赵雅静
- 作品数：25 被引量：37H指数：3
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 风疹病毒松叶株全基因序列测定与分析
- 2012年
- 目的对我国现用风疹病毒(Rubella virus,RV)疫苗生产毒株松叶株(Matsuba)进行全基因组测序,分析其在减毒过程中的遗传与变异特点,为其安全性评价及遗传学质量控制的标准化提供依据。方法利用RT-PCR法分段扩增我国现用Matsuba疫苗株主代种子基因组全序列,分别将产物插入到T-A克隆载体pGEM-T easy中,构建病毒cDNA文库,进行全基因组序列测定与分析。结果我国现用Matsuba疫苗株主代种子基因组全长9 762 nt,含2个ORF,分别位于核苷酸41～6388位和6512～9700位,编码2 116、1 062个氨基酸;与GenBank中登录的Matsuba.GMK3野毒株和Matsuba疫苗株核苷酸同源性分别为97.5%和99.9%,氨基酸同源性分别为98.8%和99.9%;其在减毒的过程中共有37个氨基酸位点发生变异,其中非结构蛋白P150有18个氨基酸位点发生突变,结构蛋白E1和E2主要抗原位点氨基酸未发生变异,E1-177位糖基化位点突变丢失。结论我国现用风疹病毒Matsuba疫苗株与同类减毒株具有较高的同源性,其主要的抗原位点在减毒保种过程中高度保守,为在分子水平上保证Matsuba株毒种及其生产疫苗的安全性提供了依据。
- 刘晨鸣冯德杰赵雅静魏然魏至栋高雪军朱莉萍
- 关键词：风疹病毒基因组
- 流行性乙型脑炎病毒减毒株SA14-14-2E基因稳定性研究被引量：3
- 2006年
- 为研究乙脑病毒减毒株SA14-14-2 E蛋白基因稳定性,将乙脑病毒减毒株SA14-14-2在原代地鼠肾细胞(PHK)上传至18代,应用RT-PCR分别扩增PHK6代、PHK7代、PHK8代、PHK13代、PHK18代E蛋白基因并测序后,与Genebank中乙脑病毒减毒株SA14-14-2(D90195)进行比较分析。PHK6、PHK7、PHK8代病毒与D90195 E蛋白核苷酸和氨基酸序列完全相同。PHK13、PHK18代病毒与D90195E蛋白核苷酸序列同源性分别为99.8%、99.7%,与D90195E蛋白氨基酸序列同源性分别为99.6%、99.4%。各代次病毒E蛋白与减毒相关氨基酸未发生改变,同时所有突变的氨基酸均非SA14原有的,故不是恢复性突变。结果表明乙脑病毒减毒株SA14-14-2的遗传学特性稳定,从分子水平证明乙脑病毒减毒株SA14-14-2及其生产的疫苗具有安全性。
- 高雪军赵雅静刘晨鸣邹勇魏然郑学刚朱莉萍
- 关键词：E基因RT-PCR
- 麻疹病毒S191疫苗株N基因稳定性研究及免疫细胞表位分析被引量：3
- 2008年
- 研究麻疹病毒（Measles virus，MeV）疫苗株S191毒种和传代病毒核蛋白（Nucleoprotein，N）基因稳定性及其遗传与变异特点；对该序列一些重要位点的氨基酸进行比较，探讨其功能结构及生物学活性变化以及S191疫苗株的保护效果。利用RT-PCR方法扩增S191减毒株23、26、27、29、32、37不同代次N基因，测序进行比对分析。S191传代病毒N基因序列之间核苷酸同源性99．7％-100％，氨基酸同源性为99．6％-100％；S191株与7个疫苗株之间核苷酸序列同源性达99．1％-99．4％；S191和中国流行代表株序列同源性在95．0％～95．4％；S191与世界流行代表株同源性达94．7％-99．4％；S191疫苗株和中国流行代表株CHN93／7（Hla）的4个重要T细胞表位氨基酸保持一致。S191各传代病毒基因具有较高稳定性，该疫苗有一定的保护作用。
- 冯德杰高雪军赵雅静刘晨鸣魏至栋朱莉萍
- 关键词：麻疹病毒N基因免疫效果
- 兔抗仓鼠IgG酶结合物的制备
- 1997年
- 兔抗仓鼠ＩｇＧ酶结合物的制备赵雅静魏天文宁磊吴晓梅（卫生部兰州生物制品研究所７３００４６）张永兴景志忠（中国农业科学院兰州兽医研究所）仓鼠作为一种实验动物，已大量用于狂犬病疫苗、乙型脑炎疫苗的生产和其他科学实验，为提高生物制品的品质，在生产中必须定期...
- 赵雅静魏天文宁磊吴晓梅张永兴景志忠
- 关键词：免疫球蛋白G酶结合物
- 小鼠PVM血清抗体I-ELISA检测法的建立及其应用被引量：1
- 2000年
- 对实验小鼠感染小鼠肺炎病毒(PVM)用间接酶联免疫吸附试验(IELISA)进行检测,其敏感性、特异性、重复性和稳定性均达到满意效果。结果显示,用PVM接种BHK21细胞经初、高、超差速离心浓缩制备的抗原,与仙台病毒(Sendai)、小鼠肝炎病毒(MHV)和呼肠孤病毒3型(Reo3)的免疫小鼠血清抗体不产生交叉反应,阻断抑制率大于50%;IELISA与HI对50份小鼠血清检测比较,其阳性检出率分别为30%和20%;将制备的检测抗原在-20℃保存6个月效价稳定。IELISA操作简便,适用于大批样品的检测。
- 赵雅静宁磊李建平张永兴
- 关键词：实验动物PVM
- 麻疹病毒F基因测序及其进化关系的初步分析被引量：3
- 2010年
- 研究麻疹病毒疫苗株S191毒种及其传代的病毒溶血素F(Haemolysin,HL)基因稳定性;对该序列一些重要位点的氨基酸进行比较,推测其功能结构及生物学活性变化;同时对该基因与M蛋白基因之间的非编码序列进行比对分析。利用RT-PCR方法扩增S191减毒株MeV23、26、27代及一株流行株YunnanLC-10的F基因,测序后进行比对分析。S191传代病毒F基因序列之间核苷酸同源性为99.8%,氨基酸同源性为99.5%～99.6%;S191疫苗株与流行株之间核苷酸序列同源性达95.2%;疫苗株与流行株1003nt的非编码区序列同源性为85.0%。S191传代病毒F基因具有较高遗传稳定性,关键功能位点氨基酸未发生传代改变;1003nt非编码区序列变异速度较快。
- 冯德杰刘晨鸣赵雅静魏然高雪军朱莉萍
- 关键词：麻疹病毒F基因RT-PCR
- 风疹病毒松叶株E2基因的遗传特征
- 2008年
- 目的研究风疹疫苗病毒松叶株(Matsuba)传代病毒E2基因的遗传特征及其基因稳定性。方法将Matsuba株毒种RV14在原代兔肾细胞上连续传代至第23代,取第14、16、17、18和23代病毒,利用RT-PCR方法扩增其E2蛋白基因,并与pUC18质粒连接后测序,对各代病毒及参考株的E2基因序列进行比对分析。结果Matsuba株E2基因全长846bp,传至23代时仍有很高的同源性,第14、16、17、18和23代与一致序列的核苷酸同源性分别为100%、100%、99.8%、99.8%和99.6%,氨基酸同源性分别为100%、100%、100%、99.3%和99.2%。Matsuba株E2基因与参考株核苷酸序列同源性为91.0～98.7%。Matsuba株各代病毒核苷酸、氨基酸序列高度保守,各关键功能区未发生变异。结论风疹病毒Matsuba疫苗株E2基因遗传特性稳定,为在分子水平保证Matsuba株毒种及其生产疫苗的安全性提供了依据。
- 高雪军可美毓刘晨鸣赵雅静魏至栋朱莉萍
- 关键词：风疹病毒E2基因
- 轮状病毒LLR疫苗株VP7基因的遗传变异研究被引量：6
- 2008年
- 目的研究轮状病毒(RV)LLR疫苗株VP7基因的遗传特征,为疫苗的质量控制和发展提供依据。方法将LLR株轮状病毒毒种LLR38在原代牛肾细胞上连续传至49代。提取第38、43、44、49代病毒RNA。通过RT-PCR扩增VP7基因片段,将其克隆入质粒pGEM-T中,进行序列测定与分析。结果LLR株VP7基因全长1062bp,含编码326个氨基酸的单一的开放读码框架(ORF)。各代次病毒的VP7基因核苷酸与推导的氨基酸变化完全一致,与GenBanK中LLR参考株(L11602)同源性分别为99.9%和99.7%。与14株G10血清型RV毒株之间,核苷酸与推导的氨基酸序列同源性分别为84.3%～87.4%和92.7%～94.9%;与不同血清型RV代表株间,VP7基因核苷酸与推导的氨基酸同源性分别为62.2%～76.8%和72.9%～83.1%;在A、B、C3个重要抗原表位,LLR株与同一血清型RV代表株B223氨基酸同源性高达97.5%,而与不同血清型仅为42.5%～62.5%。结论轮状病毒LLR疫苗株VP7基因具有良好的遗传稳定性,与来自不同国家同一型别的RV株VP7蛋白氨基酸序列之间无明显差异,在遗传上密切相关,从VP7基因分子水平证明LLR株毒种及其制备的疫苗是安全可靠的。
- 赵雅静高雪军刘晨鸣魏至栋冯德杰朱莉萍
- 关键词：轮状病毒VP7基因
- 轮状病毒的LLR疫苗株全基因组克隆及结构蛋白VP6基因遗传特征被引量：2
- 2015年
- 目的 了解轮状病毒（RV）的LLR疫苗株全基因组基因和蛋白特征、完善关键基因遗传稳定性研究,为疫苗的质量控制和研发提供依据.方法 将LLR株毒种第38代在原代牛肾细胞上连续传至49代,提取第38、43、44、49代病毒RNA.通过RT-PCR方法扩增LLR株（38代）全基因组11个dsRNA片段和传代病毒VP6基因,分别将其克隆到pGEM-T载体中,进行序列测定与分析.结果 LLR株全基因组11条RNA,由18 498个核苷酸组成,共编码5 796个氨基酸;全基因组研究表明,所克隆的LLR株属于G10P[15]/NSP4[A]/SG Ⅰ基因型.LLR株VP6基因全长1 356 bp,含编码397个氨基酸的单一的开放读码框架（ORF）.各代次病毒的VP6基因核苷酸与推导的氨基酸变化完全一致,与GenBank中LLR参考株（L11595）同源性分别为99.9％和99.7％.与16株SG Ⅰ亚群RV代表株之间,核苷酸与推导的氨基酸序列同源性分别为84.0％ ～ 99.7％和97.0％ ～ 99.2％;与不同亚群RV代表株之间,VP6基因核苷酸与推导的氨基酸同源性分别为77.7％ ～ 82.2％和92.2％ ～93.5％;LLR株各代病毒VP6基因核苷酸、氨基酸序列高度保守,各关键功能区未发生变异.结论 LLR疫苗株关键基因遗传特性稳定,为在分子水平保证LLR株毒种及其生产疫苗的安全性提供了依据;其全基因组克隆,为进一步研究RV生物学、免疫学和确定该病毒的分类学地位提供了科学依据.
- 赵雅静魏然冯德杰刘晨鸣魏至栋高雪军朱莉萍
- 关键词：轮状病毒VP6基因
- 空泡毒素对小鼠胃损伤的组织病理学研究被引量：1
- 2001年
- 目的 :了解幽门螺杆菌 (Hp)分泌的空泡毒素 (VacA)对活体鼠胃的致病性。方法 :采用活性和灭活的HpVacA直接灌喂无特定病原菌 (SPF)级小鼠 (B/C ,NIH ,KM) ,分 14d、3 9d、69d和 10 5d进行胃组织病理学检查。结果 :活性VacA可致小鼠胃损伤 ,其中以B/C胃病变最严重。主要表现为胃组织的变性、坏死和胃壁细胞的空泡化 ,而灭活的VacA则无明显此类作用。结论 :活性VacA可能是Hp致小鼠胃损伤的重要毒性因子 ,其对机体的作用与个体品系背景有关 ,在B/C、KM和NIH 3种鼠中 ,以B/C最敏感。
- 王保宁宁磊赵雅静陈翠萍刘德培
- 关键词：毒素类小鼠
