钱志坚
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院细胞生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 酿酒酵母Ⅴ号染色体上二个强ARSs的结构及功能研究
- 1996年
- 对在酿酒酵母S. cerevisiae Ⅴ号染色体上克隆的强ARS: PYA8-ARS及PYA34-ARS进行了定向缺失分析,最后定位了两ARSs的功能区并作了序列分析比较.在实验过程中,发现一段特殊的载体序列与周围载体DNA环境协同作用产生了微弱的ARS活性,提出没有活性的ARS核心序列类似区能形成新的ARS活性区的观点,并作了理论上的分析.
- 钱志坚匡达人
- 关键词：酿酒酵母5号染色体
- 在ADH1转录终止子区存在逆向复制叉移动的阻抑点
- 1996年
- 双向电泳定位复制叉技术是定位复制起点及分析复制叉移动过程的有力手段.用该技术分析了从酵母V号染色体克隆的pBY8-ARS在质粒上的复制起始功能 同时,构建了一个质粒模型包含ADH1启动子,终止子及βhCG-cDNA的转录单位,用双向电泳分析该转录单位逆向复制叉移动的情况. 首次证明,除rDNA以外,结构基因的终止区也存在逆向移动的复制叉的阻抑点,这为转录对逆向复制叉的移动具有阻抑作用的普遍性提供了证据.
- 钱志坚王妙珠谢恒月匡达人
- 关键词：酵母复制叉
- 对在酵母Ⅴ号染色体克隆ARS过程中发现的一个重组现象的初步分析
- 1996年
- 早期在有关A364a的Ⅴ号染色体ARS研究中发现3株再次重组的含ARS的质粒。在深入探讨这一再次重组现象的机理时,发现它们的外源片段能与A364a的V号染色体DNA杂交,而不与大肠杆菌DNA或酵母转座子杂交。证明这个外源片段来源于酵母Ⅴ号染色体,而不来自A364a其他染色体(因为它来自Ⅴ号染色体专一文库)。并意外地发现它与Car2基因5′调控区高度同源(95％),与其编码区也有73.4％同源。提出一个可能的解释,即酵母A364a中存在Car2基因族,包括没有功能的假基因(这是为什么过去用测功能来定位Car2基因在第12条染色体上时,却测不到这些假基因)。它们的分布不局限于Ⅴ号染色体,并在建库时在细菌中再次发生重组,所以同源片段有重复,也有缺失。
- 钱志坚朱怡文匡达人
- 关键词：酵母无性系啤酒染色体
- 酿酒酵母A364a第Ⅴ号染色体基因库的构建及ARS的克隆被引量：2
- 1996年
- 利用脉冲梯度电泳(PFGE)分离酿酒酵母A364aV号染色体DNA,克隆在酵母的整合型载体YIp5中,得到染色体专一的基因库。从该基因库克隆的16类ARS,接近估计的酵母Ⅴ号染色体复制子数目,基本覆盖Ⅴ号染色体。同源性分析发现酵母Ⅴ号染色体的绝大部分ARS之间不具同源性或存在极低的同源性。
- 钱志坚朱怡文匡达人
- 关键词：酵母菌酿酒酵母基因库
