吴之源
- 作品数:17 被引量:13H指数:2
- 供职机构:复旦大学附属华山医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 整合全血核酸提取、扩增即可视化检测肿瘤基因突变的微流控芯片及其应用
- 本发明提供了一种整合全血核酸提取、扩增即可视化检测肿瘤基因突变的微流控芯片、以及用所述微流控芯片进行基因突变检测的方法。所述微流控芯片包括细胞裂解室和细胞液滤过单元,所述细胞液滤过单元的下游连通至基因扩增及检测池;所述上...
- 关明汪骅张心菊吴之源许笑刘维薇周丹秋
- 文献传递
- 新型冠状病毒肺炎患者抗核抗体谱分析和血清加热灭活对检测的影响
- 2023年
- 目的探讨新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者抗核抗体(ANA)谱特征和血清热灭活对ANA检测结果的影响。方法选取2022年3—5月复旦大学附属华山医院宝山院区疑诊自身免疫性疾病(AID)的患者49例,分析其血清ANA阳性特征。同时,以56℃、30 min金属浴灭活血清作为观察组,比较其与对照组(未处理血清)使用间接免疫荧光法和线性免疫印迹法检测ANA结果之间的差异。结果COVID-19患者ANA阳性率为48.98%,荧光模型多样,包括AC-4型(细颗粒型)6例、AC-1型(均质型)5例、AC-3型(着丝点型)2例、AC-10型(核仁颗粒型)1例、AC-20型(胞质细颗粒型)3例和混合核型7例;其中中、低滴度(≤1∶320)荧光核型22例(91.7%)、高滴度(≥1∶1000)2例(8.3%)。ANA阳性组新型冠状病毒(SARS-CoV-2)ORF1ab基因、N基因Ct值和核酸转阴时间(NCT)与ANA阴性组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。当COVID-19患者合并AID时ANA阳性率最高(55.6%),但与合并非AID(48.4%)和无基础疾病(44.4%)患者比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组与观察组荧光模型、荧光强度、靶抗原检测抗体种类和膜条显色强度无差异;ANA阴性患者血清热灭活后检测结果仍为阴性。结论ANA阳性对COVID-19患者病程转归的影响意义有限。血清56℃、30 min热灭活对COVID-19患者ANA的检出和核型、滴度分布,以及靶抗原的检测结果均无影响。
- 项瑾刘爱平胡尧吴之源曹国君关明
- 关键词:抗核抗体间接免疫荧光法
- 从286例骨髓增殖性疾病患者中筛查MPLW515L/K突变
- 目的骨髓增殖性疾病(MPD)包括慢性粒细胞白血病(CML)、真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)和原发性骨髓纤维化(PMF)等疾病。如今,JAK2 V617F突变与MPL 515突变已成为ET和PMF的诊...
- 许笑吴之源张心菊胡婷婷陈宇明关明
- 文献传递
- 一种检测BANK1基因单核苷酸多态性的方法
- 本发明属于基因工程和基因诊断领域,提供了一种检测BANK1基因单核苷酸多态性的方法:首先,设计扩增rs10516487或者rs17266594位点的引物和探针;然后,以样本DNA为模板,利用上述引物和探针进行PCR扩增;...
- 邹和建关明张心菊吴之源陈宇明
- 文献传递
- 一种参与人结直肠癌增殖和耐药的lncRNA及其应用
- 本发明开创性地发现一种参与人结直肠癌增殖和耐药的lncRNA其应用,并具体公开了所述lncRNA的转录本的序列结构和用于扩增该转录本序列的引物序列,同时公开了lncRNA可以作为结直肠癌诊断和预后效果的标记物,该lncR...
- 邓萱关明许笑张心菊吴之源
- 文献传递
- 一种参与人结直肠癌增殖和耐药的lncRNA及其应用
- 本发明开创性地发现一种参与人结直肠癌增殖和耐药的lncRNA其应用,并具体公开了所述lncRNA的转录本的序列结构和用于扩增该转录本序列的引物序列,同时公开了lncRNA可以作为结直肠癌诊断和预后效果的标记物,该lncR...
- 邓萱关明许笑张心菊吴之源
- 原发性血小板增多症及原发性骨髓纤维化患者MPL515突变的筛查被引量:3
- 2012年
- 目的建立一种能够简便、灵敏地检测原发性血小板增多症(ET)及原发性骨髓纤维化(PMF)患者外周血MPLS15突变的方法,探讨我国ET和PMF患者的MPLS15突变频率及JAK2V617F突变情况。方法选取2008至2010年复旦大学附属华山医院ET患者261例和PMF患者25例,提取患者外周血DNA。使用SYBRGreenI荧光定量PCR检测标本的JAK2V617F突变。分别采用针对MPLS15wt、MPLW515L和MPLW515K这3种基因型设计的Taqman探针,使用荧光定量PCR法检测MPLS15突变,并通过T—A克隆挑取纯克隆测序确认。结果在261例ET患者中,检测到JAK2V617F突变119例(45.6%),MPLS15突变7例(2.7%),包括5例MPLW515L突变、1例MPLW515K突变和1例MPLW515L+K突变。25例PMF患者中,JAK2V617F突变为10例(40.0%),MPL515突变为3例(12.0%),包括1例MPLW515L突变和2例MPLW515L+K突变。1例MPLW515K突变的ET患者同时伴有JAK2V617F突变。结论JAK2V617F是ET和PMF的分子标志物,而在JAK2V617F阴性的病例中,MPLS15突变则是一个重要、有益的补充。
- 许笑张心菊吴之源许小平陈波斌胡婷婷陈宇明关明
- 关键词:血小板增多骨髓纤维化JANUS激酶2突变
- 采用多重PCR结合高分辨熔解曲线法单管同时检测JAK2V617F突变和JAK2外显子12突变被引量:2
- 2014年
- 目的 建立能单管同时检测JAK2 V617F突变和外显子12突变的方法.方法 以PC-3细胞株DNA为野生型对照,分别以HEL细胞株DNA和含有JAK2外显子12突变的质粒作为JAK2V617F突变和外显子12突变的阳性对照,采用多重PCR扩增不同DNA片段,并结合高分辨熔解曲线法建立检测JAK2V617F和外显子12突变的联合检测体系.同时选取42例真性红细胞增多症患者,分别采用上述方法和常规方法在外周血中检测JAK2的2种突变.结果 采用多重PCR结合高分辨熔解曲线法成功建立了JAK2突变联合检测体系,能够同时检测JAK2V617F突变和外显子12突变,2种突变的检测灵敏度皆可达5%,2种扩增片段的溶解温度(Tm)的批间及批内变异系数都小于0.01%.42例真性红细胞增多症患者中,发现37例携有JAK2V617F突变,在5例JAK2V617F突变阴性真性红细胞增多症病例中检出2例JAK2外显子12突变.与常规方法相比,结果符合率达到100%.2例JAK2外显子12突变经克隆测序确认突变类型为H538K539delinsL和F537-I546dul10+F547L.结论 该方法可同时在外周血中检测出JAK2的2种突变,将有助于对骨髓增殖性肿瘤尤其是真性红细胞增多症的分子诊断.
- 许笑陈宇明吴之源张心菊胡婷婷张瑾关明
- 关键词:JANUS激酶2突变多重聚合酶链反应高分辨率熔解曲线
- 分子诊断常用技术50年的沿革与进步被引量:8
- 2014年
- 分子诊断技术即是利用分子生物学方法对人类及病原体的各类遗传物质进行检测,以帮助对疾病进行诊断。自液相杂交技术诞生以来,分子诊断已走过了50年的历程。本文将以技术原理出发对分子诊断技术进行归类与评价,以对目前临床常用技术的沿革进行回顾,并从技术层面对分子诊断的未来进行展望。
- 吴之源张晨关明
- 关键词:分子诊断分子杂交核酸序列聚合酶链反应
- 一种检测新型冠状病毒的LAMP引物组合和试剂盒
- 本发明公开了一种检测新型冠状病毒的LAMP引物组合和试剂盒,该引物组合选自如SEQ ID NO:3~SEQ ID NO:6所示的引物组1、如SEQ ID NO:7~SEQ ID NO:10所示的引物组2、如SEQ ID ...
- 邢志芳关明曹国君康志华许笑吴之源马艳春秦欢欢许育
- 文献传递