江翱
- 作品数：8 被引量：14H指数：2
- 供职机构：长江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家大学生创新性实验计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 枯草芽孢杆菌硫氧还蛋白还原酶的原核表达及活性分析
- 2016年
- 硫氧还蛋白还原酶(TrxR)是一种NADPH依赖的、含硒的黄素蛋白,在细胞增殖和分化、维持细胞内外氧化还原平衡中起重要作用。通过基因特异性引物从枯草芽孢杆菌BS04菌株中扩增TrxR编码基因,亚克隆至p ET-28a(+)原核表达载体并转化大肠埃希菌BL21(DE3),经过IPTG诱导表达后采用Ni离子亲和层析进行重组蛋白纯化及活性分析。结果表明,枯草芽孢杆菌BS04菌株的TrxR基因全长1 011 bp,编码336个氨基酸,与已知枯草芽孢杆菌TrxR氨基酸同源性达99%。SDS-PAGE电泳和Western-blotting分析发现,重组蛋白分子量约37 ku,与预期相符。DTNB还原法测定TrxR活性及酶动力学常数结果表明,其对DTNB具有较高的还原活性,其Km和Kcat值分别为3.06 mmol·L-1和324.71 min-1。该研究结果为进一步了解TrxR的功能提供了参考依据。
- 陈洪娜李建文江翱孙文秀
- 关键词：枯草芽孢杆菌硫氧还蛋白还原酶原核表达活性分析
- 黄鳝主要组织相容性复合体Iα基因的克隆及多态性分析被引量：1
- 2015年
- 通过同源克隆，结合RACE技术，从黄鳝肝脏cDNA中分离得到了MHC 1α因的全长cDNA序列。结果表明：黄鳝MHC 1α因cDNA全长1731bp，5＇UTR长78bp，3＇UTR长600bp，编码1条350个氨基酸的多肽；与其他鱼类不同，黄鳝血基因只具有4个外显子和3个内含子。二级结构分析结果表明，该基因具有MHC尼基因的典型特征和保守区域。实时荧光定量PCR检测结果表明：黄鳝MHC 1α因在不同组织中表达量的差别较大；嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophilia）感染可显著影响黄鳝肝脏、肾脏和脾脏MHC 1α因的表达。对42个个体MHC 1α因外显子3序列的测定结果表明，42个个体共分离到50个等位基因，每个个体包含1～6个等位基因，推测黄鳝具有至少3个血基因座位；等位基因PBR位点和非PBR位点的氐值均显著大于ds（P〈0．05），提示黄鳝胁基因曾经历过强烈的正选择作用。
- 李伟江翱吴辉
- 关键词：黄鳝主要组织相容性复合体克隆多态性
- 黄鳝醛酮还原酶对大肠杆菌非生物胁迫耐受性的影响被引量：1
- 2019年
- 醛酮还原酶是一类依赖NAD(P) H的氧化还原酶,在生物体内参与了糖代谢、酮代谢和物质运输等多种生理过程。为了解黄鳝醛酮还原酶在细胞逆境胁迫中的保护作用,采用液体培养和斑点展示法,比较含黄鳝醛酮还原酶Eakr的重组菌株和阴性对照菌株在Na Cl、Cu2+和H2O2等非生物胁迫下的存活率和生长活力。结果表明,含重组醛酮还原酶Eakr的大肠杆菌在高渗透压、重金属和氧化胁迫下的生存率显著高于阴性对照,其生存活力也大大增强。提示黄鳝醛酮还原酶Eakr可能参与了细胞活性氧代谢和物质运输等多种生理过程。
- 阚延泽江翱王全禾李伟
- 关键词：醛酮还原酶非生物胁迫存活率耐受性
- 黄鳝转铁蛋白受体1基因的克隆及表达分析
- 2015年
- 旨在研究黄鳝转铁蛋白受体1基因的功能及其组织表达特异性,采用同源克隆结合RACE技术从黄鳝肝脏中分离其转铁蛋白受体1基因,用生物信息学方法对获得的氨基酸序列进行分析,用半定量RT-PCR技术研究各组织中Tf R1表达水平。结果表明,克隆获得黄鳝Tf R1,Gen Bank注册序列号为KF819396。该c DNA全长2 839 bp,5'UTR长134 bp,3'UTR长380 bp,编码一个长774个氨基酸的多肽链。氨基酸多序列比对结果表明,黄鳝Tf R1基因推断的氨基酸序列同其他鱼类的同源性较高,达55.68%-68.41%;而同哺乳动物的Tf R1基因同源性较低。半定量RT-PCR分析表明,黄鳝Tf R1基因转录本在不同组织表达量有明显差异;在血细胞中表达量最高,而在肾脏、脾脏和小肠中表达中等,在肝脏、胃、皮肤、脑、心脏和肌肉中表达量很低。
- 江翱李伟
- 关键词：黄鳝RACE技术RT-PCR技术
- 黄鳝醛酮还原酶的羰基解毒作用初探被引量：2
- 2017年
- 醛酮还原酶(aldo-keto reductase,AKR)是机体依赖NAD(P)H的一类重要的氧化还原酶,在细胞有毒羰基化合物代谢中具有重要作用。迄今为止,国内外尚无鱼类醛酮还原酶基因及其功能的报道。为了解鱼类醛酮还原酶在细胞抗有毒羰基化合物胁迫过程中的作用,笔者比较了含重组黄鳝AKR基因的阳性菌株和不含该重组基因的阴性对照在丙酮醛及2,3-丁二酮2种羰基化合物处理后的存活率。结果表明,随着毒性物质处理时间的延长和处理浓度的升高,阳性菌株和对照菌株存活率均呈逐渐下降趋势;阳性菌株的存活率始终极显著高于对照菌株(P<0.01)。结果提示,黄鳝的醛酮还原酶具有一定的羰基解毒作用。该研究为进一步深入了解鱼类AKR基因的功能提供了基础资料。
- 代海艳江翱李伟
- 关键词：黄鳝醛酮还原酶解毒作用
- 烟草PGIP基因在枯草芽孢杆菌中的表达
- 2015年
- 根据Gen Bank数据库报道的林烟草(Nicotiana sylvestris)PGIP基因c DNA序列,设计特异性引物,从普通烟草(Nicotiana tabacum)种植品种小黄金中分离得到了其g DNA序列,分析结果发现烟草PGIP基因没有内含子序列。信号肽分析结果表明,烟草PGIP基因含有一段长28个氨基酸的信号肽。将去除信号肽的烟草PGIP基因片段亚克隆至枯草芽孢杆菌表达载体p HT43中,转化枯草芽孢杆菌菌株WB600并进行IPTG诱导。SDS-PAGE电泳表明,重组菌株可成功表达目的蛋白质,分子质量符合预期大小;琼脂扩散试验结果发现,表达的烟草PGIP蛋白质能够明显抑制辣椒疫霉PGs的活性。
- 江翱吴辉袁梦思孙文秀
- 关键词：枯草芽孢杆菌
- 生防菌BS04防治辣椒疫病机制被引量：6
- 2015年
- 从生防菌的根际定殖、防效和诱导防御酶活性3个方面探讨了生防菌BS04防治辣椒疫病的机制。结果表明,生防菌BS04能够在辣椒根际定殖,且定殖密度比较稳定,稳定维持在105CFU/g以上;盆栽试验测定防治效果表明,生防菌BS04的培养液对辣椒幼苗期疫病有较明显的防治效果,防效达85.81%;防御酶活性测定结果显示,接种辣椒疫霉菌后,辣椒叶片的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)和多酚氧化酶(PPO)的活性均显著提高并出现峰值,但生防菌BS04培养液和辣椒疫霉菌共同处理后,各种防御酶的活性有所降低,并表现出相对平缓的状态。
- 李建文高易宏吴辉江翱孙文秀
- 关键词：生防菌辣椒疫病防病机制生物防治防御酶
- 黄鳝载脂蛋白A1的基因结构及表达谱分析被引量：4
- 2016年
- 根据克隆的黄鳝载脂蛋白A1基因的部分序列,进行5′RACE扩增和内含子的克隆并采用荧光定量PCR分析该基因的表达谱。结果表明,该基因cDNA全长1207bp,5′UTR区域长32bp,编码1个262aa的多肽;在长1391bp的gDNA上,只发现了1个长184bp的内含子。荧光定量PCR对该基因在不同组织和病原细菌嗜水气单胞菌感染后的表达情况分析表明,该基因转录本在肝脏中表达量最高,在胃、肾脏、小肠、脑、皮肤和血液中表达量中等,而在心脏、脾脏和肌肉中表达量很低;病原细菌感染会显著影响该基因在小肠、肝脏和脾脏中的表达水平。以上结果显示黄鳝的载脂蛋白Apo-A1基因可能参与了鱼体的天然免疫反应。
- 阚延泽江翱孙文秀李伟
- 关键词：黄鳝载脂蛋白基因结构
