河南大学细胞与分子免疫学实验室
- 作品数：14 被引量：42H指数：4
- 相关机构：华中科技大学同济医学院郑州大学基础医学院干细胞研究中心郑州大学基础医学院更多>>
- 发文基金：河南省杰出人才创新基金国家自然科学基金河南省医学科技创新人才工程项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- γδ+IL-17+细胞在自身免疫性糖尿病中的作用机制研究
- 研究背景及目的:Th17细胞及其细胞因子IL-17在自身免疫性糖尿病中的作用目前尚不清楚,本研究探讨了细胞因子IL-17及其产生细胞在自身免疫性糖尿病NOD小鼠中的作用及其机制.
- 韩根成王仁喜陈国江王建安徐若男冯健男王立燕李霞郭仁锋沈倍奋黎燕
- 文献传递
- NF-κB在抗人DR5抗体诱导白血病细胞系凋亡中的作用被引量：2
- 2010年
- 观察NF-κB在抗人DR5抗体mDRA-6诱导白血病细胞凋亡中的激活,探讨NF-κB在抗人DR5抗体诱导白血病细胞凋亡中的作用。提取细胞蛋白,间接ELISA法检测NF-κB的激活;预先应用NF-κB抑制剂孵育细胞1h,MTT及流式细胞术检测mDRA-6对白血病Jurkat和U937细胞系的凋亡率。结果:mDRA-6作用Jurkat和U937细胞15min,激活形式NF-κB(NF-κBP65)明显增高;10mg/L的mDRA-6作用Jurkat和U937细胞4h,流式细胞术检测细胞凋亡率分别为56.63%和34.14%,而预先用15μmol/L的NF-κB抑制剂处理细胞1h,mDRA-6所致的Jurkat和U937细胞凋亡率分别增加至75.51%和58.01%。mDRA-6诱导白血病Jurkat和U937细胞凋亡过程中激活NF-κB,激活的NF-κB抑制mDRA-6的肿瘤细胞凋亡诱导作用。
- 李淑莲王靖王赟蔡静马远方
- 关键词：核因子ΚB凋亡白血病细胞
- 体外诱导人骨髓间充质干细胞向多巴胺神经元分化的研究被引量：6
- 2007年
- 通过体外诱导人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs)向多巴胺(dopamine,DA)神经元分化,探讨人BMSCs来源的DA神经元的功能特征及其分化机制,为临床上细胞移植替代治疗诸如帕金森氏病(parkinson’sdisease,PD)等神经精神性疾病提供一种理想的细胞来源。通过密度梯度离心获取人骨髓中的单个核细胞,贴壁培养纯化BMSCs。50μmol/L脑源性神经营养因子(brain derivedneurotrophy factor,BDNF),10μmol/Lforskolin(FSK)和10μmol/LDA联合对BMSCs进行诱导。电子显微镜观察诱导2周后细胞是否具有神经元的超微结构特点;免疫细胞化学染色和RT-PCR检测DA神经元分化过程中的标志物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达以及转录因子Nurr1、Ptx3和Lmx1b的表达;高效液相色谱(highperformance liquid chromatogram,HPLC)检测诱导2周后的细胞多巴胺的释放水平。结果表明,诱导2周后,电镜下细胞胞浆中有大量密集的呈扁平囊状的粗面内质网及其间的一些游离核糖体以及神经微丝的形成。RT-PCR结果显示NSE(neuron specificenolase)、Nurr1、Ptx3、Lmx1b和TH的mRNA均有表达;免疫细胞化学染色结果表明诱导2周后TH阳性细胞(24·80±3·36)%的表达较诱导3d后(3·77±1·77)%明显提高(P<0·01);HPLC检测到诱导2周后的细胞DA释放水平[(1·22±0·36)μg/mL(n=6)]高于未经诱导的细胞[(0·75±0·22)μg/mL(n=6)(t=-2·79,P=0·038)]。由此得出,BDNF、FSK和DA可以在体外诱导人BMSCs向DA神经元分化,并具有DA神经元的功能特征,是临床用于治疗神经精神性疾病的理想细胞来源。
- 柴立辉吴素霞鄢文海马远方
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化多巴胺神经元脑源性神经营养因子
- 绒毛中TRAIL及其受体的表达与不明原因反复自然流产的相关性的探讨
- 2010年
- 目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL及其受体在不明原因早期反复自然流产患者(URSA)绒毛中的表达及二者的相关性。方法选择实验组妊娠45～60 d的URSA患者15例,对照组健康人工流产15例。两组分别取绒毛组织采用免疫组化法检测TRAIL及其受体的表达,进行方差分析和t检验比较两组绒毛组织中TRAIL及其受体蛋白表达水平的差异。结果实验组绒毛组织中TRAIL及其受体DR4、DR5蛋白表达较强,而诱骗受体DcR1及DcR2蛋白与正常对照相比表达较少,P值均小于0.05。结论TRAIL及其受体可能是造成自然流产的机制之一。
- 白慧玲李秀敏赵粤萍徐志喜马远方
- 关键词：DR4DR5反复流产绒毛
- 抗DR5单抗增强顺铂诱导HeLa细胞凋亡作用的研究被引量：4
- 2007年
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)主要通过死亡受体5(death recep- tor,DR5)诱导肿瘤细胞凋亡。本文旨在探讨顺铂对HeLa细胞表面DR5分子表达影响及抗DR5单抗mDRA-6对顺铂诱导HeLa细胞凋亡增强作用。用间接免疫荧光染色结合流式细胞术分析DR5分子表达;MTT法检测HeLa细胞毒作用;用AnnexinV/PI双染试剂盒检测细胞凋亡率;荧光显微镜观察凋亡细胞的形态学改变。结果:正常HeLa细胞表面DR5表达量为30.01%,顺铂不能上调HeLa细胞表面DR5表达;mDRA-6可以明显提高顺铂对HeLa细胞的细胞毒作用,且存在剂量效应关系。IC_(50)值约为12.5μg/ml。研究结果表明,mDRA-6能够明显增强顺铂对HeLa细胞的细胞毒及细胞凋亡作用。
- 赵粤萍贾彩云马远方沈倍奋
- 关键词：MDRA-6DR5顺铂细胞毒凋亡
- 水流动力学进行基因免疫制备单克隆抗体
- 目的通过水流动力学注射方法免疫小鼠,制备特异性单克隆抗体,为单抗的制备提供一条新的路径。方法将DR5基因克隆pcDNA3.0载体中,测序鉴定正确。分别通过水流动力学注射法和常规肌肉注射方法免疫小鼠,通过免疫组化和West...
- 袁艳军刘峰涛马远方
- 关键词：基因免疫单克隆抗体
- 文献传递
- 死亡受体5在肝癌细胞系及肝细胞系表面的表达被引量：9
- 2006年
- 目的:利用抗死亡受体5(DeathReceptor5)单克隆抗体(mAb),检测DR5在肝癌细胞系的表达。方法:sDR5免疫BALB/c小鼠,小鼠脾细胞与SP2/0-Ag14细胞在50%PEG条件下融合,获得能够分泌抗DR5单克隆抗体的杂交瘤细胞株,利用杂交瘤细胞株分泌的抗DR5特异性单克隆抗体,采用流式细胞仪技术测定抗DR5mAb结合至细胞表面的量来分析死亡受体DR5在肝癌细胞系及肝细胞表面的表达情况。结果:不同细胞表面DR5的表达水平分别为:人肝癌SMMC7721细胞95%、人肝细胞癌HepG2细胞40%,人正常肝细胞HL-770220.3%。结论:抗DR5mAb能够特异性与DR5结合。DR5在人肝癌SMMC7721细胞高水平表达,人肝细胞癌HepG2细胞中度表达,人正常肝细胞HL-7702细胞低表达。该特异性mAb在研究TRAIL受体的生物功能上是一种有用的工具,对研究DR5在组织和细胞系表达十分有价值。
- 张军马远方刘广超吴雄文
- 关键词：死亡受体5单克隆抗体
- 尼美舒利对人小细胞肺癌细胞株NCL-H446增殖的抑制作用被引量：2
- 2006年
- 目的研究尼美舒利对人小细胞肺癌细胞株NCL-H446增殖的抑制作用,为临床治疗提供实验室依据。方法常规培养人小细胞肺癌细胞株NCL-H446,MTT法检测尼美舒利的细胞毒性作用;倒置显微镜与Hoechst33258荧光染色观察细胞形态学变化;流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率。结果MTT显示尼美舒利呈剂量与时间依赖性抑制人小细胞肺癌细胞株NCL-H446的增殖;倒置显微镜下可见细胞变小、变圆、皱缩、部分细胞脱落飘浮于培养基中。荧光显微镜下可见细胞核染色质致密浓缩、荧光强度增强、染色质边集、核破碎,凋亡小体形成等。FCM检测结果表明尼美舒利既可诱导NCL-H446细胞凋亡,又可引起坏死,400μmol/L的尼美舒利作用细胞24h后,细胞早期凋亡率为7.65%,晚期凋亡率为29.76%,细胞坏死占23.9%。结论尼美舒利对体外培养的人小细胞肺癌细胞株NCL-H446有较显著的抑制作用,该作用与诱导细胞凋亡与坏死有关。
- 刘英杰马远方刘广超吴雄文
- 关键词：尼美舒利细胞凋亡
- 间断低剂量二乙基亚硝胺诱导C57BL/6J小鼠肝癌模型被引量：6
- 2019年
- [目的]建立C57BL/6J小鼠诱发性肝癌模型。[方法]C57BL/6J小鼠40只,随机分为4组:对照组、DEN1组、DEN2组、DEN3组。DEN1组及DEN3组小鼠于实验第1天腹腔注射二乙基亚硝胺溶液,剂量为20 mg/kg,对照组和DEN2组小鼠腹腔注射同体积PBS溶液。实验第5周,DEN2组和DEN3组小鼠的饮水中添加浓度为10 mg/L的二乙基亚硝胺,连续饮用4周后,改为正常饮水;实验第16周,处死各组动物,计算小鼠肝脏指数,观察各组小鼠肝脏大体及镜下改变。[结果]对照组和DEN1组小鼠肝脏无肉眼可见的癌结节,肝癌发生率为0;DEN2组有2只小鼠发现肝脏有单个微小结节,肝癌发生率为20%;DEN3组小鼠肝脏均有大小不等的多个白色癌结节,肝癌发生率为100%,病理组织切片显示为肝细胞癌。[结论]间断低剂量二乙基亚硝胺能够快速诱导C57BL/6J小鼠肝细胞癌模型。
- 张舒曼王源李淑莲
- 关键词：C57BL/6J小鼠二乙基亚硝胺肝癌模型
- 抗人DR5功能性抗体的研制
- 2007年
- 目的:研制抗人DR5功能性单克隆抗体。方法:采用杂交瘤技术制备抗人DR5的mAb;MTT方法筛选分泌有细胞毒活性mAb的杂交瘤细胞;亲和层析方法纯化mAb;夹心ELISA法测定mAb亚型;Western blotting和斑点ELISA法检测mAb的抗原表位类型;间接ELISA法检测mAb的特异性;观察抗体诱导细胞凋亡的形态学特征。结果:获得1株合成分泌有细胞毒活性抗体的杂交瘤细胞,其分泌的mAb命名为mDRA-6,为Ig G1,其抗原表位类型为构象表位,其特异性识别hDR5,与hFas、hDR4等无交叉反应。mDRA-6对Jurkat细胞具有细胞毒作用,经mDRA-6处理后,Jurkat细胞表现出细胞凋亡的形态学特征。结论:获得一种抗人DR5功能性抗体mDRA-6,在以TRAIL/DR5系统进行肿瘤治疗和探讨DR5的功能结构域研究方面具有广泛应用前景。
- 刘广超李淑莲卢峰白慧玲张军杜耀武赵粤萍都景芳马远方
- 关键词：死亡受体5细胞凋亡单克隆抗体TRAIL
