南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系
- 作品数:217 被引量:506H指数:10
- 相关作者:沈树满麦荣嘉雷子庆王琼胡佳林更多>>
- 相关机构:中山大学中山医学院寄生虫学教研室中山大学中山医学院中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 大肠杆菌ER2566表达的重组Thanatin的敏感抗菌活性被引量:2
- 2010年
- 目的原核表达抗菌肽,纯化并鉴定其抗菌活性。方法用人工合成的方法合成编码thanatin21肽的DNA序列(并使用了大肠杆菌的偏爱密码子),克隆入pTYB11质粒,转化大肠杆菌ER2566。thanatin与内含肽融合表达,内含肽是一种具有自剪切功能能够自动将目标蛋白及内含肽分离的蛋白剪切元素。内含肽-thanatin以可溶性蛋白的方式表达,存在于细胞裂解液的水相中,将细胞裂解液过几丁质亲和层析柱,内含肽-thanatin能够特异地结合到几丁质柱上。在层析柱上用DTT/半胱氨酸缓冲液在4℃切割过夜,切割下来的thanatin用洗脱液洗脱。结果在最先洗脱下来的4ml洗脱液中蛋白浓度达到245μg/ml。纯化后的thanatin具有很好的抗革兰氏阴性菌以及真菌的能力,如弗氏志贺菌(Shigella flexneri)、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)、宋内志贺菌(Shigella snnei)、大肠杆菌O157(Escherichia coli O157)、产毒大肠杆菌(toxinproducing Escherichia coli)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、白色念珠菌(Candida albicans),尤其在抗耐药菌方面表现出显著优势,如耐药肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)及产超广谱β内酰胺酶(Extended-Spectrum β-Lactamases,ESBLs)大肠杆菌。重组Thanatin对80株产ESBLs耐药大肠杆菌及30株敏感的大肠杆菌所产生的抑菌圈的大小没有显著性差异(P>0.05,t-test),具有相同的抗菌能力。结论在大肠杆菌ER2566中表达的thanatin对革兰氏阴性菌尤其是临床耐药菌有很好的抗菌活性,克服了抗生素耐药性的问题。Thanatin具有开发成抗革兰氏阴性菌药物的潜力。
- 王沛珍顾金保罗军彭鸿娟
- 关键词:THANATIN原核表达抗菌活性
- 转基因番茄及其核酸检测技术研究进展被引量:10
- 2009年
- 番茄作为重要的GMCs/GMF(genetically modified crops/food,转基因作物/食品)之一,在我国已被列入第一批实施标识管理的农业GMOs(genetically modified organisms,转基因生物)目录。通过对全球转基因番茄及其核酸检测技术研究现状的分析,阐述了转基因番茄的主要研究方向是研发具有延熟、抗虫等优良性能的番茄新品系,应用于疫苗以及其他药用性蛋白的生物反应器研究;总结了全球已获准上市和在研的重要转基因番茄品系的基因表达盒信息及其核酸检测研究数据;剖析了在转基因番茄核酸检测技术研究中尚存在的如关键性技术标准化以及标准物质缺乏等问题,并提出研究展望。希望为建立与国际接轨的转基因番茄量值溯源传递关键技术体系提供参考。
- 顾晓敏黎事伦胡良勇麦荣嘉周伦彬周晓红
- 关键词:生物工程转基因番茄核酸检测技术
- 白纹伊蚊对登革热病毒易感性研究被引量:1
- 2012年
- 白纹伊蚊(Aedes albopictus)是登革热的主要传播媒介之一,分布于世界各地。白纹伊蚊的易感性主要涉及白纹伊蚊和登革病毒之间的相互作用。该文主要从遗传效应和环境因子方面对白纹伊蚊种群遗传、生理遗传、环境因素对虫媒病毒传播的影响及控制易感性的基因等研究进行综述。
- 朱碧青郑学礼
- 关键词:白纹伊蚊登革热病毒易感性
- 广州管圆线虫一期幼虫的分离纯化及其抗原分析
- 目的建立广州管圆线虫一期幼虫的分离纯化方法,分析其抗原特性及血清学诊断价值。方法分别用贝尔曼漏斗法、蔗糖离心浮选法及改良贝尔曼法联合胰酶消化法从大鼠粪便中分离纯化一期幼虫;用SDS-PAGE和Western blotti...
- 刘敏顾金保李华陈晓光詹希美
- 关键词:广州管圆线虫免疫诊断
- 文献传递
- 刚地弓形虫感染对宿主细胞信号转导的影响
- 2011年
- 刚地弓形虫在入侵和寄生于宿主细胞,引起急性与慢性感染的过程中,对宿主细胞进行精细的、整体的调控,在激发和抑制宿主免疫反应之间保持一个精细的平衡,保证弓形虫在宿主细胞内成功地生存增殖,并有机会传播给终末宿主;在此过程中宿主细胞的信号转导发生广泛的应激变化,在弓形虫入侵、寄生过程中及与弓形虫-宿主相互关系中起着重要作用。本文拟从5个方面综述弓形虫感染对宿主细胞信号通路的调控作用:①弓形虫分泌蛋白调控宿主细胞信号转导,②弓形虫调节宿主天然免疫、保护性免疫相关的细胞信号通路,③弓形虫调控与抗凋亡及细胞周期相关的宿主细胞信号转导,④弓形虫调节宿主细胞钙离子信号通路,⑤弓形虫调节与细胞结构重组相关的宿主细胞信号转导。
- 罗济璇朱国辉吴永坚彭鸿娟
- 关键词:刚地弓形虫入侵宿主细胞细胞信号
- 刚地弓形虫缓殖子期特异性抗原BSR4的重组表达和免疫反应性分析
- 目的:克隆表达刚地弓形虫ME49株BSR4基因,并检测其免疫反应性。方法:提取弓形虫ME49株速殖子DNA;根据弓形虫ME49株BSR4基因设计引物,利用PCR扩增得到BSR4基因产物、扩增产物经双酶切后分别连接入原核表...
- 罗蓝妮阮嘉雯吴焜陈晓光
- 文献传递
- 弓形虫利用宿主细胞资源合成磷酸化蛋白的研究
- 刚地弓形虫是一种广泛分布的专性细胞内寄生原虫,它几乎可以寄生于所有的有核细胞。弓形虫以纳虫泡(parasitophorous vacuole,PV)的形式寄生于宿主细胞内。纳虫泡随着弓形虫的入侵而开始逐渐形成,其膜(pa...
- 陈艾媛魏海霞彭鸿娟
- 文献传递
- 刚地弓形虫低水平DNA甲基化的检测及结果
- DNA甲基化是指在甲基化酶(DNA methyltransferase,DNMT)的作用下,将1个甲基添加在DNA分子的碱基上。DNA甲基化可引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从...
- 魏海霞陈艾媛彭鸿娟
- 白纹伊蚊全球迁徙扩张的现状与展望
- 白纹伊蚊又称亚洲虎纹,是当今世界上最具侵袭性的蚊种,更是近期引起中非、意大利等地的基孔肯雅热的罪魁祸首。近30年来白纹伊蚊已经从其发源地亚洲东南部地区扩张至全球除南极洲以外的四个大洲,在多个地区已经替代埃及伊蚊成为当地的...
- 徐家宝陈晓光
- 关键词:白纹伊蚊物种入侵虫媒传染病
- 文献传递
- 快速高效植物瞬时表达的实验室烟草无土栽培体系的构建被引量:3
- 2012年
- 目的构建适用于快速高效植物瞬时表达系统的实验室烟草无土栽培体系。方法优化烟草的无土栽培条件,基于Geminivirus新型植物高效瞬时表达系统,观察烟草品种、侵染时机、侵染工程菌浓度、侵染后叶片采收时间对无土栽培烟草表达绿色荧光蛋白(GFP)的影响,以Western blot和ELISA分析GFP表达情况。结果烟草无土培育的最佳条件为:光照强度9000LX/层,光照时间16 h/d,日/夜温度28/21℃,相对湿度80%。侵染工程菌的最佳D600为0.8;叶片采收最佳时间为侵染后4 d;本明烟和豫烟5号最佳侵染时机分别为第6周和第5周;工程菌pBYGFPDsRed.R/LBA4404侵染的本明烟和豫烟5号均能高效表达GFP;豫烟5号的平均生物量高于本明烟。结论基于人工气候箱成功构建了实验室烟草无土栽培体系,并可实现GFP在本明烟和豫烟5号的快速高效表达。
- 莫倩珍麦荣嘉杨志晓陈敏芳杨铁钊赖华芳杨培梁陈强周晓红
- 关键词:烟草无土栽培绿色荧光蛋白