西安交通大学医学院免疫学与病原生物学系
- 作品数：106 被引量：495H指数：12
- 相关作者：袁育康范桂香董晓慧杨珺华郭娜更多>>
- 相关机构：西安医学院医学技术系陕西中医药大学临床医学系西北民族大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 结核杆菌DnaA蛋白的原核表达及免疫血清的制备和检测被引量：3
- 2011年
- 目的在大肠杆菌中表达重组结核杆菌DnaA蛋白,对表达产物进行纯化、鉴定后制备DnaA蛋白特异性免疫血清并进行Western blot检测。方法以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv基因组为模板,PCR扩增DnaA基因,构建DnaA原核表达质粒pET-DnaA,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,非变性条件下镍琼脂糖凝胶亲和层析纯化重组蛋白pET-DnaA,并用Western blot检测和鉴定重组蛋白,用纯化得到的重组蛋白制备特异性免疫血清。结果成功构建了结核杆菌pET-DnaA重组质粒,并在大肠杆菌中得到高效表达;用分离纯化后的重组蛋白免疫动物,获得高效价的特异性免疫血清。结论结核杆菌DnaA蛋白及其特异性抗体的成功制备,为进一步研究该蛋白在结核菌DNA复制机制中的作用奠定了基础。
- 周爱萍韩蕾王娟段艳吴晓康徐纪茹
- 关键词：结核分枝杆菌原核表达
- 双黄连片对小鼠流感病毒和腺病毒感染的保护作用被引量：12
- 2008年
- 目的观察双黄连片在实验动物体内抗流感病毒和腺病毒的作用,为临床用药提供试验依据。方法建立流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠模型和腺病毒ADV3株感染小鼠模型,分别灌胃给予高、中、低剂量双黄连片,设立病毒唑对照和正常对照组,观察各组小鼠的死亡数、测定小鼠存活时间、肺指数和肺组织流感病毒滴度。结果双黄连片可明显降低流感病毒和腺病毒感染小鼠的死亡率,延长肺炎小鼠的存活时间,降低肺炎小鼠的肺指数;同时,双黄连片还能降低肺组织中流感病毒的滴度。结论双黄连片在小鼠体内有明显抑制流感病毒和腺病毒的作用。
- 沈斯瑶刘军辉田艳茹郭嘉冯金枝刘思达曾雪娇董晓慧梅龙
- 关键词：双黄连片流感病毒腺病毒肺炎肺指数
- 细胞角蛋白8真核表达载体的构建、表达及生物信息学分析
- 2011年
- 目的:构建人细胞角蛋白8(CK8)全长CDS序列真核表达载体,并转染人肝癌细胞SMMC7721,为研究CK8的生物学功能提供细胞模型。方法:RT-PCR扩增CK8全长CDS,克隆入pMD18-Tsimplevector质粒,鉴定正确后,亚克隆入质粒pEGFP-C1,构建真核表达载体pEGFP-CK8。脂质体介导转染SMMC7721细胞,荧光显微镜、realtimePCR和Westernblot检测CK8的表达。生物信息学软件分析CK8理化特性、信号肽及功能位点等。结果:PCR、酶切和测序结果均证实重组质粒含有人CK8全长CDS序列,转染实验表明CK8在SMMC7721细胞中发生了高表达。结论:成功地构建了人CK8全长CDS真核表达载体,并使其在SMMC7721细胞中获得高表达,为研究CK8的生物学功能奠定了实验基础。
- 寻萌赵四海曹春霞薛欣邵明明李薇徐琨楚雍烈
- 关键词：真核表达生物信息学分析
- 临床感染肠球菌的分型、耐药基因筛选及质粒消除研究
- 采用API 20系统和16S rRNA PCR分型方法、K-B法和微量稀释法和多重PCR方法对我校第一附属医院2008-2009年临床分离的90肠球菌进行分型、耐药性和耐药基因分析,并对耐药性质粒进行了消除实验.
- 王娟Muhammad Nawaz吴晓康张宁黄君华徐纪茹
- 毛囊蠕形螨与皮脂蠕形螨基因组DNA的RAPD分析和序列比对被引量：9
- 2009年
- 【目的】分析毛囊蠕形螨Demodex folliculorum(D.f.)和皮脂蠕形螨D.brevis(D.b.)基因组DNA的多态性,对相关条带进行测序分析。【方法】采用改良小昆虫DNA提取法提取两种人体蠕形螨基因组DNA,选择RAPD技术对其进行多态性分析,将相关条带分别与pMD18-T载体连接,克隆、测序后进行酶切鉴定和分析。【结果】毛囊蠕形螨共扩增15条带,皮脂蠕形螨共扩增12条带;两种蠕形螨既有共有条带,又有特异性条带;根据条带差异计算得到两种间的遗传距离为0.5556。毛囊蠕形螨约800bp处特异性条带测序结果显示,序列片段长度为855bp(GenBank登录号为FI277970);特异性引物扩增和酶切鉴定均为毛囊蠕形螨所特有。序列比对显示与阿糖胞苷DNA区域结合蛋白有46%的序列相似度。两种人体蠕形螨约300bp处共有条带序列分析显示,碱基序列均为341bp(GenBank登录号分别为D.f.FI520176;D.b.FI520175),在第84和第165位点有2个碱基不同,分别是A/G和C/T互换,同源性高达99.4%。但未发现有开放阅读框和相似度高的序列。【结论】序列片段为855bp的特异性条带为毛囊蠕形螨所特有;341bp碱基序列为毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨所共有,同源性高达99.4%。RAPD技术可用于两种人体蠕形螨基因组DNA的多态性分析和物种鉴定。
- 赵亚娥成慧
- 关键词：毛囊蠕形螨皮脂蠕形螨RAPD分析物种鉴定
- 葡萄球菌的耐药性分析被引量：8
- 2011年
- 目的研究医院内葡萄球菌属细菌的耐药状况,为临床合理、有效地使用抗生素提供依据。方法用K-B法对采集的咽拭子标本中分离到的葡萄球菌进行药敏试验,采用双重PCR方法检测葡萄球菌的FemA及MecA基因。FemA和MecA基因均为阳性者为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)菌株,仅MecA基因阳性者为耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-resistant coagulase-negative Staphylococci,MRCNS)。结果从采集的361份标本中,分离出葡萄球菌220株,其中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)110株。住院患者、医护人员葡萄球菌标本中凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negative Staphylococci,CNS)分别占84/151(55.63%)、13/25(52.00%),均高于正常人群的13/44(29.55%)(P<0.05);住院患者中的耐甲氧西林葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus,MRS)对除万古霉素外的常用抗生素均有明显的耐药性。住院患者分离的67株SA中检测到MRSA菌株31株(46.27%);84株CNS中检测到MRCNS菌株26株(30.95%)。结论住院患者标本中的葡萄球菌对常用抗生素均有明显的耐药性,且CNS的比例显著高于正常人群;其中MRS几乎对所有抗生素都表现为耐药,表明MRS已成为医院内感染的重要致病菌。用双重PCR方法检测MRSA,比药敏试验简单,且快速、准确、敏感、特异性强,具有很好的临床应用价值。
- 刘军辉李鹏王淑梅汪靖园孟欣董晓慧
- 关键词：耐药性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MECA基因FEMA基因双重PCR
- 环氧化酶-2及表皮生长因子受体在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义
- 目的：探讨环氧化酶-2(COX-2)与表皮生长因子受体(EGFR)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与肺癌发生发展的关系。方法：采用免疫组化(SP)法检测56例NSCLC和20例正常肺组织中COX-2与EGFR的...
- 董西林张勇谢明
- 关键词：环氧化酶表皮生长因子受体临床病理
- (+)-松萝酸治疗小鼠急性弓形虫病的初步研究被引量：6
- 2008年
- 目的探索治疗弓形虫病的有效药物;初步观察(+)-松萝酸治疗小鼠急性弓形虫病的疗效。方法小鼠腹腔接种RH株弓形虫速殖子500个,建立急性弓形虫病动物模型;设立(+)-松萝酸治疗组(50 mg/kg,每日2次)、乙酰螺旋霉素治疗组(50 mg/kg,每日2次)、DMSO及淀粉对照组(含1%DMSO的5%淀粉溶液0.5ml,每日2次),分别于感染2 h后灌胃,每日2次,连续10 d,观察对比疗效。结果50 mg/kg(+)-松萝酸治疗组明显延长了小鼠的存活时间,最长存活时间达15 d,平均存活时间为10.63 d;而螺旋霉素治疗组小鼠最长存活时间为10 d,平均为7.37 d;对照组仅5.42 d。(+)-松萝酸治疗组与螺旋霉素治疗组及对照组之间均有显著性差异。结论(+)-松萝酸具有治疗急性弓形虫病的潜在作用,并且疗效优于螺旋霉素。
- 程彦斌魏琳琳司开卫李小其李琛袁育康
- 关键词：弓形虫病速殖子松萝酸
- 复方锁阳口服液对小鼠性激素水平及免疫功能的影响被引量：10
- 2010年
- 目的观察复方锁阳口服液对小鼠性激素水平的影响及其对免疫功能的调节作用,探讨其临床疗效机制。方法用复方锁阳口服液大(180 mg/kg)、中(90 mg/kg)剂量对小鼠灌胃4周后,用放射免疫法检测其对小鼠激素水平的影响,用MTT染色法、LDH释放法等检测其对小鼠相关免疫功能指标的影响。结果复方锁阳口服液大、中剂量灌胃给药均可显著提高雄性小鼠睾丸酮水平(P<0.05),对雌性小鼠孕激素和雌二醇有明显提高作用(P<0.05);对小鼠抗体产生、淋巴细胞转化以及NK细胞杀伤功能均有明显促进作用(P<0.05),大剂量优于小剂量。结论复方锁阳口服液能显著提高小鼠性激素水平,对小鼠免疫功能有明显促进作用。
- 刘如意刘敏任会勋刘洁黄思慧李彦霖
- 关键词：小鼠性激素免疫
- 右旋松萝酸体外抗弓形虫速殖子的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的探索右旋松萝酸在体外抗RH株弓形虫速殖子的效果。方法实验设右旋松萝酸组、乙酰螺旋霉素组、二甲基亚砜(DMSO)组及生理盐水对照组,前两组分别再设4个浓度组,于1ml弓形虫速殖子悬液(1×106个/ml)中分别加入终浓度为5、10、25和50μg/ml右旋松萝酸或乙酰螺旋霉素;后两组分别加入等体积的生理盐水和1%DMSO;每组15管。作用1、2和4h后,取弓形虫悬液涂片,台盼蓝染色,光镜观察记数。将各组作用4h的弓形虫悬液洗涤后,接种昆明小鼠,作再转种试验,观察弓形虫速殖子复苏情况。同时将洗涤后的虫体接种于制备的SD大鼠心肌成纤维细胞,观察虫体侵袭力。结果10、25和50μg/ml右旋松萝酸组作用4h,弓形虫速殖子台盼蓝着色率达100%,部分虫体肿胀,两端变圆,细胞质内出现颗粒,细胞核深染。各浓度的乙酰螺旋霉素组弓形虫速殖子变化与右旋松萝酸组相似,仅50μg/ml组作用4h后台盼蓝着色率达100%。再转种试验结果显示右旋松萝酸组仅5μg/ml组小鼠于接种后第8～9天死亡,腹腔液见大量弓形虫速殖子;其余各组小鼠大多存活至再次转种,且腹腔液均未见弓形虫速殖子。但乙酰螺旋霉素各浓度组小鼠均于接种后6～8d死亡,腹腔液见大量虫体及假包囊。右旋松萝酸5μg/ml组,弓形虫速殖子侵入大鼠心肌成纤维样细胞,会形成假包囊,其余组均为阴性。但乙酰螺旋霉素、生理盐水和DMSO组速殖子对大鼠心肌成纤维细胞均有不同程度感染。结论右旋松萝酸在体外有较强的抗弓形虫速殖子作用。
- 魏琳琳程彦斌司开卫顾宁李小其李琛袁育康
- 关键词：松萝酸乙酰螺旋霉素弓形虫速殖子
