李杰萍
- 作品数:29 被引量:135H指数:6
- 供职机构:武警福建省总队医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金福建省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 集成毛细管电泳芯片技术及其应用被引量:8
- 2002年
- 李杰萍梁统周克元
- 关键词:芯片技术生物医药
- 基于R语言子宫内膜癌脂代谢基因差异性分析及免疫组织化学验证被引量:1
- 2021年
- 目的:探讨R语言在基因表达数据库中筛选子宫内膜癌相关的脂质代谢关键分子的可行性。方法:从基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中筛选子宫内膜癌测序集GSE56087,基于R语言进行基因差异性分析及信号通路分析,从结果中选取可能有意义的高表达基因并进行免疫组织化学验证。结果:通过基因差异性分析、富集分析并结合信号通路分析,筛选出子宫内膜癌组织中代谢相关基因CYP3A4与NR1I2高表达。临床标本免疫组织化学显示CYP3A4与NR1I2在癌与癌旁组织的表达差异有统计学意义(P<0.05),但均非高表达。CYP3A4与NR1I2在不同子宫内膜癌分期中的表达情况的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:R语言对已有基因表达数据库进行基因差异性分析和信号通路分析是可行的。对GSE56087测序结果进行差异性基因分析发现,脂质代谢相关的CPY基因家族、NR基因家族有高表达,尤其CYP3A4与NR1I2,值得后续深入研究。
- 刘桐宇胡丹李杰萍朱伟峰许春伟谢榕杨琳邹建平嵇海舟孙阳
- 关键词:R语言脂质代谢内膜癌免疫组织化学
- 结缔组织生长因子小干扰RNA的构建及其干扰效果检测被引量:1
- 2008年
- 目的:构建结缔组织生长因子(CTGF)基因的小干扰RNA(siRNA),并检测其对CTGF基因表达的干扰效果。方法:根据CTGF基因序列,设计2条合理的CTGF-siRNA,并将其克隆到siRNA载体pSliencer2.1-U6 neo中,转化大肠杆菌DH5α,挑取阳性菌落进行酶切和测序鉴定;将构建成功的CTGF-siRNA重组质粒与带FLAG标签的CTGF表达载体共同转染人胚肾293T细胞,Western印迹检测siRNA的干扰效果。结果:构建了2个CTGF-siRNA重组质粒,2条siRNA都有干扰作用,其中一条的干扰效果可达75%以上。结论:构建的CTGF-siRNA可为进一步研究CTGF的功能提供参考。
- 李勤操郑喜邦王晓晖杨智洪姜艳超丁丽华李杰萍叶棋浓
- 关键词:结缔组织生长因子小干扰RNA
- 利用Tet—on可诱导系统构建稳定表达PESl的SKOV3细胞株被引量:1
- 2012年
- 目的为了进一步研究PES1的生物学功能,采用Tet—on系统构建可诱导稳定表达PES1的卵巢癌细胞株SKOV3。方法采用PCR技术将PES1克隆到pTRE—Tight载体中,并进行表达鉴定。将调控质粒pTet—on转染卵巢癌细胞,经G418筛选后再转染pTRE—Tight—PES1,然后经潮霉素筛选出阳性克隆。用不同浓度的强力霉素(Dox)进行诱导后,Westernblot确定Dox的最佳诱导浓度。结晶紫实验观察Dox诱导的稳定转染pTRE—Tight-PES1的SKOV3细胞生长速度。结果将成功构建的pTRE—Tight—PES1转染SKOV3细胞后,经过筛选获得Dox可诱导表达PES1的SKOV3细胞克隆。浓度低于2mg/L的Dox可以剂量依赖性地诱导PES1表达,2mg/L可以诱导PES1高表达。Dox诱导的转染pTRE—Tight和未转染任何质粒的SKOV3生长速度无明显差异,而转染pTRE—Tight—PES1的SKOV3细胞比转染pTRE-Tight和未转染任何质粒的细胞在第g天时生长速度明显更快(P=0.001)。结论成功建立了可诱导表达PES1的SKOV3细胞,为研究PES1的生物学功能提供了有效的细胞模型。PES1表达可以增强SKOV3细胞的生长。
- 李杰萍庄庆仁兰小鹏曾国彬罗小锋
- 关键词:基因表达卵巢肿瘤
- 利用小干扰RNA抑制小管间质性肾炎抗原相关蛋白的表达被引量:1
- 2008年
- 目的:设计并构建TIN-ag-RP基因的小干扰RNA(siRNA),检测其对小管间质性肾炎抗原相关蛋白(TIN-ag-RP)表达的干扰效果。方法:设计2条针对TIN-ag-RP基因的siRNA,并克隆到siRNA表达载体pSliencer 2.1-U6 neo上;经酶切和测序证明构建成功后,将重组质粒和带FLAG标签的TIN-ag-RP基因共转染293T人胚肾细胞,通过Western blot检验siRNA的干扰效果。结果:获得了2个TIN-ag-RP基因siRNA真核表达载体,均能有效抑制TIN-ag-RP的表达,其中一条的抑制效率达90%以上。结论:构建的TIN-ag-RP基因的siRNA能有效抑制TIN-ag-RP的表达。
- 杨智洪王晓辉姜艳超李杰萍袁斌王朝云杨树兴叶棋浓
- 关键词:小干扰RNA基因表达
- 细胞周期蛋白B1、D1和E真核表达载体的构建及表达被引量:1
- 2008年
- 目的:为研究细胞周期蛋白(cyclin)在肿瘤形成过程中的分子机制,构建带FLAG标签的细胞周期蛋白B1、D1、E的真核表达载体,并检测其在293T细胞中的表达。方法:以乳腺cDNA文库为模板,分别扩增细胞周期蛋白B1、D1、E基因全长编码区序列,克隆到pcDNA3-FLAG真核表达载体上;用脂质体介导的基因瞬时转染法,将重组正确的表达载体转染293T细胞,检测细胞中的FLAG融合蛋白的表达。结果:酶切鉴定和DNA序列分析显示构建了正确的FLAG-Cyclin真核表达载体,Western印迹分析表明克隆的载体都能在真核细胞中表达分子大小相符的重组蛋白。结论:构建了FLAG-CyclinB1、FLAG-CyclinD1、FLAG-CyclinE真核表达载体,为细胞周期蛋白及其相关蛋白的研究奠定了基础。
- 熊志红丁丽华袁斌王朝云李杰萍杨丽萍杨智洪叶棋浓
- 关键词:细胞周期蛋白克隆真核表达
- 厚朴酚对体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞5-脂氧合酶及5-脂氧合酶激活蛋白表达的影响
- 2003年
- 粱统周克元李杰萍
- 关键词:厚朴酚体外培养腹腔巨噬细胞5-脂氧合酶
- 厚朴酚对体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞5-脂氧合酶及5-脂氧合酶激活蛋白表达的影响
- 厚朴是一种传统中药,有多方面的药理活性,在我国传统医学中用于治疗炎性疾病如哮喘等。目前从厚朴中提取并鉴定的药理成分有十几种,其中厚朴酚是厚朴中主要的活性成分。厚朴酚具有抗菌、镇痛抗炎作用,可以抑制花生四烯酸(AA)的释放...
- 李杰萍梁统周克元
- 文献传递
- 毛细管电泳定量分析大鼠腹腔巨噬细胞中5-脂氧合酶mRNA
- 花生四烯酸(AA)经5-脂氧合酶(5-LO)代谢生成白三烯类产物,其具有多种生物学活性,与炎性疾病、肿瘤和老年性痴呆等有密切的关系.5-LO是这一通路的关键酶,调节该酶的表达可以调控白三烯类产物的生物合成.毛细管电泳是一...
- 李杰萍梁统周克元
- 关键词:毛细管电泳巨噬细胞5-脂氧合酶
- 文献传递网络资源链接
- 雌激素受体α和β反向调节PES1的表达
- 2023年
- 目的研究雌激素受体(Estrogen receptor,ER)在调节PES1表达中的作用。方法采用雌激素(Estrogen,E2)、ERα和ERβ特异刺激剂丙基吡唑三醇(Propyl-pyrazole triol,PPT)和二芳基丙腈(Diarylpropionitrile,DPN)分别处理ERα和ERβ双阳性的MCF-7和CAOV-3细胞,实时定量PCR分析观察雌激素对PES1表达的影响。在MCF-7和CAOV-3细胞中转染ERαSiRNA、ERβSiRNA后,加入或不加PPT和DPN分别处理细胞24 h,实时定量PCR和Western blot分析观察ER对PES1表达的影响。将构建好的含PES1全长启动子的荧光素酶报告基因载体ERα和ERβ表达载体共转染293T细胞后,观察ERα和ERβ对荧光素酶报告基因转录活性的影响。结果E2和PPT显著升高PES1 mRNA表达,而DPN则明显抑制PES1 mRNA表达。在E2诱导的MCF-7和CAOV-3细胞中,ERα和ERβ反向调节PES1的表达。ERα和ERβ能反向调节含PES1启动子的荧光素酶报告基因的转录活性。结论ERα和ERβ能结合到PES1启动子,直接调节PES1基因的表达。
- 李杰萍
- 关键词:雌激素受体基因表达