苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞生物学系
- 作品数：19 被引量：35H指数：3
- 相关作者：韩甫李星辰更多>>
- 相关机构：第二军医大学东方肝胆外科医院浙江理工大学生命科学学院新元医药生物技术研究所浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 开展细胞生物学双语教材建设,促进双语教学的发展被引量：2
- 2011年
- 教材是教学内容的载体,一本好的教材是教学成功的必要条件。双语教学是我国为培养既精通专业知识又精通外语的复合型人才而开展的有益的尝试。针对目前细胞生物学双语教学中采用英文原版或影印教材的不足,提出建设自主知识产权、内容编排和课时设置符合国内双语教学大纲要求的双语教材,介绍了建设中的细胞生物学双语教材的特色与创新之处。
- 贺丽虹
- 关键词：细胞生物学双语教学教材建设
- 靶向黏蛋白1嵌合抗原受体修饰的Jurkat T细胞特异杀伤肝癌细胞被引量：10
- 2014年
- 目的探讨靶向黏蛋白1(mucin 1,MUC1)的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰的T细胞株(CAR-T)对MUC1高表达肝癌细胞的特异杀伤能力。方法分别构建第1代与第3代靶向MUC1的CAR基因表达框(MUC1-CAR与G3MUC1-CAR),并将其装入慢病毒载体,利用获得的重组慢病毒感染Jurkat细胞,通过CCK-8法、ELISA法、乳酸脱氢酶释放实验,分别检测在MUC1抗原存在条件下,CAR-T细胞的增殖、IL-2分泌量、杀伤作用。结果成功构建2种靶向MUC1嵌合抗原受体表达框的重组慢病毒Jurkat CAR-T细胞株。两种Jurkat CAR-T细胞均能特异识别MUC1分子,杀伤MUC1高表达的肝癌细胞QGY-7701,而对MUC1低表达的正常肝细胞基本不杀伤;第3代CAR修饰的Jurkat T细胞接触MUC1分子后,其增殖速度、IL-2分泌量和杀伤效率均优于第1代MUC1修饰细胞(P<0.05或P<0.01)。结论靶向MUC1的Jurkat CAR-T细胞能特异杀伤MUC1高表达的肝癌细胞。
- 马宜冬王真巩睿智李林芳吴红平金华君钱其军
- 关键词：黏蛋白1JURKAT细胞
- RMP基因的表达及其对肝癌细胞凋亡的影响
- 2011年
- 目的制备RPB5调节蛋白(RMP)抗体并研究RMP在60Coγ射线诱导的SMMC-7721肝癌细胞凋亡过程中的表达及功能。方法 RT-PCR检测HT-29、A549、Hep-2、SGC-7901、293T、HeLa、WI-38和SMMC-7721细胞株中RMP的表达;从质粒中PCR扩增得到人RMP基因并克隆至原核表达载体中,诱导表达后经亲和层析纯化获得融合蛋白GST-RMP/D1,以该蛋白作为抗原免疫家兔制备多克隆抗体;肝癌细胞SMMC-TT21、PFlaG-CMV4-SMMC-7721、PFlaG-CMV4-RMP-SMMC-7721经6 Gy 60 Coγ射线照射后,流式细胞术检测肝癌细胞凋亡的变化。结果RMP在以上细胞系中均有表达,但程度不同;SDS-PAGE鉴定示纯化蛋白为目的蛋白人RMP片段。Western blot结果显示,制备的多抗可与RMP蛋白特异性结合;肝癌细胞株经6 Gy 60Coγ射线照射后,流式细胞术结果表明RMP使肝癌细胞SMMC-7721的凋亡减少。结论 RMP在不同细胞株中均有表达且能减少肝癌细胞SMMC-7727的凋亡,为RMP用于肝癌的基因治疗奠定了基础。
- 仲蕾王晓婷郭云兰王琦季辉魏文祥
- 关键词：多克隆抗体凋亡肝癌
- 不同方法诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞的分化被引量：2
- 2009年
- 目的观察两种方法体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)向神经样细胞分化的效果。方法自大鼠股骨中提取骨髓细胞,利用Percoll法进行BMSC分离、纯化及鉴定。取第5代细胞,应用两种方法进行诱导。方法一(BHA组):200μmol/L丁羟基茴香醚(BHA)、10 ng/ml碱性成纤维生长因子(bFGF)和2%二甲基亚砜(DMSO)联合诱导细胞;方法二(RA组):全反式维甲酸(RA)和β-巯基乙醇(β-ME)联合诱导细胞。同时设正常培养的BMSC为对照组。实验过程中对细胞进行形态观察和免疫荧光染色检测神经细胞标志物。结果BHA组诱导5 h,细胞即发生明显的形态改变,出现胞体回缩、突触伸展等神经干细胞的形态特征,而RA组诱导1周未出现神经干细胞形态。免疫荧光染色显示两种方法诱导的细胞均能表达神经前体细胞标志物nestin、β-tubulin和成熟神经元标志物神经元特异性烯醇化酶(NSE),不表达星形胶质细胞标志物胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)。BHA组与RA组表达NSE的阳性率分别为80.05%和71.61%,两者相比,差异无统计学意义(P>0.05);对照组不表达NSE,诱导组与对照组比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论两种方法均能诱导骨髓间充质干细胞定向分化为表达神经细胞标志物的神经样细胞。
- 徐路尧宋琳钱燕翔王敏包普花张焕相
- 关键词：骨髓间充质干细胞诱导分化神经样细胞全反式维甲酸
- Rac1蛋白表达与神经前体细胞增殖分化的关系被引量：2
- 2009年
- 目的探讨Rac1蛋白表达与神经前体细胞增殖分化的关系。方法取新生大鼠大脑皮层,原代培养获得混合细胞培养体系,在含10%血清的培养基中培养6 d细胞汇合后更换无血清培养基继续培养。实验中设计4个时间点,用倒置相差显微镜观察细胞增殖分化的变化,免疫荧光染色技术鉴定细胞种类以及Rac1蛋白在细胞内的表达,通过Western blot检测Rac1蛋白的表达变化。结果建立了新生SD大鼠大脑皮层原代混合细胞培养体系,此体系底层主要是由Ⅰ型胶质细胞组成的单层细胞,GFAP染色呈阳性;在单层细胞上面有一些小圆形强折光性神经前体细胞生长,βⅢ-Tubulin染色呈阳性。更换无血清培养基后上层神经前体细胞大量增殖,βⅢ-Tubulin、Rac1染色呈阳性。Western blot定量分析结果显示,神经前体细胞增殖过程中Rac1蛋白表达上升,而分化过程中Rac1蛋白的表达下降。结论Rac1蛋白表达与神经前体细胞的增殖分化过程密切相关,可能参与了神经前体细胞的增殖分化过程。
- 宋雪慧辛莲周俊松董运海张焕相
- 关键词：神经前体细胞增殖分化
- 小鼠胚胎干细胞无饲养层培养及其生物学特性被引量：4
- 2009年
- 目的建立小鼠胚胎干(ES)细胞株S8在无饲养层的条件下短期内连续传代体系,获得大量纯的ES细胞。方法ES-S8细胞无饲养层连续传代后,检测其未分化指标以及多分化潜能。结果ES-S8细胞在无饲养层条件下培养5代,AKP染色、SSEA-1免疫荧光、OCT-4均显阳性,以及经拟胚体(EB)途径自发分化后,能形成多种类型的细胞。结论ES-S8细胞能够在无饲养层条件下培养,至少传5代仍能保持未分化特异性指标和多分化潜能。
- 韩甫叶荣鲍柳君张军超张焕相
- 关键词：胚胎干细胞饲养层细胞拟胚体小鼠
- RPB5介导蛋白与HBx蛋白共表达对肝癌HepG2细胞凋亡的影响被引量：3
- 2015年
- 目的通过乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)与RPB5介导蛋白(RMP)在肝癌Hep G2细胞中的共表达,探索RMP与HBx对肝癌细胞凋亡的影响。方法脂质体介导瞬时转染细胞;实时荧光定量RT-PCR和western blot分别检测RMP与HBx在肝癌Hep G2细胞中的表达量;流式细胞仪检测细胞凋亡率;逆转录PCR检测细胞凋亡相关基因Bax、Caspase3、P53、Bcl-2 mRNA相对表达水平,western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果与未经任何处理的Hep G2细胞比较,转染RMP质粒的稳定表达HBx的Hep G2细胞中RMP、HBx在基因及蛋白质水平表达均显著升高(P<0.01);细胞凋亡率显著降低;促凋亡基因Bax、Caspase3和P53 mRNA相对表达水平均显著下调(P<0.01),凋亡抑制基因Bcl-2 mRNA相对表达水平显著上调(P<0.01);促凋亡蛋白Bax表达量明显降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达量明显升高。结论 RMP与HBx共表达可降低肝癌Hep G2细胞凋亡率,提示RMP和HBx可能在肝癌发生和发展过程中起着重要的作用。
- 朱霞霞王琦李帅何峰魏文祥
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白肝癌
- 瞬时干扰RMP的肝癌细胞的增殖特征
- 目的:研究瞬时干扰RMP(RPB5-mediating protein)对60Coγ射线诱导的肝癌细胞形态和凋亡的影响，探讨RMP的抗辐射抗凋亡效应及机制。方法:设计并合成RMPsiRNA及相应的对照序列，脂质体介导转染...
- 朱艳李敏王琦杨吉成缪竞诚魏文祥
- 关键词：肝癌细胞瞬时转染调节蛋白
- 文献传递
- 表达SIRPα-Fc的基因-溶瘤腺病毒对胆管癌治疗作用的实验研究
- 2015年
- 目的:研究表达SIRPα-Fc融合基因的基因-溶瘤腺病毒SG655-SF对胆管癌的治疗作用。方法:将信号调节蛋白α(signal regulatory proteinα,SIRPα)突变体CV1与人Ig G1 Fc段融合(简称SF),构建SF编码序列(基因)。将SF基因插入条件增殖型腺病毒载体SG655,构建基因-溶瘤腺病毒SG655-SF。重组病毒经鉴定正确后,经扩增、滴度测定,感染293细胞。Western blot检测外源基因的表达情况。间接免疫荧光检测293细胞表达的SF蛋白对胆管癌细胞的结合能力。噻唑蓝(MTT)法测定病毒对胆管癌细胞的杀伤作用。建立人类胆管细胞癌裸鼠移植瘤模型,用SG655-SF治疗,观察疗效。取肿瘤组织进行切片检查,验证其抗肿瘤作用。结果:成功构建SF表达框、基因-溶瘤腺病毒SG655-SF。SG655-SF感染293细胞后,能高效表达SF蛋白。293细胞表达的SF蛋白能有效结合CD47高量表达的胆管癌细胞株EH-CA1-T、EHCA1-Y。SG655-SF能有效杀伤胆管癌细胞。SG655-SF可以有效抑制肿瘤在裸鼠体内生长。肿瘤组织切片检查提示有肿瘤坏死和病毒浸润。结论:基因-溶瘤腺病毒SG655-SF具有良好的抗胆管癌活性。
- 巩睿智吕赛群马宜冬左明辉叶真龙朱海莉吴红平施军霞李林芳金华君钱其军
- 关键词：胆管癌溶瘤腺病毒CD47
- 基于微课的翻转课堂教学模式在细胞生物学教学中的应用被引量：6
- 2019年
- 细胞生物学是研究细胞结构、功能及基本生命活动规律的科学,而很多细胞功能活动涉及复杂的分子机制,由于其内容微观而深奥,因此学生接受度普遍不高,很难全面理解和掌握知识点。通过运用微课和翻转课堂相结合的教学模式可以将枯燥的理论知识形象化,有利于提高学习效率。苏州大学医学部细胞生物学系多年来积极开展教学改革,主讲教师录制了25个细胞生物学微课视频,将微课与翻转课堂相结合,对传统的细胞生物学课堂教学模式进行了改革,受到学生的普遍欢迎和好评。本文讨论了将微课与翻转课堂相结合的先进教育理念融入细胞生物学的教学活动实践中的相关问题,以期为细胞生物学教学改革提供新的思路。
- 曲静朱子玉张焕相
- 关键词：细胞生物学教学模式
