郭忠健
- 作品数：5 被引量：39H指数：3
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- hFXYD6真核表达载体构建及对人肝癌细胞系SMMC7721细胞的生物学作用的影响被引量：2
- 2017年
- 目的构建人肿瘤相关蛋白FXYD6真核表达载体pc DNA3.1-h FXYD6,研究其对人肝癌细胞系SMMC7721细胞增殖与侵袭的影响。方法扩增h FXYD6 c DNA,将其插入克隆质粒载体p MD18 T Simple,将限制性内切酶酶切后的目的片段插入以限制性内切酶切后的表达质粒载体pc DNATM 3.1/myc-His(-)B中,经聚合酶链反应(PCR)电泳和测序证实后转染至人肝癌细胞系SMMC7721细胞中,同时设pc DNA3.1空载体转染组和pc DNA3.1-h FXYD6载体转染组,比较两组细胞的增殖与侵袭情况。结果成功构建了pc DNA3.1-h FXYD6真核表达载体。转染真核质粒pc DNA3.1-h FXYD6的SMMC7721细胞,经培养48 h,电泳图显示用h FXYD6单克隆抗体识别的特异性蛋白条带。pc DNA3.1-h FXYD6表达载体组细胞较pc DNA3.1空载体转染组细胞增殖速度明显增快。pc DNA3.1空载体转染组、pc DNA3.1-h FXYD6表达载体组细胞穿透Boyden趋化小室滤膜的细胞数分别为(109.9±7.8)个、(167.6±9.3)个,两组差异有显著统计学意义(P<0.001)。结论成功构建的pc DNA3.1-h FXYD6真核质粒能在肝癌细胞系SMMC7721细胞中表达目的蛋白,h FXYD6可促进肝癌细胞增殖与侵袭,这为研究h FXYD6的具体作用机制奠定了基础。
- 陈雄飞张执全袁俊建郭忠健郭尧李凤山刘汝海
- 关键词：真核表达载体转染SMMC7721细胞生物学效应
- 顺铂和铜绿假单胞菌注射液联合腹腔循环热灌注治疗兔胃癌伴幽门梗阻被引量：3
- 2017年
- 目的建立兔VX-2胃癌伴幽门梗阻模型，探讨顺铂（DDP）和铜绿假单胞菌注射液（PA-MSHA）联合腹腔循环热灌注对胃癌伴幽门梗阻兔模型的治疗效果及安全性。
方法通过注射VX-2肿瘤细胞悬液建立兔胃癌伴幽门梗阻模型，将42只兔模型随机分为对照组和治疗组。所有兔模型治疗前行血常规、肝肾功能、电解质检测，对照组兔21只，给予直接胃癌切除手术；治疗组兔21只，给予术前DDP和PA-MSHA联合腹腔循环热灌注后再行手术。记录联合腹腔循环热灌注化疗治疗后兔模型生存情况，所有兔死亡当天予以剖腹及开胸，观察胃窦部原发癌灶大小和幽门梗阻程度等，分别于治疗前开腹探查时、死亡当天取原发病灶及转移病灶标本，行苏木素-伊红（HE）染色，在光学显微镜下观察。兔死亡后取胃原位癌灶及转移癌灶。免疫组织化学检测血管内皮生长因子（VEGF）和增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平。结果实验组和对照组胃癌根治性切除率分别为85.5%（18/21）和66.7%（14/21），实验组显著高于对照组，差异有统计学意义（P=0.025）。实验组与对照组在术中出血量、手术时间及术后发生吻合口瘘或十二指肠瘘、大出血、应激性溃疡出血和肠梗阻差异无统计学意义（P=0.253）。而治疗组在术后发生腹腔感染、肺部感染及胃瘫较对照组明显降低（P=0.019）。对照组死亡标本解剖见典型胃癌转移瘤特征，与对照组比较，实验组腹腔转移程度较轻，出现肝转移较少，转移结节较小。对照组实验性腹膜转移癌指数（ePCI）评分为（18.00±1.55）分，实验组ePCI评分为（12.00±1.79）分，两组间差异有统计学意义（P=0.013）。对照组腹腔内粘连评分为（3.67±0.52）分，实验组腹腔内粘连评分为（1.17±0.75）分，两组间腹腔内粘连评分比较差异有统计学意义（P=0.016）。对照组VEGF相对表达�
- 李建业梁真张斌崔季钊郭忠健刘汝海刘科霞杨胜燕
- 关键词：顺铂铜绿假单胞菌注射液胃癌幽门梗阻
- 西黄胶囊辅助化疗治疗结肠癌术后肝转移疗效及对患者外周血IL-17和IL-6的影响被引量：32
- 2015年
- 目的探讨Xelox方案联合西黄胶囊辅助治疗结肠癌术后肝转移的疗效及对患者外周血IL-17与IL-6水平的影响。方法结肠癌肝转移术后患者共120例,随机分为两组,每组各60例;对照组给予Xelox方案治疗,试验组在对照组的基础上联合使用西黄胶囊辅助治疗,观察疗效,并检测患者治疗后不良反应和血清肿瘤标志物水平;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测两组患者血清中IL-6和IL-17水平,并以20例正常人为正常对照组。结果对照组和试验组结肠癌肝转移术后患者近期治疗有效率分别为35.59%和56.67%,试验组的有效率明显高于对照组(P<0.05)。试验组患者血清肿瘤标志物水平及部分不良反应低于对照组(P<0.05)。试验组和对照组患者血清IL-17和IL-6水平均高于正常对照组(P<0.05),试验组及对照组治疗后IL-17和IL-6水平均降低,但试验组较对照组降低更明显(P<0.05)。结论西黄胶囊辅助化疗治疗结肠癌的疗效肯定,不仅在近期治疗有效率方面有明显的优越性,并可以降低化疗药的部分毒副反应及患者血清肿瘤标志物水平,还可以降低患者外周血IL-17和IL-6水平,有效调节机体免疫功能。
- 张晓玲邢荣格苗志刚郭忠健韩国达
- 关键词：西黄胶囊结肠癌肝转移
- 浅谈石蜡组织切片的标准化操作规程被引量：1
- 2013年
- 石蜡组织切片的质量直接影响染色的效果,而制定和实施石蜡组织切片的标准化操作规程（SOP）可确保切片操作过程准确无误,使切片质量提高[1]。我科结合工作实际并参照相关标准制定了石蜡组织切片的SOP,并应用于实际工作中，颇有成效，现介绍如下。
- 郭效忠苗志刚刘春荣郭忠健
- 关键词：石蜡组织切片
- 抗人FXYD6特异性多肽单克隆功能性抗体制备及生物学作用鉴定被引量：3
- 2018年
- 目的研制抗人转运调节因子(FXYD)6功能区单克隆抗体库,筛选分泌胞内、胞外区单克隆抗体的杂交瘤细胞株并对鉴定胞外区单克隆抗体生物学作用。方法原核表达并纯化去除跨膜区域FXYD6功能区重组蛋白,FXYD6重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫后的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,多次筛选及克隆化,建立稳定分泌抗人FXYD6胞外区或胞内区的单克隆抗体杂交瘤。分别应用间接酶联免疫吸附法(ELISA)、Western blot和免疫组织化学法鉴定抗体特异性及亚型,细胞流式技术筛选可识别天然构象的胞外区单克隆抗体,用腹水诱导法对胞外区单抗进行制备、纯化并检测亲和常数,高表达FXYD6的HepG2细胞系检测胞外区单抗的功能。结果成功获得分泌抗人FXYD6胞外区或胞内区单克隆抗体的杂交瘤细胞库,制备出具有功能阻断性的胞外区单抗。结论制备的抗人FXYD6胞外区单抗可抑制HepG2细胞的增殖。
- 陈雄飞袁俊建张执全郭忠健郭尧刘汝海李凤山
- 关键词：生物学鉴定
