王伟林
- 作品数：10 被引量：19H指数：2
- 供职机构：南京医科大学第二临床医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 腹腔镜穿刺孔大出血的预防和处理（附五例报告）被引量：4
- 2015年
- 目的探讨腹腔镜手术后穿刺孔大出血的预防和处理。方法回顾性分析我院2000年5月至2013年8月间5例腹腔镜手术后穿刺孔大出血的病例资料。结果5例病人术后出血量500-1200ml，均经再次腹腔镜探查手术，最后确诊为腹壁穿刺孔出血，除1例肝硬化门脉高压病人为脐部交通静脉损伤出血外，其余4例均为腹壁肌层或腹膜外动脉损伤出血；并在腹腔镜直视下穿刺孔部位重新缝合止血，均治愈。结论腹腔镜手术中重视穿刺孔出血是防止术后腹腔大出血的重要原因。
- 董小刚王伟林王杰何震宇喻春钊
- 关键词：腹腔镜手术
- 晚期结直肠癌抗血管生成靶向治疗研究进展被引量：2
- 2015年
- 结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,靶向治疗在其治疗模式中发挥着重要作用。肿瘤血管生成是肿瘤生长、浸润和转移中的关键环节,针对新生血管的靶向药物在肿瘤综合治疗中扮演越来越重要的角色。目前在临床中被批准用于晚期结直肠癌的抗血管药物主要有贝伐单抗、阿柏西普、瑞格非尼等。该文就抗血管生成靶向药物在晚期结直肠癌靶向治疗中的研究进展进行综述。
- 王伟林闻浩
- 关键词：晚期结直肠癌抗血管生成贝伐单抗
- 吉西他滨对胰腺癌细胞增殖、凋亡及保罗样激酶-1表达的影响被引量：5
- 2014年
- 目的 观察吉西他滨对胰腺癌细胞增殖、凋亡及保罗样激酶-1（PLK-1）表达的影响.方法 采用不同浓度的吉西他滨处理胰腺癌AsPC-1细胞,在电镜下观察细胞的形态,噻唑蓝（MTT）法测定细胞生长抑制情况;不同浓度（2、5 μmol/L）的吉西他滨处理细胞12、24、48、72 h后,流式细胞分析法检测细胞凋亡,以半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测PLK-1 mRNA及PLK-1蛋白的表达.结果 MTT结果示随吉西他滨浓度增加,细胞增殖率明显下降（P＜0.05）;流式细胞分析法检测凋亡结果示：处理组凋亡率较空白对照组明显增加（P＜0.05）;RT-PCR和Western blot检测PLK-1 mRNA及PLK-1蛋白的表达结果显示,不同时间点PLK-1 mRNA相对表达量分别为：对照组0.70 ±0.15、0.65 ±0.27、0.72 ±0.13、0.68±0.30;2 μmnol/L组：0.88 ±0.58、0.95±0.53、2.36±0.57、3.53 ±0.89;5 μmol/L组：0.89 ±0.60、1.02±0.32、3.95±1.84、4.52 ±2.25及PLK-1蛋白的表达水平分别为：对照组：0.82 ±0.41、0.78 ±0.46、1.01 ±0.05、0.88±0.25;2 μmol/L组：0.89±0.28、1.61 ±0.88、1.66 ±0.18、3.28±1.33;5μ.mol/L组：0.85±0.36、1.89±0.18、2.73±0.78、4.32±2.13,也相应升高（P＜0.05）.结论 吉西他滨能诱导AsPC-1细胞凋亡,其机制可能与细胞内的PLK-1水平改变有关.PLK-1基因表达水平与胰腺癌化疗药物敏感性密切相关.
- 余翔王兴伟李泉毛永欢骆霞岗竺慧沈佳佳王伟林喻春钊
- 关键词：胰腺癌吉西他滨脱噬作用
- 外周血中乳腺上皮小黏蛋白、人乳珠蛋白表达与乳腺癌预后的关系被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨外周血中乳腺上皮小黏蛋白（SBEM） mRNA、人乳珠蛋白（hMAM） mRNA的表达水平与乳腺癌预后的关系.方法 利用Nested-逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测92例乳腺癌术后患者,40例非乳腺癌患者外周血SBEM、hMAM mRNA,并对92例乳腺癌患者进行临床随访分析.结果 SBEM、hMAM mRNA仅在乳腺恶性肿瘤外周血中表达,Kaplan-Meier生存分析结果显示：乳腺癌患者外周血中SBEM mRNA阳性表达组生存率47.7％小于阴性组85.1％（P＜0.01）,hMAM mRNA阳性表达组生存率46.3％小于阴性组84.0％ （P＜ 0.01）,差异有统计学意义.SBEM、hMAM mRNA阳性表达有相关（P＜0.01）.结论 外周血中SBEM、hMAM mRNA检测有助于判断乳腺癌预后,两种肿瘤标志物的联合检测提高了检测灵敏度.
- 尤小兰王元杰王伟林余翔喻春钊
- 关键词：乳腺癌微转移生存率
- 过表达Plk-1对gemcitabine诱导的胰腺癌细胞化疗敏感性的影响
- 2013年
- 目的观察Plk-1基因过表达对gemcitabine诱导胰腺癌细胞AsPC-1化疗敏感性的影响。方法①将携带有人外源性Plk-1基因的真核表达质粒转染AsPC-1细胞系设为处理组,转染空载体设为对照组,无处理组设为空白组,转染24 h后,提取细胞总RNA和总蛋白,利用RT-PCR法及Western blot鉴定AsPC-1细胞内Plk-1基因和蛋白表达水平。②采用流式细胞术检测转染组细胞凋亡的改变。③不同浓度gemcitabine作用于转染细胞,MTT法测定转染48 h后细胞增殖能力。结果①测序结果表明成功的从AsPC-1细胞总RNA中扩增Plk-1基因。RT-PCR结果表明:未转染组AsPC-1细胞组、转染空载体pcDNA3.1组及pcDNA3.1/Plk-1组24 h各组细胞内Plk-1 mRNA相对量分别为(2.14±0.16)、(2.18±0.15)、(2.58±0.18),转染pcDNA3.1/Plk-1组与其他各组相比,差异有高度统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示:未转染组AsPC-1细胞组、转染空载体pcDNA3.1及pcDNA3.1/Plk-1组24 h各组细胞内Plk-1基因的蛋白表达水平为(0.989±0.018)、(1.022±0.021)、(1.243±0.143),转染pcDNA3.1/Plk-1组与其他各组相比,差异有高度统计学意义(P<0.01)。②在gemcitabine作用下,pcDNA3.1/Plk-1转染组细胞凋亡率明显低于未转染组及空载体转染组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。③AsPC-1/Plk-1转染组细胞的生长抑制率亦明显高于未转染组及空载体转染组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论胞浆过表达Plk-1活性分子可明显降低gemcitabine诱导的AsPC-1细胞凋亡,增强其对化疗药物的耐受性。
- 余翔王兴伟李泉骆霞岗王伟林喻春钊
- 关键词：GEMCITABINE胰腺癌
- 过表达核心蛋白聚糖基因对胆管癌细胞迁移及侵袭的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 观察过表达核心蛋白聚糖（DCN）基因对胆管癌细胞迁移及侵袭功能的影响.方法 脂质体介导真核表达质粒pEGFP-DCN和空载体pEGFP-N1转入人胆管癌细胞株QBC939,Western blot检测DCN蛋白以及E-钙黏蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测DCNmRNA以及E-钙黏蛋白mRNA的表达,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力.结果 RT-PCR结果显示过表达DCN较pEGFP-N1上调32.34倍;Western blot结果显示过表达组DCN上调2倍.Transwell结果显示转染pEGFP-DCN的胆管癌细胞迁徙和侵袭能力较转染pEGFP-N1分别降低约56.9％和40.2％;转染pEGFP-DCN与pEGFP-N1胆管癌细胞中E-钙黏蛋白的表达水平,结果可见较转染pEGFP-N1体组胆管癌细胞比较,转染pEGFP-DCN组E-钙黏蛋白的表达水平明显升高.结论 DCN过表达可抑制QBC939细胞的迁移与侵袭能力,可能与升高E-钙黏蛋白表达相关.
- 王伟林余翔李泉毛永欢沈佳佳骆霞岗喻春钊
- 关键词：胆管癌核心蛋白聚糖迁移
- 核心蛋白聚糖在胆管癌中的表达及其临床意义被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨胆管癌组织中核心蛋白聚糖表达的临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测44例胆管癌和40例正常胆管组织核心蛋白聚糖的表达,并分析核心蛋白聚糖的表达水平与胆管癌患者的性别、年龄、肿瘤细胞的分化程度和淋巴结转移的关系.结果 胆管癌组织核心蛋白聚糖表达明显下调,而在正常癌旁组织高水平表达.44例胆管癌患者胆管癌组织核心蛋白聚糖阳性18例（阳性率为40.91％）,而40例正常癌旁癌组织核心蛋白聚糖表达均呈阳性（阳性率为100.00％,P＜0.01）.高、中分化组肿瘤核心蛋白聚糖表达显著高于低分化组肿瘤（62.5％比15.0％,P＜0.01）.无淋巴结转移者中核心蛋白聚糖的表达（57.14％）明显高于已有区域淋巴结转移者（26.09％,P＜0.05）.核心蛋白聚糖的表达水平与胆管癌患者的性别、年龄、肿瘤的大小无明显相关.结论 核心蛋白聚糖在胆管癌组织中的表达具有一定肿瘤特异性.
- 余翔李泉毛永欢王伟林沈佳佳骆霞岗喻春钊
- 关键词：胆管癌核心蛋白聚糖
- Polo-like kinase 1短发卡RNA重组腺病毒载体构建及其生物学应用
- 2016年
- 目的构建针对人类Polo-like kinase1（Plk1）基因的短发卡RNA（shRNA）真核表达载体，并进行腺病毒包被。方法设计并合成含有小发夹结构的Plk1 shRNA对应模板序列，退火并与pYr-1．1载体重组质粒；通过LR体外同源重组将pYr-1．1-Plk1—shRNA表达框构建至pAd—DEST腺病毒表达载体上；包装重组腺病毒；感染人类胰腺癌细胞BxPC-3验证干扰效率。实验分3组：对照组（Control）、空载组[rAd-增强绿色荧光蛋白（tAd—EGFP）]、实验组（rAd—shPlk1），实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western blot检测Plk1基因的表达，流式细胞术检测细胞周期的变化及对细胞凋亡的影响。结果腺病毒感染BxPC-3细胞后，RT-qPCR检测Plk1 mRNA表达量：对照组1．047±0．315、空载组1．121±0．199、实验组0．119±0．050；Western blot检测Plk1蛋白表达量：对照组0．760±0．088、空载组0．743±0．101、实验组0．050±0．043，实验组较对照组及空载组Plk1 mRNA和蛋白水平均明显降低（P〈0．01）。流式细胞术检测G2期细胞比例：对照组6．077±0．056、空载组6．533±1．644、实验组33．427±7．774，实验组G：期细胞数比例显著高于空载组和对照组（P〈0．01）。感染24h后实验组的细胞凋亡率明显高于空载组和对照组（P〈0．01）。结论成功构建包被有Plk1 shRNA的腺病毒表达载体，且重组腺病毒载体可以抑制Plk1基因的表达，引起细胞周期G2／M期停滞和促进细胞凋亡。
- 李泉毛永欢余翔蔡则灵王伟林喻春钊
- 关键词：KINASE短发卡RNA重组腺病毒胰腺癌RNA干扰
- 过表达核心蛋白聚糖基因对胆管癌细胞周期及凋亡的影响被引量：2
- 2015年
- 目的 观察过表达核心蛋白聚糖（DCN）基因对胆管癌细胞周期及凋亡的影响.方法 脂质体介导真核表达质粒pEGFP-DCN和空载体pEGFP-N1转入人胆管癌细胞株QBC939,Westernblot检测DCN蛋白的表达,实时定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测DCN mRNA的表达,克隆形成实验计算克隆形成率,噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡.结果 RT-qPCR示过表达DCN相对空载体上调32.34倍;Western blot结果示过表达组DCN上调2.00倍.pEGFP-DCN转染组细胞克隆形成数[（210.9±19.3）个]显著低于空质粒转染组[（608.7±56.3）个],差异有统计学意义（P＜0.05）.转染pEGFP-DCN细胞与空载体比较,细胞增殖能力显著降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.流式细胞周期检测显示,胆管癌细胞转染pEGFP-DCN后G1～ Go期细胞比例明显升高,而G2～S期细胞减少,细胞周期被阻滞在G1～Go期,凋亡分析转染pEGFP-DCN的QBC939细胞较转染空载体细胞凋亡显著增加,半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3明显增高,而B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）的表达水平明显降低（0.787±0.068比1.276±0.157）.结论 转染DCN能够显著抑制胆管癌细胞的增殖,明显促进胆管癌细胞凋亡,而DCN促进胆管细胞凋亡与上调Caspase-3和下调bcl-2蛋白相关.
- 王伟林余翔李泉毛永欢沈佳佳骆霞岗闻浩喻春钊
- 关键词：胆管癌核心蛋白聚糖细胞周期脱噬作用
- RNAi沉默Plk1对胰腺癌细胞系AsPC-1侵袭转移的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨RNAi沉默Plk1基因表达与胰腺癌细胞侵袭转移能力的关系。方法根据Plk1基因特点,设计并用化学方法合成了4个小干扰核糖核酸分子(siRNA)(shplk1-1、shplk1-2、shplk1-3、shplk1-4),脂质体转染法将短链siRNA转入AsPC-1细胞;细胞分为:未处理组为对照组、空质粒组、shplk1-1组、shplk1-2组、shplk1-3组、shplk1-4组。采用RT-PCR和Western blot法检测siRNA对Plk1表达的抑制效果;采用Transwell法检测转染后细胞侵袭能力;采用划痕实验检测转然后细胞迁移能力。结果 RT-PCR和Western blot结果示所设计的4个siRNA均能明显抑制AsPC-1细胞Plk1 mRNA水平,以shplk1-3效果最好,与对照组、空质粒组及其他三组比较,转染shplk1-3组Plk1 mRNA和蛋白的表达水平显著降低(P<0.01);以转染shplk1-3处理AsPC-1细胞后与对照组、空质粒组比较,Transwell侵袭实验证实:细胞转染24 h后,正常对照组、空质粒组和shplk1-3组穿过人工基底膜的侵袭细胞数分别为(195±16)、(176±13)、(83±5)个,侵袭能力明显降低,差异有高度统计学意义(P<0.01);细胞划痕实验证实:shplk1-3组迁移能力明显降低。结论抑制胰腺癌细胞Plk1基因,侵袭迁移能力明显降低,能够为胰腺癌的治疗提供新的策略。
- 喻春钊余翔王兴伟骆霞岗李泉竺慧王伟林
- 关键词：PLK1RNAI胰腺癌
