邱贤秀
- 作品数:7 被引量:6H指数:2
- 供职机构:暨南大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人Aurora B基因的克隆、原核表达及生物信息学分析
- 目的:克隆出人Aurora B基因,并将其于大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中表达,获得重组蛋白。方法:利用TRIzol Reagent法提取食管癌ECa 109细胞总RNA,RT-PCR后以其cDNA为模板PCR扩...
- 邱贤秀周莹王雪琦丁伟超刘忠王绍祥王一飞
- 关键词:细胞周期克隆原核表达生物信息学
- 文献传递
- GRP78在食管癌细胞ECA-109增殖过程中的功能研究被引量:2
- 2013年
- 食管癌在中国是高发性肿瘤,并具有较高的致死率。肿瘤细胞的持续增殖与细胞增殖失调密切相关。肿瘤细胞在增殖过程中需要合成大量蛋白质,葡萄糖调节蛋白78(glucose regulatedprotein,GRP78)作为分子伴侣,在蛋白质的折叠、组装、修饰和错误折叠蛋白的降解过程中发挥着重要作用。该研究通过构建pGRP78-EGFP-N1重组质粒,瞬时转染ECA-109细胞,研究GRP78过表达对细胞增殖能力的影响;采用RNA干扰技术,瞬时转染靶向GRP78的siRNA,研究敲低GRP78对细胞增殖能力的影响。该研究发现GRP78过表达后,更多的细胞从G1期进入S期和G2/M期,细胞增殖速率加快,细胞克隆形成率亦明显提高;敲低GRP78后,细胞更多地被阻滞在G1期而无法进入S期和G2/M期,细胞增殖速率减慢,细胞克隆形成率降低。GRP78可能通过调节细胞周期而促进ECA-109细胞的增殖。
- 丁伟超马岩岩邱贤秀王绍祥王莹任哲
- 关键词:GRP78过表达增殖ECA-109细胞
- GRP78在食管癌细胞ECA-109增殖过程中的功能研究
- 食管癌在中国是高发性肿瘤,并具有较高的致死率。肿瘤细胞的持续增殖与细胞增殖失调密切相关。肿瘤细胞在增殖过程中需要合成大量蛋白质,葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein,GRP78)作为分子...
- 丁伟超马岩岩邱贤秀王绍祥王莹任哲
- 关键词:GRP78过表达增殖ECA-109细胞
- 文献传递
- SNX-2112诱导食管鳞癌细胞周期阻滞及凋亡的作用机制研究
- 目的:检测SNX-2112对食管鳞癌细胞的体外抑制活性,阐明SNX-2112诱导细胞周期阻滞的分子机制及信号调节通路;流式细胞术分选出食管鳞癌细胞中的肿瘤干细胞,检测SNX-2112对其的生长增殖抑制活性及细胞周期和凋亡...
- 邱贤秀
- 关键词:HSP90抑制剂食管鳞癌细胞周期凋亡肿瘤干细胞
- 文献传递
- 人Hsp90α基因克隆、中试发酵及生物信息学分析被引量:3
- 2011年
- 目的:克隆获得人热休克蛋白90α(Hsp90α)基因,构建其原核表达载体,分离纯化重组蛋白,为Hsp90抑制剂的体外筛选奠定基础。方法:TRIzol Reagent法提取K562细胞总RNA,通过RT-PCR获得Hsp90α-cDNA。以该cDNA为模板PCR扩增Hsp90α基因,目的基因和质粒pET28a(+)经NcoⅠ和XhoⅠ双酶切后,连接酶切片段,将重组DNA转化DH5α,酶切及测序鉴定重组体。将构建好的重组质粒转化Rosetta(DE3)菌株,IPTG诱导,经条件优化后进行中试发酵、纯化以及Western blot鉴定。结果:原核表达载体pET28a(+)-Hsp90α成功构建,可在Rosetta(DE3)中正确表达,中试发酵收菌574g且表达产物以可溶性形式存在,纯化产物纯度为97%。结论:利用分子克隆技术建立了Hsp90α基因的原核表达和中试发酵的条件,为更深入地研究其在抗肿瘤治疗中的作用打下基础。
- 刘凯胜邱贤秀王一飞
- 关键词:HSP90Α克隆原核表达生物信息学
- 甲型流感病毒H1N1亚型HA基因的克隆及序列分析
- 2013年
- 目的克隆甲型流感病毒H1N1亚型血凝素HA基因,并对其进行序列分析。方法利用TRIzol Rea-gent法提取甲型流感病毒H1N1亚型的总RNA,RT-PCR后以其cDNA为模板PCR扩增HA基因,经酶切、连接后,构建pET 28a(+)-HA重组质粒。利用生物信息学工具对HA的核酸序列和蛋白功能结构进行分析。结果成功构建了pET 28a(+)-HA重组质粒,经序列比对,与GenBank上公布的HA基因序列同源性达到99%。结论对HA基因进行克隆及生物信息学的分析,为深入研究HA在病毒侵入细胞及抗原变异中的作用机制及后续HA抑制剂的体外筛选奠定基础。
- 钟媚共邱贤秀向阳飞吴崇超王一飞
- 关键词:流感病毒H1N1亚型血凝素
- 人Aurora B基因的克隆、原核表达及生物信息学分析被引量:1
- 2012年
- 目的:克隆出人Aurora B基因,并将其于大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中表达,获得重组蛋白。方法:利用TRIzol Reagent法提取食管癌ECa 109细胞总RNA,RT-PCR后以其cDNA为模板PCR扩增Aurora B基因,构建pET 28a(+)-Aurora B重组质粒,将其转化Rosetta(DE3)菌株,IPTG体外诱导表达重组蛋白。利用生物信息学工具对Aurora B的核酸序列和蛋白功能结构进行分析。结果:成功构建了pET 28a(+)-Aurora B重组质粒,经序列比对,与GenBank上公布的人Aurora B基因序列同源性达到了99%;获得Aurora B蛋白,大小约39kDa,蛋白表达量约占菌体总蛋白的28%。结论:对人Aurora B基因进行克隆、原核表达及生物信息学分析,为深入研究Aurora B在细胞周期调控中的作用机制及后续Aurora B抑制剂的体外筛选奠定基础。
- 邱贤秀周莹王雪琦丁伟超刘忠王绍祥王一飞
- 关键词:克隆原核表达生物信息学