李伟
- 作品数：36 被引量：71H指数：5
- 供职机构：长江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目国家花生产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学语言文字更多>>
- 黄鳝肠道假单胞杆菌铁蛋白基因的克隆及融合表达被引量：2
- 2018年
- 细菌铁蛋白(bacterioferritin,Bfr)在细菌铁代谢过程中具重要作用。为分析黄鳝肠道假单胞杆菌铁蛋白基因Bfr的功能,以该菌基因组DNA为模板,PCR扩增Bfr基因后将其克隆到pGEX-4T-1表达载体中。序列测定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导、GST-resin纯化柱分离纯化获得Bfr蛋白。用SDS-PAGE电泳及Western blot检测融合蛋白;用比色法检测融合蛋白的铁离子螯合能力,用液体培养法分析重组蛋白对假单胞杆菌生长的影响。实验结果表明:成功获得黄鳝肠道假单胞杆菌Bfr基因,并实现了Bfr基因的融合表达;带有融合标签的GST-Bfr蛋白与Fe^(3+)和Fe^(2+)均不能结合,而Bfr蛋白则可以结合Fe^(3+)但不能结合Fe^(2+);在外源添加Fe^(3+)情况下,重组Bfr蛋白可促进假单胞杆菌的营养生长。该研究为进一步深入了解假单胞杆菌铁蛋白基因的功能提供了参考资料。
- 臧彧伟王全禾杨龙李伟
- 关键词：假单胞杆菌细菌铁蛋白蛋白纯化
- 牛蛙源米尔伊丽莎白菌的分离鉴定与药敏试验
- 2023年
- 从湖北荆州江陵县患歪头白内障病的牛蛙(Rana catesbeiana)组织中分离病原菌,经生理生化分析和16S rRNA、gyrB基因序列测定鉴定病原菌,并经人工感染试验,进行药敏试验分析,研究其致病性和耐药性。结果显示,从患病牛蛙脑组织中分离纯化到一株优势菌株Mir-N11,经鉴定为米尔伊丽莎白菌(Elizabethkingia miricola)。攻毒试验证实:该分离株对牛蛙有较强的致病能力;该菌株对新霉素、庆大霉素、氯霉素等多种药物耐药,对米诺环素、哌拉西林、多西环素等药物敏感。生长特性试验表明:该分离菌株能产生胞外蛋白酶,不产生淀粉酶;在pH3.0~9.0范围内、盐度0.5%~2.5%范围内均可生长。该研究为牛蛙歪头白内障病害的防控提供了参考。
- 向圣汉赵雨贺彭治鑫李俊慧李伟
- 关键词：牛蛙药敏试验
- 黄鳝醛酮还原酶对大肠杆菌非生物胁迫耐受性的影响被引量：1
- 2019年
- 醛酮还原酶是一类依赖NAD(P) H的氧化还原酶,在生物体内参与了糖代谢、酮代谢和物质运输等多种生理过程。为了解黄鳝醛酮还原酶在细胞逆境胁迫中的保护作用,采用液体培养和斑点展示法,比较含黄鳝醛酮还原酶Eakr的重组菌株和阴性对照菌株在Na Cl、Cu2+和H2O2等非生物胁迫下的存活率和生长活力。结果表明,含重组醛酮还原酶Eakr的大肠杆菌在高渗透压、重金属和氧化胁迫下的生存率显著高于阴性对照,其生存活力也大大增强。提示黄鳝醛酮还原酶Eakr可能参与了细胞活性氧代谢和物质运输等多种生理过程。
- 阚延泽江翱王全禾李伟
- 关键词：醛酮还原酶非生物胁迫存活率耐受性
- 镉胁迫对黄鳝醛酮还原酶基因表达的影响
- 2023年
- 采用RACE-PCR技术获取黄鳝醛酮还原酶(Eakr)基因5′cDNA末端和3′cDNA末端,采用基因特异性引物扩增其内含子序列,获得其基因结构;将黄鳝养殖在15 mg/L CdCl2的曝气水中,分析Cd^(2+)处理对Eakr基因表达的影响;采用液体培养和斑点展示法,比较重组Eakr基因菌株和阴性对照菌株在Cd^(2+)暴露下的存活率及生长活力。研究结果表明,Eakr基因全长4468 bp,包含1026 bp的开放阅读框,编码341个氨基酸,5′端非编码区74 bp,3′端非编码区195 bp。荧光定量PCR检测发现,Eakr基因在黄鳝的脑、血细胞、心脏、肠道、肾脏、肝脏、肌肉、性腺、皮肤、脾脏、胃中均有表达,在肝脏中表达水平最高(P<0.05)。Cd^(2+)胁迫下,肝脏中Eakr基因与Nrf2基因mRNA表达水平均显著上升;在各检测时间点,Eakr基因表达水平相比对照组均差异极显著(P<0.001),而Nrf2基因表达水平在处理后6、9、12 h差异极显著(P<0.001);含Eakr基因的重组菌存活率显著高于对照菌株,且在Cd^(2+)浓度为1.5 mmol/L和2.0 mmol/L时差异极显著(P<0.001)。
- 孔丹李伟
- 关键词：醛酮还原酶黄鳝基因克隆
- 黄鳝转铁蛋白受体1基因的克隆及表达分析
- 2015年
- 旨在研究黄鳝转铁蛋白受体1基因的功能及其组织表达特异性,采用同源克隆结合RACE技术从黄鳝肝脏中分离其转铁蛋白受体1基因,用生物信息学方法对获得的氨基酸序列进行分析,用半定量RT-PCR技术研究各组织中Tf R1表达水平。结果表明,克隆获得黄鳝Tf R1,Gen Bank注册序列号为KF819396。该c DNA全长2 839 bp,5'UTR长134 bp,3'UTR长380 bp,编码一个长774个氨基酸的多肽链。氨基酸多序列比对结果表明,黄鳝Tf R1基因推断的氨基酸序列同其他鱼类的同源性较高,达55.68%-68.41%;而同哺乳动物的Tf R1基因同源性较低。半定量RT-PCR分析表明,黄鳝Tf R1基因转录本在不同组织表达量有明显差异;在血细胞中表达量最高,而在肾脏、脾脏和小肠中表达中等,在肝脏、胃、皮肤、脑、心脏和肌肉中表达量很低。
- 江翱李伟
- 关键词：黄鳝RACE技术RT-PCR技术
- 邻作婆婆纳对花生苗期主要害虫和天敌种群的影响被引量：1
- 2022年
- 为评估婆婆纳(Veronica persica Poir)作为功能植物对花生田苗期害虫的控制作用,本研究调查了花生苗期的主要害虫以及天敌种类,并通过比对花生单作区(对照)与婆婆纳-花生邻作区的主要天敌和苗期害虫花生蚜、蓟马的发生数量,评价婆婆纳在花生田苗期害虫控制中的可行性。结果表明:花生苗期的天敌以食蚜蝇、小花蝽、蚜茧蜂、瓢虫类为主,害虫以蓟马和花生蚜为主。5月30日,婆婆纳区天敌瓢虫类、小花蝽的数量显著高于对照区;6月8日,婆婆纳区食蚜蝇类、天敌瓢虫类、小花蝽和蚜茧蜂类的数量显著高于对照区,而同时期邻作区花蓟马、稻管蓟马和禾蓟马的数量显著低于花生单作区。婆婆纳对苗期花生主要天敌存在明显吸引效应,但并未扩散到邻作花生区,短期内对花生区花蓟马、稻管蓟马以及禾蓟马有一定的控害作用,对花生蚜和其他害虫未见显著控制效果。
- 晏方勤李晓焦坤李伟鞠倩姜晓静曲明静孙文秀
- 关键词：花生天敌控害作用
- 病原菌感染对鲫鱼乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响被引量：6
- 2009年
- 通过不连续垂直板聚丙烯酰胺电泳(PAGE)研究了鲫鱼成体不同组织(肝脏,肾脏,鳃,肌肉,心脏)里LDH同工酶的的表达情况。结果表明:鲫鱼乳酸脱氢酶在不同组织里存在着较大的表达差异。病原菌嘘水气单胞菌(Aeromonas punctata)感染鲫鱼后对各组织里LDH的表达有较大影响。这种特异性变化可以作为鲫鱼疾病早期诊断及病理分析的生化辅助指标。
- 李伟谭妮
- 关键词：乳酸脱氢酶同工酶活性
- 右旋糖酐铁和嗜水气单胞菌感染对泥鳅GSTs活力的影响被引量：1
- 2011年
- 以泥鳅为试验材料,利用嗜水气单胞菌和右旋糖酐铁作为诱导刺激物,以不同浓度嗜水气单胞菌菌液和右旋糖酐铁对泥鳅进行腹腔注射,研究病原细菌和金属离子对泥鳅GSTs酶活性的影响。在分别注射病原微生物后02,6,,101,62,44,0,50 h以及注射右旋糖酐铁后12,,3,4,5 d取泥鳅肝胰组织,测定其谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)的活力,并研究其变化规律。结果表明:不同浓度的嗜水气单胞菌对泥鳅GSTs均有诱导作用,2.1×109 cfu.mL-1浓度组对泥鳅GSTs的诱导作用最大,2.1×107和2.1×105 cfu.mL-1浓度组则相对来说诱导作用较小。各处理组GSTs活力在处理后一段时间内达到峰值后逐渐降低到正常水平,实验组的GSTs活力均显著高于对照组。不同浓度的右旋糖酐铁对GSTs的作用不同,低剂量组(10μg.g-1)对GSTs活性有显著性的诱导作用(P<0.05),且在第1天时诱导作用达到最大,随后逐渐降低到正常水平;中剂量组(25μg.g-1)和高剂量组(50μg.g-1)对GSTs活性有一定抑制作用,且在第4天时抑制作用达到最大,但随后逐渐增加而趋近于正常水平。
- 耿小雪邱庆崇邓刚李伟
- 关键词：泥鳅嗜水气单胞菌右旋糖酐铁GSTS
- 黄鳝转铁蛋白基因的克隆及其N-lobe的重组表达
- 2022年
- 以黄鳝(Monopterus albus)肝脏cDNA为模板,利用RACE-PCR扩增了黄鳝转铁蛋白Tf基因5’和3’cDNA末端,构建了Tf基因N端原核表达载体;转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后经过Ni-NTA His·Bind Resin亲和柱分离纯化获得Tf-N蛋白;利用琼脂糖扩散抑菌圈法验证Tf-N蛋白的抑菌作用;分析了Tf-N蛋白对黄鳝肠道假单胞杆菌(Pseudomonas spp.)铁获取作用的影响。结果显示:成功克隆了黄鳝Tf基因全长,构建了pET28a/Tf-N重组表达载体,获得了纯化的Tf-N蛋白;Tf-N蛋白可抑制假单胞杆菌的生长,能与假单胞菌来源的Bfr蛋白一起共同促进假单胞杆菌的生长。该研究结果可为进一步探索鱼类Tf基因的功能提供参考。
- 郑淑婷臧彧伟杨龙李伟
- 关键词：转铁蛋白黄鳝抑菌作用
- 《动物生物学》课程考试改革思考与体会
- 2015年
- 课程考试改革是改变一份试卷评定学生成绩的必要途径。笔者在《动物生物学》课程考试改革的实践教学中,从考试改革的环节和重要性对课程考试改革进行了反思和总结,这将有利于推动课程考试的客观性和合理性评价。
- 李伟
- 关键词：课程考试改革
