喻春钊
- 作品数：65 被引量：139H指数：6
- 供职机构：南京医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- Polo样激酶1对胰腺癌细胞株PANC-1凋亡、侵袭和迁移的影响被引量：2
- 2016年
- 目的 观察Polo样激酶1（Plk1）基因对胰腺癌细胞株PANC-1凋亡、侵袭和迁移的影响.方法 实验分3组：对照组（Control）、空载组[rAd-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）]、实验组[rAd-短发卡RNA（shRNA）].RNA干扰（RNAi）技术靶向沉默Plk1基因,构建人类Plk1-shRNA,通过腺病毒感染的方式导入体外培养的PANC-1细胞.实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot法检测Plk1在mRNA和蛋白水平的变化;流式细胞仪检测PANC-1细胞的凋亡变化;Transwell方法检测PANC-1细胞侵袭和迁移能力的改变.结果 RT-qPCR结果显示Plk1 mRNA水平表达量：对照组：1.011±0.153;空载组：0.943±0.052;实验组：0.256±0.008;Western blot结果显示Plk1蛋白水平表达量：对照组：0.920±0.029;空载组：0.883±0.029;实验组：0.013±0.005.实验组Plk1的表达量在mRNA和蛋白水平均明显低于对照组和空载组,差异有统计学意义（P＜0.01）.流式细胞术检测结果显示：下调Plk1,PANC-1细胞24 h后凋亡较其他两组明显增加（P＜0.01）;Transwell实验结果显示：侵袭能力,对照组：0.127±0.021;空载组：0.121±0.016;实验组：0.046±0.010;迁移能力,对照组：0.440±0.037;空载组：0.417±0.034;实验组：0.112±0.012;实验组细胞的侵袭和迁移能力较对照组和空载组明显下降,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 Plk1的表达与胰腺癌的凋亡、侵袭和转移密切相关,且采用RNAi技术靶向沉默Plk1基因可以促进胰腺癌细胞的凋亡,抑制其侵袭和迁移.
- 毛永欢李泉蔡则灵余翔喻春钊
- 关键词：POLO样激酶1胰腺癌脱噬作用
- 腹腔镜辅助Miles术中腹膜外乙状结肠造口预防造口旁疝的价值被引量：4
- 2022年
- 目的比较腹腔镜辅助Miles术中采用腹膜外乙状结肠造口、腹膜内乙状结肠造口预防造口旁疝的效果及安全性。方法65例直肠癌患者均行腹腔镜辅助Miles术,术中采用腹膜外乙状结肠造口者28例为观察组,采用腹膜内乙状结肠造口者37例为对照组。比较2组性别、年龄、体质量指数、肿瘤下缘至肛缘距离;比较2组手术时间、术中出血量、术后住院时间及术后造口旁疝、造口脱垂、造口回缩、造口缺血、造口感染等并发症发生率。结果观察组年龄[(57.3±10.5)岁]、男性比率(53.6%)、体质量指数[(24.4±3.8)kg/m^(2)]、肿瘤下缘至肛缘距离[(3.1±1.4)cm]、手术时间[(301.4±59.9)min]、术中出血量[(192.9±102.4)mL]、术后住院时间[(15.1±6.5)d]与对照组[(62.4±9.9)岁、64.9%、(23.8±4.0)kg/m^(2)、(3.6±2.1)cm、(324.6±84.1)min、(196.5±124.6)mL、(13.8±5.8)d]比较差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组造口旁疝发生率(7.1%)低于对照组(27.0%)(χ^(2)=4.186,P=0.041),造口脱垂(3.6%)、造口回缩(3.6%)、造口缺血(0)、造口感染(10.7%)发生率与对照组(8.1%、0、5.4%、13.5%)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔镜辅助Miles术中采用腹膜外乙状结肠造口可降低造口旁疝发生率,具有较好的安全性。
- 毛永欢缪骥朱兴亚徐恩夏雪峰喻春钊汪灏
- 关键词：MILES术造口旁疝
- 过表达Plk-1对gemcitabine诱导的胰腺癌细胞化疗敏感性的影响
- 2013年
- 目的观察Plk-1基因过表达对gemcitabine诱导胰腺癌细胞AsPC-1化疗敏感性的影响。方法①将携带有人外源性Plk-1基因的真核表达质粒转染AsPC-1细胞系设为处理组,转染空载体设为对照组,无处理组设为空白组,转染24 h后,提取细胞总RNA和总蛋白,利用RT-PCR法及Western blot鉴定AsPC-1细胞内Plk-1基因和蛋白表达水平。②采用流式细胞术检测转染组细胞凋亡的改变。③不同浓度gemcitabine作用于转染细胞,MTT法测定转染48 h后细胞增殖能力。结果①测序结果表明成功的从AsPC-1细胞总RNA中扩增Plk-1基因。RT-PCR结果表明:未转染组AsPC-1细胞组、转染空载体pcDNA3.1组及pcDNA3.1/Plk-1组24 h各组细胞内Plk-1 mRNA相对量分别为(2.14±0.16)、(2.18±0.15)、(2.58±0.18),转染pcDNA3.1/Plk-1组与其他各组相比,差异有高度统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示:未转染组AsPC-1细胞组、转染空载体pcDNA3.1及pcDNA3.1/Plk-1组24 h各组细胞内Plk-1基因的蛋白表达水平为(0.989±0.018)、(1.022±0.021)、(1.243±0.143),转染pcDNA3.1/Plk-1组与其他各组相比,差异有高度统计学意义(P<0.01)。②在gemcitabine作用下,pcDNA3.1/Plk-1转染组细胞凋亡率明显低于未转染组及空载体转染组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。③AsPC-1/Plk-1转染组细胞的生长抑制率亦明显高于未转染组及空载体转染组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论胞浆过表达Plk-1活性分子可明显降低gemcitabine诱导的AsPC-1细胞凋亡,增强其对化疗药物的耐受性。
- 余翔王兴伟李泉骆霞岗王伟林喻春钊
- 关键词：GEMCITABINE胰腺癌
- 一种westernblot敷育洗膜盒
- 本实用新型公开了一种westernblot敷育洗膜盒，包括盒体、盒盖、配合盒体使用的挡板以及滑杆，盒盖位于盒体的表面且与盒体转动连接，盒盖的表面设有透明板面和可涂擦板面，盒体的内部沿长度方向设有八组凹槽，凹槽对称分布在盒...
- 喻春钊王武林张新华李连红
- 文献传递
- 过表达核心蛋白聚糖基因对胆管癌细胞迁移及侵袭的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 观察过表达核心蛋白聚糖（DCN）基因对胆管癌细胞迁移及侵袭功能的影响.方法 脂质体介导真核表达质粒pEGFP-DCN和空载体pEGFP-N1转入人胆管癌细胞株QBC939,Western blot检测DCN蛋白以及E-钙黏蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测DCNmRNA以及E-钙黏蛋白mRNA的表达,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力.结果 RT-PCR结果显示过表达DCN较pEGFP-N1上调32.34倍;Western blot结果显示过表达组DCN上调2倍.Transwell结果显示转染pEGFP-DCN的胆管癌细胞迁徙和侵袭能力较转染pEGFP-N1分别降低约56.9％和40.2％;转染pEGFP-DCN与pEGFP-N1胆管癌细胞中E-钙黏蛋白的表达水平,结果可见较转染pEGFP-N1体组胆管癌细胞比较,转染pEGFP-DCN组E-钙黏蛋白的表达水平明显升高.结论 DCN过表达可抑制QBC939细胞的迁移与侵袭能力,可能与升高E-钙黏蛋白表达相关.
- 王伟林余翔李泉毛永欢沈佳佳骆霞岗喻春钊
- 关键词：胆管癌核心蛋白聚糖迁移
- 核心蛋白聚糖在胆管癌中的表达及其临床意义被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨胆管癌组织中核心蛋白聚糖表达的临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测44例胆管癌和40例正常胆管组织核心蛋白聚糖的表达,并分析核心蛋白聚糖的表达水平与胆管癌患者的性别、年龄、肿瘤细胞的分化程度和淋巴结转移的关系.结果 胆管癌组织核心蛋白聚糖表达明显下调,而在正常癌旁组织高水平表达.44例胆管癌患者胆管癌组织核心蛋白聚糖阳性18例（阳性率为40.91％）,而40例正常癌旁癌组织核心蛋白聚糖表达均呈阳性（阳性率为100.00％,P＜0.01）.高、中分化组肿瘤核心蛋白聚糖表达显著高于低分化组肿瘤（62.5％比15.0％,P＜0.01）.无淋巴结转移者中核心蛋白聚糖的表达（57.14％）明显高于已有区域淋巴结转移者（26.09％,P＜0.05）.核心蛋白聚糖的表达水平与胆管癌患者的性别、年龄、肿瘤的大小无明显相关.结论 核心蛋白聚糖在胆管癌组织中的表达具有一定肿瘤特异性.
- 余翔李泉毛永欢王伟林沈佳佳骆霞岗喻春钊
- 关键词：胆管癌核心蛋白聚糖
- Aurora-A inhibitor 1对人胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响被引量：3
- 2018年
- 目的检测Aurora-A在胰腺癌中的表达，并探讨特异性抑制剂Aurora-A inhibitor 1在胰腺癌增殖、凋亡中的作用。方法利用Western blot检测人类正常胰腺上皮细胞（HPNE）和胰腺癌细胞（PANC-1）中Aurora-A、p-Aurora-A蛋白的表达。细胞计数试剂盒（CCK-8）技术检测Aurora-A inhibitor 1对胰腺癌细胞增殖的影响；流式细胞术检测细胞周期以及凋亡，Western blot方法检测p-Aurora-A、Aurora-A、细胞周期和凋亡相关蛋白的表达。结果Western blot结果示较HPNE细胞，PANC-1细胞中Aurora-A蛋白表达量上调22.067倍，p-Aurora-A蛋白表达量上调8.962倍。CCK-8结果示：Aurora-A inhibitor 1可明显抑制PANC-1细胞的增殖（P=0.019）。流式细胞周期检测显示：PANC-1细胞经过Aurora-A inhibitor 1处理后，G1/S期细胞明显减少，G2/M细胞明显增加[空白组（9.6±2.3）%、对照组（7.5±4.8）%、实验组（61.2±4.0）%]；同时，p21蛋白表达水平明显升高（空白组：1.000±0.000、对照组：1.671±0.111、实验组：3.208±0.284）。凋亡分析：实验组较其他两组PANC-1细胞凋亡明显增加（空白组：1.000±0.000、对照组1.053±0.108、实验组1.902±0.276），裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Cleaved Caspase-3）蛋白表达水平明显增加（空白组：1.000±0.000、对照组：1.274±0.112、实验组：1.754±0.062）。结论Aurora-A、p-Aurora-A在胰腺癌中明显高表达，特异性抑制剂Aurora-A inhibitor 1通过抑制p-Aurora-A将胰腺癌细胞明显阻滞于G2/M期，并可抑制胰腺癌增殖，诱导细胞凋亡。
- 蔡则灵王盛毛永欢王进吴凯周稼骆霞岗喻春钊
- 关键词：胰腺癌AURORA-A抑制剂增殖凋亡
- 肝特异性转录因子FOXA2在人结直肠癌肝转移阶梯模型中的表达变化及其意义
- 2023年
- 目的探究人结直肠癌肝转移阶梯模型中FOXA2的表达变化及相关意义。方法采用Western blot技术和实时荧光定量PCR检测了常见结直肠癌细胞系中FOXA2的表达情况;在高表达细胞系SW-620细胞中转染FOXA2敲低质粒或阴性对照质粒,并用Western blot技术验证转染效果,以及检测上皮间质转化相关蛋白的表达变化。采用体内连续筛选法,通过在裸鼠体内进行SW-620结肠癌细胞株脾脏包膜下种植,经过连续三次肝转移筛选,构建结直肠癌肝转移阶梯模型。采用免疫组织化学染色法检测阶梯模型中肝转移瘤组织FOXA2的表达变化。采用Western blot技术检测模型中肝转移阶梯细胞的FOXA2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、p-PI3K、p-Akt、PI3K、Akt相关蛋白的表达变化。采用划痕愈合实验方法分析模型中肝转移阶梯细胞迁移能力的变化。结果SW-620细胞中FOXA2的表达成功被下调后,E-cadherin表达上升,N-cadherin表达下降(P<0.05)。在结直肠癌肝转移阶梯模型中,每一代肝转移瘤的成瘤率,转移灶数量,瘤体积逐渐升高(P<0.05);每一代肝转移瘤组织FOXA2免疫组化染色的阳性率逐渐升高(P<0.05);相对于初始SW-620细胞株,经过体内连续筛选的三代肝转移瘤细胞(CRLMC)中FOXA2表达呈现阶梯状上升趋势(P<0.05),N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平明显上升(P<0.05);E-cadherin蛋白表达水平明显下降(P<0.05),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达之比逐渐升高(P<0.05);划痕愈合实验显示每一代肝转移瘤细胞迁移能力逐渐增强(P<0.05)。结论肝特异性转录因子FOXA2在人结直肠癌肝转移阶梯模型中的表达逐渐上升,促进了肝转移瘤细胞的上皮间质转化.
- 黄怡诚陆晨孙司正喻春钊
- 关键词：结直肠肿瘤上皮间质转化
- 结直肠癌肝转移的治疗现状被引量：3
- 2017年
- 肝脏是结直肠癌最常见的远处侵犯器官。目前肝切除是治疗结直肠癌肝转移(CLM)安全、有效且唯一有治愈可能的方法,且大于50%的患者术后可以获得5年生存。近年来,化疗、消融术、放射治疗等技术的不断完善,在一定程度上提高了国内外结直肠癌肝转移的诊疗水平。合理地联合应用这些疗法制定综合的治疗方案,对CLM患者的预后有着深远的影响。现就CLM的治疗现状作一综述。
- 王盛喻春钊
- 关键词：结直肠肿瘤肿瘤转移肝切除术综合疗法
- 一种消肿抗感染促伤口愈合的药物组合物
- 本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种消肿抗感染促伤口愈合的药物组合物，由黄芩、黄连、黄柏、大黄、虎杖、地榆、槐花、紫草、败酱草、蒲公英和冰片等11种原材料制备而成，其药源广泛、成本低廉，能够消炎消肿、促进伤口愈合、促进糖...
- 喻春钊吴凯张新华
- 文献传递
