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电脉冲和布吡卡因增强A型肉毒毒素DNA核酸疫苗的免疫效果被引量：2: 2009年; 目的:考查DNA疫苗注射免疫后电脉冲和布吡卡因佐剂化DNA疫苗递送方式对A型肉毒毒素DNA核酸疫苗免疫效果的影响。方法:A型肉毒毒素DNA复制子疫苗和传统DNA疫苗肌肉注射免疫小鼠后电脉冲和布吡卡因佐剂化DNA后再肌肉注射免疫小鼠;检测免疫小鼠的抗体和细胞水平,并分析抗体亚类。结果:电脉冲和布吡卡因这二种递送方式均增强DNA复制子疫苗和传统DNA疫苗的体液免疫和细胞免疫效果;电脉冲提高DNA疫苗免疫效果更为明显,并且电脉冲和布吡卡因组合这种递送方式增强DNA疫苗体液免疫和细胞免疫水平最高;与传统DNA疫苗相比,A型肉毒毒素DNA复制子疫苗在这些递送方式下均诱导产生了更好的特异性体液免疫和细胞免疫应答,并且这些递送方式没有改变DNA疫苗的Th1/Th2免疫应答特性,即DNA复制子疫苗诱导产生Th1/Th2混合免疫应答但偏向于Th2途经,而传统DNA疫苗则完全偏向于Th2途经。结论:电脉冲和布吡卡因增强DNA复制子疫苗和传统DNA疫苗的免疫效果,是提高DNA疫苗免疫原性的良好策略。; 余云舟李娜王双俞炜源孙志伟; 关键词：A型肉毒毒素 DNA疫苗电脉冲布吡卡因

质粒骨架的CpG修饰对DNA疫苗免疫原性的影响被引量：3: 2008年; 目的:探讨不同类型的CpG对DNA疫苗免疫应答的影响。方法:将3种不同类型的CpG通过骨架改造的方式引入核酸疫苗的质粒载体骨架中作为内源性佐剂,以LacZ为模式抗原,对其免疫小鼠后特异性抗体水平、细胞免疫水平和细胞因子水平进行比较和分析。结果:3种不同类型的CpG序列在体内能够不同程度地增强免疫小鼠的特异性抗体水平和细胞免疫水平,并且不同类型的CpG序列可能具有不同的免疫调节作用。结论:作为内源性佐剂,CpG免疫刺激DNA序列可不同程度地提高模式抗原特异性的免疫反应,可根据不同抗原的特点加以利用。; 李娜余云舟孙志伟俞炜源; 关键词：LACZ 佐剂

单克隆抗体纯化过程中内毒素去除方法分析被引量：2: 2013年; 目的：分析单克隆抗体纯化过程中，去除内毒素的不同方法的应用效果，并探讨它们应用于中试规模的可行性。方法与结果：比较了多聚赖氨酸型的内毒素去除填料、20nm膜过滤、将单抗附着在蛋白A柱上后使用精氨酸和组氨酸溶液冲洗等3种方法的内毒素去除效果，发现3种方法都可以将内毒素水平大幅降低，可分别将内毒素去除70％、88％和97％。因为单抗分子等电点较高，所获得的最低内毒素含量为0．2～0-3EU／mg。结论：3种方法均具有一定的工艺放大潜力，进一步提高内毒素去除效果将需要综合使用不同机理的去除技术。; 李彦英王珙李凌瑞周振海李娜毛赟赟李凯王笑非董晓杰; 关键词：组氨酸精氨酸

CpG免疫刺激DNA序列及其在疫苗佐剂中的应用被引量：5: 2008年; CpG免疫刺激DNA序列(ISS)是一种新型疫苗佐剂,可不同程度地提高多种类型疫苗的抗原特异性的免疫反应。按照结构特点的不同,可将CpGISS分为3种类型。CpGISS能够刺激B细胞和浆样树突状细胞,促进机体产生Th1和前炎症细胞因子,且促进抗原呈递细胞的激活和成熟。目前已完成的临床实验结果表明,CpG作为人用佐剂安全,且在一定程度上能够增加疫苗的免疫反应。; 李娜孙志伟俞炜源; 关键词：寡聚脱氧核苷酸佐剂疫苗

原核生物中小RNA的功能及研究进展: 2009年; 在原核生物基因组中,除了tRNA、rRNA和mRNA这3种我们很熟悉的RNA以外,目前已经知道还含有许多编码非常规调控的RNA。这些RNA的长度为50～400核苷酸,通常由原核生物的基因间区编码,但并不翻译成蛋白质,因此被称为非编码小RNA(sRNA),简称小RNA或非编码RNA。近年来,随着生物信息学和分子生物学技术的不断发展,在原核生物体内陆续发现了上百种sRNA分子,这些sRNA分子具有多样的生物学功能,作为一类新发现的基因表达调控子已经引起了高度的重视。; 李娜李娜朱力; 关键词：小RNA 原核生物基因表达调控

福氏2a志贺菌C0719 RNA基因突变体的构建: 2013年; 目的构建福氏2a志贺菌301株已验证的但是功能未知的C0719基因突变体,以进行C0719RNA功能研究。方法根据福氏2a志贺菌301株基因组全序列,采用λ-Red重组系统对C0719RNA基因进行缺失,并经PCR验证;对野生株和C0719缺失突变株37℃时的生长曲线及生化反应进行比较研究;对野生株和5个sRNAs缺失突变株进行蛋白质组的比较研究;同时利用毒力侵袭模型来评价突变株毒力。结果构建了C0719缺失突变株;突变株初始生长均较慢,但最终和野生株状态一致;对构建成功的C0719缺失突变体进行生化特性分析,结果表明和野生株相比,301ΔC0719株利用棉子糖的能力比野生株强一些;对C0719缺失突变体进行了比较蛋白质组分析。结论获得了福氏2a志贺菌301株C0719基因突变体,为深入研究sRNA基因的功能奠定了基础。; 李娜李娜王恒樑; 关键词：基因突变聚合酶链反应

重组PA4复制子病毒颗粒疫苗免疫原性的分析: 2012年; 目的:构建携带炭疽毒素保护性抗原第四结构域(PA4)基因的重组Semliki森林病毒(SFV)复制子病毒颗粒,并对其免疫原性进行研究。方法:将编码炭疽PA4的SFV复制子DNA载体pSCAR-SPA4,与辅助SFV DNA载体pSHCAR共转染BHK21细胞,制备表达PA4的重组复制子病毒颗粒;用重组复制子病毒颗粒疫苗免疫小鼠,并采用ELISA法检测其血清抗体水平和细胞因子IFN-γ和IL-4。结果:免疫小鼠血清中检测到较高的抗体水平,免疫小鼠的脾淋巴细胞经特异性抗原刺激后产生了明显的T细胞增殖反应并分泌产生了IFN-γ和IL-4。结论:重组PA4复制子病毒颗粒疫苗免疫小鼠后能够产生特异性的抗体反应和细胞免疫反应。制备的重组PA4复制子病毒颗粒极有潜力作为人用炭疽候选疫苗,为进一步研究新型炭疽疫苗奠定了基础。; 马尧李娜余云舟孙志伟俞炜源; 关键词：炭疽毒素复制子免疫原性

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李娜