谢丽倩 作品数:25 被引量:27 H指数:3 供职机构: 苏州大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省基础研究计划 江苏省“135”重点学科科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
抗人血管性血友病因子前导肽单克隆抗体SZ175及其应用 本发明公开了抗人血管性血友病因子前导肽单克隆抗体SZ175及其应用,所述单克隆抗体SZ175属于IgG1亚类抗体,由杂交瘤细胞株SZ175(2B10)产生;其中,杂交瘤细胞株SZ175(2B10)的保藏编号为CCTCC ... 马珍妮 殷杰 凌婧 苏健 谢丽倩 张婷婷 阮长耿2B/2M型VWD的A1区突变联合血小板膜糖蛋白GPⅠbα影响ADAMTS13水解VWF的功能研究 目的:血浆中,血管性血友病因子(VWF)多聚体分子大小由金属蛋白酶ADAMTS13特异性调节.血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰα重组片段结合VWF的A1区后可以增强ADAMTS13水解VWF的能力.而2B型和2M型血管性血友病(... 马珍妮 苏健 白霞 沈飞 谢丽倩 阮长耿血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS13)单克隆抗体的鉴定以及生物学功能的研究 被引量:3 2016年 目的:构建并鉴定血管血友病因子裂解酶(ADAMTS13)单克隆抗体,并研究其生物学功能。方法:利用真核表达的重组血浆金属蛋白酶ADAMTS13截断型蛋白(ADAMTS13-T7)纯品免疫BALB/c小鼠,经标准单克隆抗体技术制备单克隆抗体。用ELISA方法鉴定单克隆抗体的特异性;应用免疫印迹技术确定单克隆抗体与全长ADAMTS13的识别能力;观察单克隆抗体对ADAMTS13水解v WF的影响。结果:最终获得6株抗ADAMTS13的单克隆抗体,克隆号分别为1G11、2F11、6G3、9E1、10A8、10B4。经ELISA鉴定,纯化后的单克隆抗体1G11和2F11的效价最高,与截断型ADAMTS13-T7蛋白结合能力比较,明显高于全长ADAMTS13蛋白。Western blotting结果显示,6个单克隆抗体都能与全长ADAMTS13结合,其中1G11和2F11条带最亮。功能实验表明,在变性条件下1G11和2F11能够明显抑制ADAMTS13水解v WF,并随着单克隆抗体浓度的增加而抑制作用增强。结论:成功获得针对ADAMTS13的单克隆抗体,其中两株为抑制性功能抗体。 马珍妮 凌婧 沈飞 谢丽倩 殷杰 苏健 阮长耿关键词:血管性血友病因子裂解蛋白酶 血管性血友病因子 单克隆抗体 阻断VWF与胶原结合的抗人VWF A3区单抗的制备和鉴定研 研究背景:血栓性疾病,是最常见的死亡病因之一, 且其发病率仍在不断上升。作为血栓的主要组成成份, 特别是在动脉血栓和微血管止血栓子中,血小板和 von Willebrand Factor(VWF)在血栓形成中起着关键作用... 赵益明 沈飞 谢丽倩 董宁征 阮长耿文献传递 人血管性血友病因子A1区单克隆抗体的研制 研究背景:血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)是血栓形成过程中的一个重要相关蛋白, 在初期止血过程中,它通过血小板膜表面的 vWF 受体 (GPIb/IX)与血小板结合,使血小板发生粘附... 沈飞 董宁征 范磊 赵益明 谢丽倩 阮长耿文献传递 硼替佐米对内皮细胞迁移及血管新生的影响 2010年 目的 通过观察硼替佐米对内皮细胞迁移和血管新生相关因子表达的影响,探讨硼替佐米抗肿瘤细胞增殖作用的机制.方法 细胞计数法检测不同浓度硼替佐米分别处理12和24 h后内皮细胞系HMEC-1细胞的相对增殖活力;采用Transwell模型观察细胞迁移率;实时定量PCR方法检测Annexin A2、血管内皮生长因子(VEGF)基因表达水平,Western blot法检测Annexin A2在蛋白水平的变化.结果 2.5、5.0、10 nmol/L硼替佐米作用12 h,对HMEC-1细胞增殖抑制作用较弱[细胞增殖相对活力分别为(100.4±2.2)%、(79.3±2.1)%、(87.4±6.2)%],仅10 nmol/L组与对照组(100.O%)相比差异有统计学意义(P〈0.05);但明显降低了细胞的迁移率,2.5、5.0、10.0 nmol/L硼替佐米组HMEC-1细胞迁移率分别为(69.7±6.0)%、(59.7±9.0)%、(54.7±12.7)%,与对照组(100.0%)相比,差异均具有统计学意义(P〈0.05):硼替佐米抑制了Annexin A2和VEGF基因的表达,5.0 nmol/L硼替佐米处理12 h,HMEC-1细胞Annexin A2和VEGF相对表达水平分别为0.540±0.001和0.673±0.153,与对照组(均设定为1.000)相比,差异均有统计学意义(P〈0.05),Western blot同样显示Annexin A2在蛋白水平表达下调.结论 硼替佐米可通过下调 Annexin A2和VEGF的表达,从而抑制内皮细胞系HMEC-1细胞的迁移. 薛雷喜 江淼 谢丽倩 阮长耿关键词:硼替佐米 细胞迁移 血管内皮生长因子 SiRNA沉默AnnexinⅡ对骨髓瘤RPMI8226细胞增殖影响 2009年 目的观察沉默AnnexinⅡ(A2)基因对骨髓瘤RPMI8226细胞增殖影响。方法采用A2siRNA转染人骨髓瘤RPMI8226细胞后应用real-timePCR和流式细胞术鉴定干扰效果。MTT法检测A2siRNA对细胞增殖的作用。结果A2siRNA组较阴性对照组细胞生长抑制率在24h、48h、72h分别为16.87%±3.97%,34.92%±4.15%,39.62%±5.67%vs-8.93%±9.67%,-5.98%±2.56%,3.85%±5.48%(P〈0.05),A2siRNA可对RPMI8226细胞增殖起抑制作用。结论SiRNA沉默A2基因可抑制骨髓瘤RPMI8226细胞增殖。 包红雨 江淼 马珍妮 朱明清 陈琳 沈飞 谢丽倩 董宁征 阮长耿关键词:SIRNA RPMI8226 增殖 抗人血管性血友病因子前导肽单克隆抗体SZ175及其应用 本发明公开了抗人血管性血友病因子前导肽单克隆抗体SZ175及其应用,所述单克隆抗体SZ175属于IgG1亚类抗体,由杂交瘤细胞株SZ175(2B10)产生;其中,杂交瘤细胞株SZ175(2B10)的保藏编号为CCTCC ... 马珍妮 殷杰 凌婧 苏健 谢丽倩 张婷婷 阮长耿文献传递 Mer基因过表达对内皮细胞株HMEC-1细胞血管形成的影响及其机制探讨 2007年 目的探讨受体酪氨酸家族成员 Mer 基因对体外血管形成过程的影响及其具体作用机制。方法利用脂质体法将人全长 Mer 基因真核表达质粒转染到内皮细胞株 HMEC-1细胞中,G418筛选转染细胞得到阳性克隆,利用 PCR 和 Western blot 分别在 mRNA 和蛋白水平验证转染情况。利用Transwell 和 Matrigel 分别观察 Mer 基因过表达对于内皮细胞迁移能力和血管形成能力的影响。通过荧光定量 PCR 筛选血管内皮生长因子(VEGF)-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D以及血管内皮生长因子受体(VEGFR)-1、VEGFR-2基因的表达情况。结果经过 G418筛选后,PCR 和 Western blot 检测结果显示 Mer 基因在阳性克隆细胞中有较高水平表达,分别较空质粒对照组上升3.61倍和2.12倍;高表达 Mer 的 HMEC-1细胞迁移能力[迁移到 Transwell 下室壁的细胞为(21±6)/视野]较对照组[(36±11)/视野]明显下降。体外血管形成实验也表明高表达 Mer 基因的 HMEC-1细胞血管形成能力明显下降,抑制率为76.9%;荧光定量 PCR 结果显示 VEGF-C 和 VEGFR-2表达明显下降,VEGF-C 表达量为对照组的44.7%,VEGF-C 表达为对照组的25.6%。结论 Mer 过表达可以显著抑制 HEMC-1细胞的迁移能力和血管形成能力,并且可能是通过 VEGF-C/VEGFR-2信号途径发挥作用。 范磊 周梦云 沈飞 谢丽倩 阮长耿关键词:受体酪氨酸激酶 血管新生 内皮生长因子 特发性室性早搏经射频消融后自主神经系统活性的变化 2024年 目的射频导管消融术(RFCA)是特发性室性早搏(IPVC)的标准治疗方法。本研究旨在确定低、中、高负荷量的患者在RFCA术前术后的自主神经系统(ANS)活动。方法回顾性分析2017年6月至2021年3月共200例特发性室性早搏行射频消融手术的患者。在200例患者中,179例(89.5%)手术消融成功。将消融成功的患者分为低负荷组(负荷量≤15%)、中负荷组(负荷量15%~25%)和高负荷组(负荷量≥25%)。评估不同负荷和不同消融部位患者的临床数据、心率变异性(HRV)各参数、窦性心率震荡(HRT)及心率减速力(DC)。结果高负荷组的平均心率、5 min均值标准差(SDANN)、正常RR间期标准差(SDNN)、正常RR间期标准差(SDNN)指数、逐次R-R区间差异均方根(rMSSD)、相邻RR间期差值超过50 ms的RR间期所占百分数(pNN50)高于低负荷组,而低频功率(LF)/高频功率(HF)之比低于低负荷组。消融后,SDNN、SDNN指数、SDANN、rMSSD、pNN50、震荡斜率(TS)和DC显著降低(P<0.01),LF/HF和震荡初始(TO)显著升高(P<0.01)。术前早搏负荷与左心室舒张末期内径(LVEDd)、平均心率、SDNN指数、SDANN、rMSSD、pNN50呈正相关,与总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、左心室射血分数(LVEF)、LF/HF呈负相关。回归分析显示,特发性室性早搏负荷与平均心率(P<0.01)、SDANN(P<0.01)和rMSSD(P<0.01)呈正相关。结论随特发性室性早搏负荷增加,交感神经和迷走神经活动增强,并以交感神经活性增强为主。特发性室性早搏的发生可能与自主神经平衡调节受损有关。射频消融术可降低交感神经和迷走神经活性。 丁兵 戴允浪 何林燕 谢丽倩关键词:导管射频消融 心率变异性