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邓丽瑜
作品数:
2
被引量:5
H指数:2
供职机构:
深圳大学生命科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室
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发文基金:
深圳市科技计划项目
深圳市基础研究计划项目
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相关领域:
农业科学
生物学
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合作作者
刘刚
深圳大学生命科学学院深圳市微生...
余少文
深圳大学生命科学学院深圳市微生...
张煜
深圳大学生命科学学院深圳市微生...
邢苗
深圳大学生命科学学院深圳市微生...
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深圳大学生命科学学院深圳市微生...
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食品研究与开...
年份
1篇
2015
共
2
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CBHⅡ和EGⅣ的重构基因在里氏木霉中的组成型表达
被引量:2
2015年
重构基因cbh2-linker-CDeg4表达的融合蛋白同时获得具有外切葡聚糖酶CBH II和内切葡聚糖酶EG IV 2种催化活性,在纤维素降解等方面有着重要应用。本研究通过overlap PCR将里氏木霉丙酮酸脱羧酶(PDC)的启动子、纤维二糖水解酶cbh1的信号肽、重构基因cbh2-linker-CDeg4和pdc终止子依次连接,以质粒p PICZαA为基本骨架,构建表达载体p PIC-PCT。采用原生质体转化法将p PIC-PCT和含潮霉素抗性筛选标记的质粒p AN7-1共转里氏木霉。SDS-PAGE分析表明,重构基因cbh2-linker-CDeg4实现了在里氏木霉中的组成型表达,测得重组木霉发酵上清液的CMCNa酶活最高达到4.08 U/m L,是出发菌株的5.55倍,FPA酶活达到0.915 U/m L,较出发菌株提高了43.6%。酶学性质初步研究表明:粗酶液的最适p H为5.0,最适温度为50℃。
曾敏
邓丽瑜
汤新
刘刚
余少文
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