合适的总碱度、硬度条件下，使用本发明的生物絮团培养基可以在水体中培育出氨化细菌、亚硝化细菌、硝化细菌及反硝化细菌等有...; 陈总会孙承文赵长臣江小燕刘志军陶家发赖迎迢巩华黄志斌何有根; 文献传递

鲢鳙鱼源致病性嗜水气单胞菌的分离、鉴定被引量：13: 2010年; 从江西省南城县和广东省佛山市、韶关市患细菌性败血症病鲢鱼、鳙鱼体内分离到3株优势菌,人工感染鲢后证实为该病的病原菌,此3株菌对剑尾鱼的半致死量(LD50)分别为:2.64×105、9.24×104、4.45×105CFU/g。对3株病原菌进行形态特征、ATB细菌鉴定仪生理生化特性鉴定结果符合嗜水气单胞菌的特征;为进一步确定病原菌分类地位,对其16SrRNA序列扩增测序,并与相关细菌16SrRNA序列比对,构建系统发育树,在系统发育树中与嗜水气单胞菌聚类为一支。Aero气溶素基因PCR扩增出209bp条带,检测结果进一步表明此3株菌为含有毒力基因的致病性嗜水气单胞菌。; 孙承文任燕石存斌潘厚军吴淑勤; 关键词：细菌性败血症嗜水气单胞菌

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