郜赵伟
- 作品数：6 被引量：43H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划重庆市科委基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 葡萄糖氧化酶基因密码子优化及其在毕赤酵母中的高效表达
- 葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，简称GOD)广泛存在于微生物中，能够将葡萄糖氧化生成葡萄糖醛酸，广泛应用于食品，化工，医药等领域。实验室前期研究中从点青霉(Penicillium notatum)中成功克隆...
- 郜赵伟
- 关键词：葡萄糖氧化酶密码子优化毕赤酵母基因表达
- 文献传递
- 南方鲶肝超氧化物歧化酶的分离纯化及部分性质研究被引量：3
- 2009年
- 经热变性,丙酮分级沉淀,DEAE-琼脂糖离子交换层析和Superdex-200凝胶层析,从南方鲶肝中分离纯化获得超氧化物岐化酶.该酶的比活为806.84U/mg,提纯倍数为336.18,分子量为46.0kD,亚基分子量为15.2kD.该酶在20～60℃温度范围内稳定性较好,在pH4～8范围内活性稳定,对H2O2敏感,对KCN不敏感.Mg2+,Fe2+离子对该酶有激活作用,Zn2+,Pb2+,Ca2+,Cd+离子对该酶有抑制作用.
- 郜赵伟王松付伟丽唐靓婷朱鸿唐云明
- 关键词：超氧化物歧化酶分离纯化
- 重组葡萄糖氧化酶毕赤酵母高产菌株的高通量快速筛选方法被引量：1
- 2012年
- 为了建立一种高通量快速筛选重组葡萄糖氧化酶(GOD)毕赤酵母高产菌株的方法,转god基因毕赤酵母重组子在MM平板上培养,经甲醇诱导培养2天后在平板上覆盖显色液,室温显色30min,测定棕色圈直径并计算面积,然后评估棕色圈面积与GOD活力的相关性。室温显色30min后,当样品的GOD活力大于0.0005U时,平板上可观察到明显的棕色圈;经过与传统液体培养筛选方法的比较验证,该平板筛选方法灵敏度高,稳定性和重复性好,筛选结果与传统方法一致;并且当毕赤酵母重组子表达的GOD活力介于0～0.1U/mL的范围内时,显色圈的绝对面积与GOD活力相关系数可达0.63。本研究成功地建立了一种转葡萄糖氧化酶基因毕赤酵母重组菌株的高通量快速筛选方法。
- 周利伟郜赵伟张宇宏张伟
- 关键词：葡萄糖氧化酶高通量筛选毕赤酵母
- 甘薯叶过氧化物酶的分离纯化及其部分性质研究被引量：16
- 2010年
- 经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析,从甘薯叶中得到过氧化物酶(POD)电泳纯制品。该酶比活力为91923.14U/mg,纯化倍数为255.69,回收率为1.59%。该酶分子量约为35kD,最适pH值为5.6,最适温度为60℃。该酶在20～50℃、pH4～8内稳定。以不同浓度H2O2为底物在pH7.2和25℃下测得该酶Km值为0.291mol/L。低浓度草酸、尿素、Li+、Na+、K+、Mg2+等对该酶有激活作用;SDS、KSCN、抗坏血酸(AsA)、Mn2+等对该酶有抑制作用;甲醇、乙醇、乙二醇、异丙醇对POD均有一定抑制作用,其抑制作用强弱顺序为异丙醇>乙醇>甲醇>乙二醇。实验表明,该酶稳定性较强。
- 付伟丽唐靓婷王松朱鸿郜赵伟唐云明
- 关键词：甘薯叶过氧化物酶分离纯化
- 芦荟过氧化氢酶的分离纯化和性质研究被引量：9
- 2010年
- 目的:获得库拉索芦荟过氧化氢酶纯品并对其性质进行研究。方法:采用硫酸铵分级沉淀,DEAE-Sepharose阴离子交换层析,CM-Sepharose阳离子交换层析和SephacrylS-200凝胶层析对酶蛋白进行分离纯化,采用SDS-PAGE鉴定酶的纯度、分子质量。结果:从芦荟中分离纯化获得电泳纯的过氧化氢酶,纯化倍数为228.05倍,酶活力回收率为14.10%,比活力达17427.30U/mg。该酶的分子质量为239.90kD,亚基分子质量为60.60kD。推测该酶由4个相同亚基构成。该酶最适温度为45℃,最适pH值为7.5,以过氧化氢为底物测定该酶的表观Km为34mmol/L。结论:成功分离纯化获得过氧化氢酶,该酶具有良好的热稳定性和酸碱耐受性。
- 朱鸿李想韵邓玉王松付伟丽唐靓婷郜赵伟唐云明
- 关键词：芦荟过氧化氢酶分离纯化
- 微生物酶分子改造研究进展被引量：9
- 2010年
- 近年来,越来越多的酶蛋白已经采用重组微生物反应器进行高效生产。为了改善酶蛋白的催化性能,提高其环境适应性,同时提高酶蛋白的表达量,降低生产成本,各种针对酶蛋白分子改造的基因工程技术已经得到大量的应用。综述了用于酶分子改造和进化的主要分子生物学方法,如定点突变、易错PCR、基因改组、密码子优化等技术及其应用成就。
- 郜赵伟张宇宏张伟
- 关键词：酶制剂分子改造定向进化基因工程
