浙江理工大学生命科学学院
- 作品数:1,206 被引量:3,741H指数:21
- 相关作者:吴祥甫张世馥竺锡武许传莲许根俊更多>>
- 相关机构:第二军医大学东方肝胆外科医院中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所浙江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金浙江省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 家蚕JAB1/CSN5蛋白的基因克隆表达及亚细胞定位被引量:4
- 2009年
- JAB1/CSN5是COP9信号复合体(constitutive photomorphogenic signalosome CSN)的第5个亚基,内嵌的JAMM基序是CSN参与蛋白的泛素化降解途径并调控生物体生长发育过程的异构酶活性位点。在家蚕蛹cDNA文库中筛选到的一条基因序列,其ORF长度为1047 bp,预测编码蛋白含有JAB1/CSN5保守结构域JAB-MPN,因此命名为BmJM。将BmJM基因的ORF插入到载体pET-28a(+)的多克隆位点,构建重组表达质粒pET-28a(+)-BmJM,于E.coliRosetta菌中进行原核表达,重组蛋白以包涵体形式存在。以纯化后的重组蛋白为抗原免疫大白兔获得BmJM的多克隆抗体,采用RT-PCR、Western blotting方法对BmJM基因在家蚕不同发育时期和组织中的转录及蛋白表达水平进行分析,发现BmJM蛋白在家蚕5龄幼虫的生殖腺表达量最高,而在其他组织中表达量较少,由此初步揭示了JAB1/CSN5在家蚕生长发育过程中的作用。亚细胞定位测定表明BmJM蛋白在细胞质近核区域含量最高,在细胞核中也有分布。
- 许红姚斐盛清吕正兵陈健聂作明王丹刘立丽沈红丹舒建洪舒特俊陈剑清吴祥甫张耀洲
- 关键词:家蚕基因克隆荧光定量PCR亚细胞定位
- 黄瓜花叶病毒芭蕉分离物的RNA3全长克隆与序列分析
- 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)是分布最广泛和危害最严重的植物病毒。该病毒主要分为Ⅰ组(SubgroupⅠ)和Ⅱ组(SubgroupⅡ)。迄今为止,在我国和广大亚洲地区的CMV分离物基本...
- 覃佐东金磊磊田清花严师节杜志游陈集双
- 关键词:黄瓜花叶病毒
- 文献传递
- 家蚕组织中异柠檬酸脱氢酶的原核表达及其乙酰化的研究
- 乙酰化修饰发生在蛋白质赖氨酸残基的侧链上,这种修饰作用不仅中和了赖氨酸残基侧链上的正电荷,增加了侧链的疏水性和体积,而且破坏了它形成氢键的能力,发生乙酰化修饰的蛋白质会改变其生化特性或构象。因此当蛋白质受到可逆的乙酰化修...
- 程旭升聂作明盛清
- 关键词:家蚕异柠檬酸脱氢酶原核表达
- 文献传递
- 桑蚕丝素蛋白初始结构对其矿化作用的影响被引量:23
- 2007年
- 以碱金属离子诱导桑蚕丝素蛋白溶液发生构象转变,研究了蛋白质初始结构对其矿化作用的影响.FT-IR,XRD和SEM等测试结果显示,未经任何处理的桑蚕丝素蛋白溶液矿化后形成片状复合物,其无机相以二水磷酸氢钙(DCPD)为主;而经过K+和Na+金属离子处理后,桑蚕丝素溶液的结构由无规线团/螺旋构象向β-折叠发生转变,矿化后成纤维状,并相互结合呈现纳米级的三维多孔结构,其无机相以热力学稳定的羟基磷灰石(HA)为主.可以认为,丝素蛋白结构转化为较伸展的β-折叠后,使得更多的亲水基团暴露在外面,在丝素蛋白分子不断凝聚成纤过程中,HA结晶快速生长并附着在这些微纤上,最终形成纤维状的丝素蛋白/HA复合物.该结果为阐明蛋白质的生物矿化过程及其调控机理提供了理论依据,同时可以从矿化复合物的形成来反映这些微量元素可能对骨组织形成的影响,为临床骨组织的修复提供一定的参考.
- 姚菊明魏克民励丽孔祥东祝永强林凤
- 关键词:碱金属离子磷酸钙羟基磷灰石生物矿化蛋白质结构
- 3种不同来源侧耳品种亲缘关系差异化分析被引量:6
- 2016年
- 采取拮抗实验、酯酶同工酶、基因组进行多态性分析(RAPD)、内部转录间隔区序列(ITS)对来源不同的特大凤尾菇(Pleurotus sajor-caju)、夏秀990(Pleurotus geesteranus)和黑平A3三个侧耳品种的亲缘关系进行了对比分析。实验结果表明:供试的3个侧耳品种从形态学水平、蛋白质水平和分子水平上看,其品种间亲缘关系界定具有一致性。表现为特大凤尾菇与夏秀990的亲缘关系较近,与黑平A3的亲缘关系较远,夏秀990与黑平A3亲缘关系较远。本研究从不同的水平,为食用菌菌种属间亲缘关系的鉴定提供了综合分析方法,对区分同种异名、杂交亲本选择以及判定杂交结果具有指导意义。
- 赵同心赵洪新王升厚
- 关键词:侧耳亲缘关系酯酶同工酶
- 基于溶瘤腺病毒抗肿瘤免疫治疗的前景与展望被引量:3
- 2018年
- 机体免疫系统在抗肿瘤过程中有着巨大的潜力,但肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)的免疫抑制状态可引发一系列的肿瘤免疫逃逸反应,这将使得癌症进一步恶化。溶瘤腺病毒(oncolytic adenovirus,OAds)可通过选择性复制及其溶瘤作用杀伤肿瘤细胞,暴露肿瘤相关抗原,活化免疫细胞,逆转TME,最终可引发一系列抗肿瘤免疫反应。OAds存在靶向性低、免疫原性强等缺陷,其免疫治疗效果不佳,若对其改造则能提高肿瘤靶向性,降低免疫原性,同时携带免疫治疗基因,显著提高抑癌活性。该文综述了肿瘤免疫治疗的相关机制及OAds抗肿瘤免疫治疗的研究进展。
- 郭婉金槿肖伯端王毅刚周秀梅
- 关键词:肿瘤微环境溶瘤腺病毒肿瘤免疫治疗肿瘤抗原
- 丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)和藏丹参(Salvia castanea Diels.ftomentosa Stib.)对UV-B辐射的响应差异
- 以药用植物紫花丹参(来自低海拔地区)和臧丹参(高海拔地区)为研究材料,比较二者对UV-B辐射的敏感性差异,在温室内开展UV-B辐射盆栽试验.结果表明:丹参叶片在UV-B辐射处理下O2-含量增加,Vc含量和APX活性增加达...
- 刘景玲舒志明梁宗锁刘建朝杨向娜
- 关键词:丹参紫外线辐射
- 阿霉素耐药的乳腺癌MCF-7/Adm细胞系的建立及其耐药特性被引量:3
- 2014年
- 建立肿瘤耐药细胞系是研究肿瘤细胞的重要手段之一,也是探讨肿瘤多药耐药机制及其逆转的基础。采用大剂量间歇诱导法诱导MCF-7细胞,建立MCF-7/Adm耐药模型;MTT法检测耐药倍数;流式细胞术检测MCF-7细胞和MCF-7/Adm细胞中阿霉素的积累量;real-time PCR检测MCF-7/Adm细胞中ABCG2、ABCC1、ABCB1基因的表达。结果显示,阿霉素抑制MCF-7和MCF-7/Adm细胞存活的IC50值分别为0.535μg/mL和173.275μg/mL,耐药倍数为324;MCF-7细胞中的阿霉素积累量较MCF-7/Adm明显高;MCF-7/Adm细胞中mRNA水平ABCB1基因表达明显上调,ABCG2和ABCC1基因表达下调。成功获得对阿霉素耐药的人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/Adm,为进一步研究乳腺癌多药耐药机制及其逆转提供有利工具,并且对乳腺癌化疗药物的筛选具有一定的意义。
- 郑婷婷潘姝花郑旭升吴登伟许传莲
- 关键词:阿霉素乳腺癌耐药ABCB1
- 神经营养因子前体蛋白功能的研究进展被引量:4
- 2008年
- 神经营养因子是一组在结构与功能上具有相关性的多肽性因子,它们通过前体蛋白的切割成为具有特定功能的成熟蛋白,为不同的神经细胞亚群提供营养支持,在中枢神经系统和周围神经系统的发育分化及病理生理中起着重要的作用。以前认为神经营养因子的前体不具有生理功能,最近的研究则表明,神经营养因子前体蛋白具有不同于神经营养因子的功能。研究发现,神经营养因子前体,至少神经生长因子和脑源性神经营养因子的前体大量存在于细胞外,它们通过与p75NTR和sortilin受体组成三聚体诱导神经细胞的凋亡。这一机制可能与神经发育时调节神经细胞的比例,神经损伤后神经细胞的死亡以及某些人类疾病的发生有密切联系。此外,神经营养因子前体还可能具有其他未知的新功能,对神经营养因子前体功能的深入研究将使人们对神经系统的发生、发育及神经系统疾病的发病机制有更加深入的了解,并有助于神经系统疾病新药物、新疗法的开发与研究。
- 樊拥军许健
- 关键词:凋亡P75^NTRSORTILIN
- 杭白菊中黄酮类化合物及其抑制人源肿瘤细胞增殖活性的研究被引量:14
- 2010年
- 目的分离和鉴定杭白菊中黄酮类化合物并对其进行抗肿瘤活性研究。方法利用系统溶剂萃取法、聚酰胺柱色谱、半制备型高效液相色谱法分离。通过理化性质和IR、UV、MS、1H-NMR、13C-NMR等光谱数据鉴定化合物。采用MTT法测定化合物对人肿瘤细胞增殖的影响,并以氟尿嘧啶(5-FU)作为阳性对照,比较其对正常细胞的毒性作用。流式细胞术检测细胞周期分布的改变。结果分离得到8个黄酮化合物单体,分别鉴定为木犀草素(Ⅰ),木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ),木犀草素7-O-β-D(6″-O-丙二酸单酰)-葡萄糖苷(Ⅲ),芹菜素(Ⅳ),芹菜素7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ),芹菜素7-O-β-D-(6″-O-丙二酸单酰)-葡萄糖苷(Ⅵ),香叶木素(Ⅶ),香叶木素7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅷ)。MTT法测定木犀草素抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞和肝癌SMMC-7721细胞的IC50分别为56.67和72.92μmol·L-1。结论化合物Ⅲ和Ⅵ首次从杭白菊中分离得到。木犀草素能抑制MDA-MB-231和SMMC-7721增殖,阻滞其细胞周期于G2/M期,且对正常细胞无毒性。
- 彭钰芳邹文韬许传莲
- 关键词:杭白菊黄酮抑制增殖