杨洁亮 作品数:15 被引量:34 H指数:4 供职机构: 四川大学华西医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部留学回国人员科研启动基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 环境科学与工程 更多>>
脱钙脱细胞皮质骨支架的制备及其组织形态学和力学性能表征 :生物来源的支架材料用于组织修复成为生物材料研究和应用的热点之一.目前,临床上常使用自体或异体来源的髌腱、腘绳肌腱、股四头肌腱和髂胫束等生物来源材料修复韧带缺损,但仍存在来源受限、修复后膝关节稳定性差、手术并发症等缺点.... 杨洁亮 张忆 江燕林 秦廷武关键词:力学性能 异种脱细胞肌腱生物支架的生物力学特性研究 <正>目的:在肌腱/韧带损伤修复领域,理想的支架材料应具有良好的生物相容性和较低的免疫原性,而且其力学性能应与正常的肌腱/韧带组织相匹配。本研究的目的在于采用反复冻融结合核酸酶和α-半乳糖甘酶处理小牛肌腱,在确定完全脱细... 江燕林 张忆 杨洁亮 秦廷武文献传递 脱细胞小牛肌腱组织形态学和生物力学特性研究 被引量:3 2013年 目的研究反复冻融结合核酸酶处理小牛肌腱脱细胞效果以及对肌腱组织形态、结构、生化成分和力学特性的影响。方法取新鲜1日龄西门塔尔小牛跟腱48根,随机分为3组(n=16):A组为正常对照组,B组采用液氮冷冻/37℃复温反复冻融5次,C组在反复冻融基础上结合核酸酶处理24 h。每组取2根跟腱用于扫描电镜观察,3根用于、组织学及免疫组织化学染色观察,3根用于DNA残留量检测,8根用于生物力学检测。结果扫描电镜观察示A、B组胶原纤维排列致密有序,形态完整,未见断裂;C组胶原纤维排列松散,几乎无断裂。阿利新蓝、天狼星红染色及免疫组织化学染色示C组糖胺聚糖、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白大部分被保留;HE染色和DAPI染色示A、B组胶原纤维间可见较多完整的细胞核,而C组胶原纤维之间未见完整细胞核,但腱内膜上仍有部分细胞核残留。A、B、C组的DNA残留量分别为(0.24±0.12)、(0.16±0.07)、(0.05±0.02)μg/mg,C组显著低于A、B组(P<0.05);A、B组间差异无统计学意义(P>0.05)。生物力学检测显示,A、B、C组间拉伸强度、断裂应变、刚度和弹性模量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论反复冻融结合核酸酶处理小牛肌腱,可有效去除细胞成分,同时基本保留肌腱原始胶原纤维结构、形态、大部分细胞外基质成分和力学特性。 江燕林 张忆 杨洁亮 罗静聪 秦廷武关键词:形态学 生物力学 小牛 尿液脱落细胞块切片的制备 2023年 目的 制作尿液脱落细胞块切片,并观察制备效果。方法 收集36例疑似尿路上皮癌患者的新鲜晨尿样本,离心后取尿液沉渣,裂解沉渣中红细胞后加入固定液固定尿液脱落细胞,将尿液脱落细胞富集后制备尿液脱落细胞团,将尿液脱落细胞团脱水后石蜡包埋,以制备尿液脱落细胞块。将尿液脱落细胞块切片,苏木素—伊红染色(HE)后显微镜下评估切片细胞数量(一个视野中细胞所占面积>40%为制备成功)。将制备成功的尿液脱落细胞块切片分别进行免疫组织化学(IHC)和荧光原位杂交(FISH)检测,IHC染色清晰,定位准确,阳性细胞与背景分辨清晰视为检测成功,FISH检测荧光信号对比清晰,背景干净且75%以上细胞核中有杂交信号视为检测成功。结果HE染色显微镜下评估后36例份尿液脱落细胞块切片中21例份制备成功、15例份因细胞过少无法满足后续诊断要求。21例份尿脱落细胞块切片HE染色后显微镜下可见细胞单层平铺,背景干净,核仁清晰,细胞核和胞质对比清晰。21例份尿脱落细胞块切片IHC染色后荧光显微镜下细胞定位准确,细胞内颗粒清晰,染色强度适宜。21例份尿脱落细胞块切片FISH染色后荧光显微镜下细胞核形态轮廓清晰,荧光红绿信号对比清晰,背景干净。结论成功制备尿液脱落细胞块切片。尿液脱落细胞块切片后可用于常规HE染色、IHC和FISH检测,显微镜下可见背景干净,细胞染色效果较好,细胞核仁清晰。 杜天海 吕丽霞 杨洁亮 彭恒 陈敏浅谈CAP认证中荧光原位杂交技术的质量管理与控制 本文介绍了 CAP认证中对荧光原位杂交(FISH)技术的评审标准及质控要点。重点介绍如何建立标准化操作规程和完善实验室管理制度、如何做好实验分析全程质量保证、如何对实验室室内质控与室间质控计划与实施、如何做好人员培训及能... 吕丽霞 陈敏 杨洁亮 杜天海 唐源间期荧光原位杂交技术在604例B细胞淋巴瘤中的诊断价值分析 被引量:11 2018年 目的探讨间期荧光原位杂交(FISH)技术对B细胞淋巴瘤诊断、鉴别诊断、预后评估及治疗指导的应用价值。方法收集四川大学华西医院2010年5月至2016年12月间期FISH检测的B细胞淋巴瘤604例,对其分子遗传学特征,包括MYC、bcl-2、bcl-6、IRF4、MYC/IgH、bcl-2/IgH、CCND1/IgH、IgH、API2/MALT1、p53/ATM、D13S319/CEP12基因的状态分析。结果604例患者男性61.6%(372/604),女性38.4%(232/604),平均年龄47.7岁(2~90岁)。包括大B细胞淋巴瘤463例和小B细胞淋巴瘤141例。间期FISH检测总体阳性率为59.8%(361/604)。463例大B细胞淋巴瘤中检出12.5%(58/463)MYC易位;9.5%(44/463)bcl-6易位;2.2%(10/463)bcl-2易位。(1)弥漫性大B细胞淋巴瘤363例,Hans分型包括生发中心B细胞(GCB)型38.6%(140/363)、非GCB型61.4%(223/363)。GCB型和非GCB型分别检出45.7%(64/140)和21.5%(48/223)基因异常,差异具有统计学意义(P=0.001)。MYC、bcl-2易位更易见于GCB型。(2)11例(2.4%,11/463)伴有MYC和bcl-2或bcl-6重排高级别B细胞淋巴瘤(双重打击淋巴瘤);1例(0.2%,1/463)伴有MYC、bcl-2和bcl-6重排高级别B细胞淋巴瘤(三打击淋巴瘤);2例(0.4%,2/463)bcl-6和bcl-2易位。(3)Burkitt淋巴瘤86例,94.2%(81/86)检出MYC易位,83.7%(72/86)检出MYC/IgH融合。(4)2例IRF4+大B细胞淋巴瘤检出IRF4基因分离。141例小B细胞淋巴瘤中包括滤泡淋巴瘤19例、套细胞淋巴瘤29例、黏膜相关淋巴组织结外边缘区淋巴瘤39例、慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤54例,其相应的遗传学改变检出比例分别为9/19、100%(29/29)、30.8%(12/39)和68.5%(37/54)。结论间期FISH技术能快速准确检测B细胞淋巴瘤的基因状态。检测出的不同遗传学改变对B细胞淋巴瘤不同亚型的诊断、鉴别诊断、预后评估及治疗指导方面具有特异性检测意义。 陈敏 杨洁亮 赵莎 刘卫平 李甘地 叶云霞 严嘉琦 张文燕关键词:基因融合 全自动荧光原位杂交仪实验条件的优化及与手工方法的对比 被引量:1 2017年 近年来,荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)广泛应用于分子靶向治疗、肿瘤诊断、鉴别诊断以及肿瘤预后评估方面。FISH技术通过荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交。在荧光显微镜下观察并分析细胞核内杂交于DNA靶序列的探针信号,以获得细胞核内染色体(或染色体片段)上基因状态的信息。 陈敏 杨洁亮 吕丽霞 陈华容 唐源关键词:荧光原位杂交 探讨提高石蜡样本荧光原位杂交重复检测成功率的方法 被引量:1 2023年 目的探讨石蜡包埋样本荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测失败的原因,并分析FISH检测失败与样本来源、探针种类、实验条件的相关性,以提高石蜡样本FISH重复检测的成功率。方法收集12709例石蜡检测样本,对其中首次检测失败的512例样本,采取更换蜡块或改变实验条件的方法进行重复实验,统计重复实验前后FISH检测结果。结果总体检测重复率为4.03%(512/12709),包括信号微弱无法判读58.59%(300/512),完全无信号41.41%(212/512)。其中本院样本195例(2.89%,195/6753),会诊样本317例(5.32%,317/5956)。按照样本来源分类,检测重复率较高的组织分别为软组织(4.41%)、肺(4.20%)、乳腺(4.18%)、淋巴(4.16%)、头颈部(4.03%)、胃(3.69%)、神经(2.88%)。样本来源及探针种类间的检测重复率差异无统计学意义(P>0.05)。重复检测后,186例(36.33%)样本检测成功,其中更换蜡块和改变实验条件的成功率分别为60.75%和29.88%(P<0.05)。结论石蜡样本FISH检测重复率与样本的前处理和实验操作相关,与组织学类型和探针类型无关,采取更换蜡块的方式重复实验可有效提高FISH二次检测的成功率。 杜天海 陈敏 吕丽霞 杨洁亮 彭恒 唐源关键词:荧光原位杂交 浅谈荧光原位杂交技术的质量管理与控制 被引量:6 2020年 荧光原位杂交(FISH)技术是经典的分子病理诊断技术,具有周期短、操作简便、灵敏度高、特异度强等特点,是检测染色体异常及基因变异的常用工具之一。一个健全的质量管理体系是医疗安全管理的基础环节,是保证FISH检测结果准确、可靠和及时的前提。该文结合作者工作体会对如何做好FISH实验室的质量管理与质量控制进行了介绍,旨在提高FISH实验室的规范化管理与标准化建设。 吕丽霞 陈敏 杨洁亮 杜天海 刘卫平 唐源关键词:医疗安全管理 荧光原位杂交技术 染色体异常 基因变异 分子病理诊断 质量管理与控制 探讨不同预处理方法对HER2基因荧光原位杂交效果的影响 被引量:7 2017年 人类表皮生长因子受体2基因(HER2)定位于17号染色体,编码一种具有酪氨酸激酶活性的跨膜生长因子受体。研究表明,乳腺癌HER2基因扩增或蛋白过表达与疾病进展和不良预后相关,且是靶向治疗的靶点。目前指南推荐通过免疫组化技术(IHC)检测HER2蛋白的表达,或通过原位杂交技术(ISH)检测HER2基因。 陈敏 陈华容 吕丽霞 杨洁亮 王威亚 唐源关键词:乳腺癌 FISH