周永兴
- 作品数：5 被引量：28H指数：3
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同载体及靶基因对乙型肝炎病毒DNA疫苗免疫效果的影响被引量：10
- 2000年
- 目的 探讨不同DNA载体及靶基因对DNA疫苗免疫效果的影响。 方法 用已构建的不同载体HBV S基因疫苗(pCR3.1-S,pcDNA3-S)和HBVC基因疫苗(pCR3.1-C)分别给Balb/c小鼠多点肌肉注射,2wk后追加免疫一次,用ELISA法及MTT法分别检测小鼠血清抗-HBs及抗HBc及脾细胞对HBsAg或HBcAg的特异性增殖反应。 结果 免疫接种2wk后小鼠血清抗-HBs及抗HBc抗体均明显高于对照组,载体pCR3.1的表达效力稍高于pcDNA3,但同一基因不同载体间无显著差异,不同靶基因血清抗体滴度及脾细胞对HBsAg或HBcAg的刺激指数均明显高于对照组,刺激指数pCR3.1-C组明显高于单纯pCR3.1-S注射组。 结论 两种载体均可以诱导较强的体液免疫应答;但同一基因不同载体间无显著差异,HBVS和C基因疫苗均可诱导较强的体液和细胞免疫应答强度;C基因以细胞免疫增高为主。
- 王全楚周永兴姚志强冯志华
- 关键词：乙型肝炎基因免疫乙型肝炎疫苗细胞免疫
- HCV胞膜蛋白E2基因的融合表达、纯化及多克隆抗体制备
- 2005年
- 目的原核表达HCV胞膜蛋白E2,获得抗E2多克隆抗体。方法利用PCR方法从HCV基因组序列中扩增出831bp(384～661aa)的E2基因片段并按读框克隆到原核表达载体pET32a(+),IPTG诱导HCVE2蛋白表达,SDS-PAGE和WesternBlot法检测蛋白表达,Ni-NTA偶联的琼脂糖吸附柱纯化融合蛋白,薄层扫描及Bradford法检测纯化蛋白的纯度>90%;用表达的E2蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,利用间接ELISA法检测抗体效价,WesternBlot法检测抗体特异性。结果用原核诱导表达出HCV胞膜蛋白E2免疫新西兰兔后获得多克隆抗体的效价在1∶1280以上,能特异性识别E2蛋白。结论成功构建HCVE2基因的原核表达载体,利用原核表达HCV胞膜蛋白E2制备的多克隆抗体能特异性识别E2蛋白。为进一步开展HCVE2蛋白功能和HCV受体的研究奠定了基础。
- 杜德伟孙脊峰杨洁贾战生秦鸿雁周永兴韩骅
- 关键词：肝炎病毒金属螯合亲和层析多克隆抗体
- 西安地区TTV毒株结构呈环形被引量：2
- 2001年
- 自TTV1997年被发现后[1],我国各地已在不同人群中发现TTV感染[2-11];国外学者[12-18]对TTV分子结构的研究发现,TTV存在线性与环形两种基因组结构形式,目前Genebank中可检索到大于3000nt以上的较为完整的TTV毒株共有7株,其中,3株为环状,4株为线状;我国上海地区有同样的TTV环形结构研究报告[19],但其他地区包括西北地区至今未见报道.也未见报道任何关于西安地区TTV毒株特征性基因序列,包括全序列或部分序列,我们就西安地区TTV基因组结构是否环形,做了初步研究,以期了解西安地区TTV毒株部分特点。
- 傅恩清白雪帆王平忠潘蕾李光玉杨为松周永兴
- 关键词：输血传播病毒聚合酶链反应环状结构血清诊断
- TTV经胎盘的垂直传播被引量：4
- 2001年
- 近来国内外对输血传播病毒(transfusion transmitted virus,TTV)的研究较多[1-8],对TTV传播途径研究中粪口传播及输血传播途径已较为肯定[9-14],但是否可经母亲垂直传播尚不清楚.现对TTV垂直传播进行一定的研究,报道如下.
- 傅恩清陈立珍白雪帆王平忠潘蕾李光玉杨为松周永兴
- 关键词：输血传播病毒聚合酶链反应胎血血清诊断
- 肾综合征出血热患者外周血全淋巴细胞和异型淋巴细胞IFN—γ与其表型的研究被引量：14
- 1989年
- 本文应用APAAP技术对肾综合征出血热(HFRS)患者PBMC及用Percoll纯化后的异型淋巴细胞的各种表型和IFN—γ表达进行了研究。并用ABC和APAAP双标技术研究了IFN—γ表达细胞在PBMC群及亚群中的分布和IFN—γ与HFRSV抗原间的关系。结果表明,(1)急性期PBMC中T细胞比例下降,B细胞比例增加;急性期各种活化抗原表达明显高于恢复期。(2)急性期IFN—γ表达细胞比例明显大于恢复期,rHuIFN—γ阻断试验及正常人PBMC替代实验表明IFN—γMcAb为特异性识别;IFN—γ表达细胞主要包括T_4、T_8和NK细胞。急性期和恢复期IFN—γ表达的细胞分布未见明显变化。IFN—γ表达是细胞受抗原活化所致,而非病毒感染所诱生。(3)异型淋巴细胞除T、B细胞外,还有NK细胞,且T_8大于T_4。异型淋巴细胞活化抗原表达明显高于PBMC。除去母细胞后的小细胞各种分化抗原表达基本接近正常人,但活化抗原高于正常人。(4)在病程中HLA—ABC、β2m未见明显变化。此结果对于阐明HFRS淋巴细胞群及亚群紊乱的本质及机理、异型淋巴细胞的本质和作用具有较重要的意义。
- 黄传书金伯泉汪美先周永兴李恩善
- 关键词：HFRS淋巴细胞亚群IFN-Γ
