汕头大学医学院细胞生物学与遗传学教研室
- 作品数：108 被引量：285H指数：10
- 相关作者：徐锡金许锦阶付玉才邱少汕刘艳敏更多>>
- 相关机构：暨南大学环境学院厦门大学医学院中山大学中山医学院法医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程农业科学更多>>
- 能量限制通过激活沉默信息调节因子2相关酶1信号通路抑制小鼠卵泡发育和消耗被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨能量限制(CR)是否通过激活沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)信号通路调控雌性小鼠卵泡发育和卵巢寿命。方法:雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组、CR组和SIRT1激活剂(SRT1720)干预组;观察3组摄食量、体质量变化;26周后取小鼠卵巢、内脏脂肪称重,卵巢组织切片经苏木精-伊红染色,计数不同发育阶段的各级卵泡数;用Western'blot检测卵巢中SIRT1、FOXO3a、NRF1、SIRT6和p53的蛋白表达水平。结果:SRT1720和CR组体质量、卵巢及内脏脂肪重量相似,但均比对照组轻(P<0.05)。3组卵巢中卵泡总数相似。SRT1720和CR组存活卵泡数和闭锁卵泡数相似,但存活卵泡数均比对照组多(P<0.05),闭锁卵泡数均比对照组少(P<0.05)。SRT1720和CR组原始卵泡数、窦状卵泡数和黄体数均相似,但原始卵泡数均比对照组多(P<0.05),窦状卵泡数和黄体数均比对照组少(P<0.05)。Western blot显示SRT1720和CR组卵巢SIRT1、FOXO3a、NRF1、SIRT6和p53蛋白表达水平相似,且SIRT1、FOXO3a、NRF1和SIRT6蛋白水平均高于对照组(P<0.05),而p53蛋白水平均低于对照组(P<0.05)。结论:CR通过激活SIRT1信号抑制成年雌性小鼠原始卵泡的激活以及卵泡发育与消耗,保持卵巢中卵泡的储备量,从而延长卵巢寿命。
- 刘炜娟罗丽莉傅玉才张杏梅王娜周晓玲
- 关键词：卵泡发育小鼠
- PGC-1α与非酒精性脂肪肝病关系的研究进展被引量：3
- 2009年
- 非酒精性脂肪肝病是代谢综合征在肝脏的表现,其对公众健康的危害受到普遍关注。胰岛素抵抗,线粒体损伤,脂代谢紊乱都参与了非酒精性脂肪肝的形成。过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)是一种核转录辅激活因子,它参与了机体的能量代谢。此文综述了它对胰岛素抵抗,线粒体损伤,脂代谢紊乱等非酒精性脂肪肝病形成机制方面的作用。PGC-1α有可能成为治疗非酒精性脂肪肝病药物的新靶点。
- 方诗蓉傅玉才周小辉
- 关键词：PGC-1Α非酒精性脂肪肝病胰岛素抵抗线粒体
- 酵母双杂交诱饵蛋白LASS1融合表达质粒的构建及鉴定
- 2008年
- 目的构建酵母双杂交系统诱饵蛋白大鼠LASS1融合表达质粒,为进一步筛选大鼠脑神经元内与LASS1p相互作用的蛋白奠定基础。方法应用PCR方法获得大鼠LASS1基因2个片段,分别克隆入酵母双杂交系统诱饵蛋白质粒载体pGBKT7,转染酵母菌AH109并检测重组质粒的自激活现象及毒性。利用Western印迹检测重组质粒在AH109的表达情况。结果LASS1基因的PCR产物片段大小分别为Flag(111bp)、Slag(109bp);Western印迹结果表明2个重组质粒表达的蛋白均可以与抗c-Myc抗体在22kU处特异性反应;重组质粒转化酵母后无自激活作用。结论重组质粒pGBKT7-Flag、pGBKT7-Slag均能够在AH109内正确表达,可作为酵母双杂交系统诱饵蛋白使用。
- 刘居理傅玉才许铭炎许锦阶
- 关键词：酵母双杂交诱饵蛋白
- TGF-β及EGF信号对溶血磷脂酸诱导口腔鳞癌细胞增殖的影响
- 2014年
- 目的:探讨转化生长因子(TGF)及表皮生长因子(EGF)信号对溶血磷脂酸(LPA)诱导口腔鳞癌细胞增殖的影响。方法:口腔鳞癌SAS细胞接种于96孔板中,以含不同浓度(0、1、5和10μmol/L)LPA的无血清DMEM分别处理细胞24和48 h后采用CCK-8法检测细胞增殖;免疫印迹检测10μmol/L LPA分别处理细胞0、0.5、2和4 h后对TGF-β下游信号分子Smad2的影响;应用不同浓度(10、20和50μg/mL)的TGF-β阻断抗体1D11和100 nmol/L EGFR阻断剂AG1478分别预孵育细胞2和4 h后,再加入LPA诱导,检测SAS细胞增殖情况。结果:LPA呈剂量效应和时间效应诱导SAS细胞增殖,LPA浓度增加到10μmol/L时SAS细胞数是对照组的近1.7倍(P<0.01),细胞在LPA处理24 h后增殖速率较对照组增加22%(<0.05)。LPA可活化TGF-β,但TGF-β阻断抗体1D11并不能阻断LPA诱导的SAS增殖;相反,EGFR阻断剂AG1478能够抑制LPA诱导的SAS增殖,抑制率达到近77%。结论:LPA诱导的口腔鳞癌SAS细胞的增殖与EGFR活化信号有关,而与LPA诱导的TGF-β活化无关。
- 周小琼邓小玲傅玉才许铭炎
- 关键词：口腔鳞癌溶血磷脂酸转化生长因子表皮生长因子受体
- 烟酸受体HM74A信号与2型糖尿病的相关性
- 2013年
- 目的观察外周血白细胞(WBC)中HM74A表达与2型糖尿病(T2DM)的相关性,并探讨HM74A信号对炎症因子的调节作用。方法收集健康人(对照组)与T2DM患者静脉血,提取mRNA,利用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),检测WBC中HM74A、核因子-κB(NF-κB)、白细胞介素(IL)-1基因表达水平,分析对照组与T2DM组HM74A及其下游因子NF-κB、IL-1βmRNA表达的差异性。结果 RT-PCR结果显示,T2DM组HM74A、NF-κB、IL-1β基因表达水平显著高于对照组(P<0.05)。相关性分析结果显示WBC中HM74A与其下游因子NF-κB、IL-1β的表达量呈正相关(r=0.402,r=0.451,均P<0.05);HM74A、NF-κB与血糖呈正相关(r=0.179,r=0.358,均P<0.05)。结论 T2DM患者外周血WBC中HM74A及炎症因子NF-κB、IL-1βmR-NA表达量显著增高,提示HM74A信号可能参与T2DM的发生和发展,且对炎症因子有一定的调节作用。
- 刘枫秀魏炽炬赖玉林傅玉才许文灿
- 关键词：2型糖尿病核因子-ΚB白细胞介素-1Β胰岛Β细胞
- N-叔丁基-α-苯基硝酮对大鼠脊髓损伤后神经生长因子表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的：观察N-叔丁基-α-苯基硝酮（PBN）对脊髓损伤大鼠脊髓组织和血清中神经生长因子（NGF）蛋白表达的影响。方法174只健康雌性Sprague-Dawley大鼠，体质量180～220 g，随机分为正常对照组（n=54）、生理盐水（NS）对照组（n=60）和PBN组（n=60），每时间段6只。鞘内置管后，采用自行改制的O型NYU装置建立大鼠脊髓损伤模型。PBN组鞘内注射PBN 3 mg （15μl）， NS对照组注射NS 15μl，术后30 min第1次注射，连续注射7 d，每天1次。术前3 d和1 d，以及术后1 d、5 d、10 d、15 d、20 d、25 d、30 d和35 d对NS对照组和PBN组进行Basso-Beattie-Bresnahan （BBB）运动功能评价，并在术后1 h、12 h、24 h、48 h、3 d、7 d、14 d和21 d各组取血清和脊髓组织测定NGF水平。结果术后血清中NGF蛋白含量出现明显改变，而脊髓组织中含量变化不明显。血清NGF/总蛋白比值48 h时达到峰值， NS对照组（0.92%±0.02%）与PBN组（0.77%±0.05%）相比有显著性差异（P=0.021）。两组大鼠BBB评分在伤后第10天开始升高，PBN组恢复程度明显好于NS对照组（P〈0.01）。结论 PBN能有效降低脊髓损伤大鼠血清中NGF蛋白的表达，促进神经功能恢复。
- 刘少辉刘伟邱少汕徐锡金
- 关键词：脊髓损伤神经生长因子
- 抑制性消减杂交法筛选植入人发角蛋白与单纯脊髓损伤大鼠基因表达的差异被引量：1
- 2006年
- 目的:采用抑制性消减杂交筛选植入人发角蛋白大鼠损伤脊髓基因性差异表达。方法:实验于2004-11在汕头大学中心实验室进行。分别从植入人发角蛋白损伤组与单一损伤对照组4thw组织中提取mRNA,反转录成双链cDNA,经RsaI酶切、接头连接、两次消减杂交和两次抑制性聚合酶链扩增,而后将消减cDNA产物进行T/A克隆和测序分析。结果:所获植入人发角蛋白脊髓损伤组织差异表达基因的消减cDNA产物散布在280～800bp范围。经蓝白筛选和酶切鉴定,共得到232个阳性克隆。对其中20个做测序分析获得了氨基酸转运蛋白系统A2(Ata2)、细胞色素氧化酶Ⅲ(COXⅢ)、抗过氧化物蛋白5(Prd5)、Tap1蛋白和半胱氨酸蛋白酶抑制剂(Cst3)等5个表达蛋白。结论:prd5、Ata2和COXⅢ分别通过参与脊髓损伤后抗氧化损伤过程,起到抑制自由基、兴奋性氨基酸的产生,减轻Ca离子紊乱的程度,降低了继发性损害对脊髓组织的二次损伤程度;而Tap1蛋白和Cst3则参与人发角蛋白的降解过程。
- 徐锡金林新华霍霞朴仲贤朴英杰
- 关键词：脊髓损伤角蛋白基因人发角蛋白基因表达
- Sirtuin基因家族与心血管疾病被引量：1
- 2010年
- 随着人口老龄化的到来,心血管疾病成为目前全世界最常见的疾病之一,探索预防和治疗这一年龄相关的慢性疾病的新方法越来越引起人们的重视。哺乳动物sirtuin基因家族,具有烟酰胺腺苷酸核酸(nicotimideadenosine dinucleotide,NAD)依赖的组蛋白/非组蛋白脱乙酰基酶活性及二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)核糖转移酶活性,能够直接和间接影响心血管系统,因而被认为是心血管疾病治疗的一个激动靶点。随着对sirtuin研究的深入,人们将逐渐揭示sirtuin家族在心血管系统中的作用,有望开发出sirtuin特异性激动剂并将运用于心血管疾病的预防和治疗中。
- 林锐波王伟傅玉才
- 关键词：心血管疾病动脉硬化基因衰老
- 白藜芦醇-Sirt1-Foxo1调控通路对缺氧心肌细胞的保护作用被引量：10
- 2009年
- 目的研究白藜芦醇-Sirt1-Foxo1调控通路对缺氧心肌细胞的保护作用。方法将大鼠心肌细胞株H9C2培养48h后,随机分为5组,即20μmol/L白藜芦醇(resveratro,lRes)干预组、二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)对照组、40mmol/L尼克酰胺(nicotinamide,Nam)干预组、Nam空白对照组及正常对照组。培养24h后终止培养,用RT-PCR法和免疫细胞化学染色法检测Sirt1、Foxo1、p27、BimmRNA及其蛋白表达水平的变化;用TUNEL法及流式细胞仪(flowcytometer,FCM)分析细胞凋亡和细胞周期。结果20μmol/LRes干预组可使Sirt1mRNA及SIRT1蛋白表达的水平增加。Sirt1可通过抑制Foxo1mRNA的转录活性而调节其下游基因p27及Bim的表达。SIRT1的高表达可使细胞周期延长,细胞凋亡减少。结论Res干预可使SIRT1表达增加。Sirt1可能通过对Foxo1及其下游基因Bim、p27的调控,延长心肌细胞的细胞周期,减少其凋亡。
- 王伟陈纯娟傅玉才王欣余伟
- 关键词：白藜芦醇SIRT1FOXO1心肌细胞
- 淫羊藿甙对大鼠早期卵巢卵泡发育和卵母细胞凋亡影响的初步研究被引量：18
- 2007年
- 目的探讨淫羊藿甙对早期卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响。方法用淫羊藿甙对受孕11.5d大鼠灌胃[100mg/(kg·d)]直至生产,分别取淫羊藿甙灌胃组(试验组)和空白对照组中出生2d、4d、8d龄新生大鼠卵巢,用苏木素-伊红(hematoxylin-eoxin,HE)染色观察不同发育阶段卵泡比例,TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-End Labeling)荧光染色检测卵巢内卵母细胞凋亡变化,免疫组化染色观测caspase-3的定位和表达水平。结果在试验组新生大鼠,2d龄卵巢卵母细胞巢内卵母细胞比例增高,原始卵泡比例下降;4d龄卵巢中原始卵泡比例显著增高,发育卵泡比例降低;8d龄卵巢各不同发育阶段卵泡比例与对照组相一致;试验组2d卵巢内TUNEL阳性率降低;Caspase-3主要在卵母细胞巢和原始卵泡的卵母细胞中表达,2d卵巢表达水平高于4d卵巢。结论淫羊藿甙能延缓新生大鼠卵母细胞巢破裂,抑制原始卵泡的发育启动,减少卵泡的消耗;能降低2d龄卵巢卵母细胞的凋亡率,抑制卵母细胞凋亡,增加原始卵泡池的储备量。
- 黄菊罗丽莉傅玉才钱元恕许锦阶
- 关键词：卵母细胞卵泡发育CASPASE-3TUNEL
