高守一
- 作品数：11 被引量：58H指数：5
- 供职机构：中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 霍乱弧菌中存在不含霍乱毒素基因的噬菌体CTXΦ基因组被引量：28
- 1999年
- 目的近年研究发现产毒霍乱弧菌的毒素基因ｃｔｘＡＢ由其溶原性噬菌体ＣＴＸΦ编码，这种丝状噬菌体可携带ｃｔｘＡＢ传递给无毒素基因的霍乱菌株。研究认为ｃｔｘＡＢ基因与ＣＴＸΦ基因组中的其它基因是严格共存的。然而在本实验室研究中，于不含ｃｔｘＡＢ基因的ＥｌＴｏｒ型霍乱弧菌（ＥＶＣ）中发现部分菌株含有ＲＳ基因同源序列，为此对这些菌株作ＣＴＸΦ基因组的进一步研究。方法以ＣＴＸΦ基因组中的ｃｔｘＡ、ｃｔｘＢ、ｚｏｔ、ａｃｅ、ｃｅｐ和ＲＳ１结构基因制备探针，对ｃｔｘＡＢ－菌株染色体作Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测，并用ＰＣＲ方法检测ＣＴＸΦ的感染受体毒素共调菌毛（Ｔｃｐ）的ｔｃｐＡ基因。结果发现有４株分离自河水的霍乱毒素基因阴性ＥＶＣ菌株仍含有溶原噬菌体ＣＴＸΦ的基因组，为ｃｔｘＡ－ｃｔｘＢ－ｚｏｔ＋ａｃｅ＋ｃｅｐ＋ＲＳ＋菌株，另有一株分离自病人的ＥＶＣ菌株仅表现为ＲＳ＋。这些菌株均含ｔｃｐＡ基因。结论ｃｔｘＡＢ基因并不一定与ＣＴＸΦ其它基因共存于一个菌株中。
- 阚飙祁国明刘延清刘彩莲刘彩莲
- 关键词：霍乱弧菌霍乱毒素
- 一种霍乱弧菌菌株
- 本发明提供了一可用于防治人霍乱病的具有生物安全性的口服活菌苗候选株IEM108。其特征在于以天然不产毒素的El Tor型菌苗候选株IEM101为出发菌株，首先构建以thyA基因为选择压力的霍乱染色体质粒致死平衡系统，再将...
- 阚飙梁未丽祁国明章丽娟李杰刘延清高守一
- 文献传递
- 霍乱弧菌噬菌体VP4受体成分的分析被引量：3
- 2004年
- 侵袭细菌的噬菌体可以被该菌株的细胞壁提取物所抑制,既细菌的提取物与噬菌体颗粒混合培育后,如果噬菌体与有受体活性的细菌提取物发生不可逆作用,就不能再感染细菌.本项研究选育鞭毛发育良好的霍乱弧菌菌株,利用有鞭毛的细菌在含有0.1%石炭酸琼脂培养基上培养可以失去鞭毛的特性,选育鞭毛发育不良的菌株.提取上述两种菌株的脂多糖和外膜蛋白,并分别与噬菌体VP4钝化作用.通过噬斑计数测定,比较钝化作用的差异,分析VP4的受体成分.
- 赵英伟王多春李燕萍卢明俊刘延清高守一阚飙
- 关键词：噬菌体霍乱弧菌受体毛发体成分
- 霍乱弧菌VPI毒力岛的tcpI-P和tcpH-A间隔区序列在不同菌株中的差异分析
- 2003年
- 目的 TcpA是霍乱弧菌主要定居因子毒素共调菌毛的主要亚单位 ,基因位于VPI毒力岛上。古典生物型和ElTor生物型霍乱弧菌菌株的tcpA序列有较大差异 ,同时毒力岛上其他一些区域 ,主要包括部分基因的间隔区序列也存在差异。我们已在不同ElTor流行株与非流行株以及非O1/非O13 9菌株中又发现 4种新的tcpA序列。笔者拟探明这 4种不同类型tcpA序列的菌株中 ,VPI毒力岛上其他几个差异片段 (tcpI -P间隔区和tcpH -A间隔区 )是否与相应tcpA序列有平行的变异关系、进而分析毒力岛和菌株分化的多样性。方法 在tcpI-P和tcpH -A间隔区外侧保守区中设计引物 ,扩增包含这两个间隔区的片段并进行测序 ,计算比较序列差异。结果 基因tcpH与tcpA之间的间隔区序列两两间比较的一致性在 63 3 %至 95 3 %之间 ;基因tcpI与tcpP之间的间隔区序列两两间比较的一致性在 2 6 7%至 10 0 %之间。这些间隔区序列并没有像tcpA序列在这些菌株中的差异那样显示出类似的变异水平 ,甚至一些菌株的tcpA序列有较大差异时、某些区域反而高度一致。结论 在不同tcpA序列的菌株中tcpI-P间隔区和tcpH -A间隔区及tcpA这三个片段分化变异的速率不同 ,并不具有平行性。这些序列的多样性反映了霍乱弧菌VPI毒力岛以及菌株分化的多样性。这种分化也提?
- 赵英伟阚飙芮勇宇高守一刘延清卢明俊
- 关键词：霍乱弧菌VPI菌株
- 多重聚合酶链式反应(MPCR)用于霍乱弧菌检测的研究被引量：6
- 1997年
- 本文首先从实用的角度探讨用三对特异的引物对不同血清群霍乱弧菌进行ＭＰＣＲ检测的可能性。这三对引物具有很大的应用价值，从一次扩增反应中可以得出有关菌株的毒力因子和血清群的信息。检测的敏感性可达到１０ＣＦＵ。实验还提示将引物数量改为五条寡核苷酸链来进行ＭＰＣＲ能得出同样的结果。对Ｐ３、Ｐ４引物扩增形成的６１７ｂｐ的ＤＮＡ片段进行酶切分析表明，埃尔托型霍乱弧菌Ｏ１３９群霍乱弧菌的ｔｃｐＡ基因有很大的相似性，至少在ＰｓｔⅠ和ＢｇｌⅡ酶切位点上表现相同，但两者均与古典型霍乱弧菌不同。
- 刘彩莲祁国明徐建国刘延清高守一
- 关键词：聚合酶链反应霍乱弧菌毒素基因
- 霍乱弧菌主要毒力和管家基因序列分析被引量：11
- 2006年
- 目的分析广东霍乱弧菌（VC）代表菌株主要毒力基因和管家基因序列。方法PCR扩增霍乱弧菌的主要毒力基因（ctxAB和tcpA）和管家基因（dnaE、hlyA、mdh和recA）、基因测序、对序列进行生物信息学分析。结果不同年代分离的2株埃尔托型（EVC）产毒株和1株0139群VC产毒株的主要毒力基因序列与国内外相关报告比较，ctxA基因及推测的氨基酸序列的同源性分别为99．7％～100％和98．8％～100％．ctxB基因及推测的氨基酸序列的同源性分别为98．8％～100％和96．8％～100％，tcpA基因序列与EVC国际标准株N16961 100％同源。3株产毒株的dnaE、hlyA、mdh和recA基因序列同源性分别为99．8％～100％，100％，99．5％～99．8％和100％，氨基酸序列同源性分别为100％．100％，98．5％～99．3％和100％；3株产毒株和O139群VC非产毒株的管家基因序列同源性分别为97．0％～97．2％，91．8％，94．1％～94．4％，96．9％，氨基酸序列同源性分别为100％，94．6％，94．3％～98．5％和99．7％。结论广东省不同年代EVC产毒株和O139群VC产毒株的群体遗传学关系高度密切，而与O139群VC非产毒株较远，O139群VC产毒株可能起源于EVC产毒株。
- 芮勇宇许锐恒阚飙高守一俞守义
- 关键词：霍乱弧菌管家基因
- 霍乱弧菌新类型溶源性噬菌体基因组结构研究被引量：2
- 2007年
- 目的研究霍乱弧菌埃尔托型（EVC）新类型溶源性噬菌体（CTXφ）和核心区不含ctxAB基因的溶源性噬菌体（nct-CTXφ）基因组的结构。方法采用基因扩增、测序及序列生物信息学等方法进行观察与分析。结果在我国EVC中,存在仅携带古典型（class）nct-CTXφ、CTXφ或埃尔托型（ET）CTXφ基因组类型,并发现nct-CTXclassφ和CTXETφ共存、nct-CTXnewETφ和CTXclassφ共存的新类型。CTXφ和nct-CTXφ基因组zot基因3′末端,60bp序列中40%位点不同,推测的氨基酸序列中60%位点不同。class、ET和newET类型ig 1、rstR和ig 2基因序列同源性分别为77.0%~97.4%,10.4%~17.9%,9.6%~64.8%,RstR同源性9.2%~24.1%。CTXφ基因组均位于染色体TLC基因簇附近。上述不同类型EVC的tcpA、TcpA、ctxA、ctxB、CtxA和CtxB与GenBank中EVC和O139群产毒株的同源性分别〉99%,99%,99%,98%,98%和96%。结论首次在EVC中发现nct-CTXclassφ和CTXETφ、nct-CTX^newET φ和CTX^classφ共存的新类型。
- 芮勇宇阚飙高守一刘延清祁国明
- 关键词：霍乱弧菌噬菌体
- 霍乱弧菌4种新类型tcpA基因发现及序列分析被引量：6
- 2005年
- 目的研究中国霍乱弧菌(VC)毒力协同调节菌毛A亚单位基因(tcpA)的多态性.方法分别进行聚合酶链反应及限制性片段长度多态性分析、型特异引物PCR分型、基因测序及序列分析.结果 200株O1群埃尔托型(EVC)产毒株和100株O139群VC产毒株的tcpA基因均与EVC国际标准株N16961株为同一类型(t2型).50株EVC非产毒株中只有3株携带tcpA基因,1株为t2型,另2株为2种新类型.20株O139群VC非产毒株均不携带tcpA基因.20株非O1非O139群VC中只有2株携带tcpA基因,且为2种新类型.4种新类型tcpA基因与国外发现的4种类型比较,基因序列及推测的氨基酸序列同源性分别为58.3%～77.5%和61.0%～85.5%;5′端约102bp基因序列基本一致,推测的氨基酸序列完全一致;3′端约210bp基因序列变异最大,推测的氨基酸序列变异也最大.抗原表位分析,C末端差异最大.结论建立快速准确区分不同类型tcpA基因的方法,并发现4种新类型.
- 芮勇宇阚飙高守一俞守义
- 关键词：霍乱弧菌聚合酶链反应限制性片段长度多态性
- 禽流感大流行不是危言耸听被引量：3
- 2005年
- 对禽流感是否真的大流行,各种预测、众说纷纭。这个话题也一直是老百姓关注的焦点。禽流感是否将大流行的确值得我们关心．但更值得我们关心的应该是如何阻止它的发生,如何在发生之前作好应对的准备。到底结果会是怎样,通过权威专家的分析,我想多少能从本文得到一些启示。
- 高守一
- 关键词：禽流感前作
- 新型霍乱弧菌菌株
- 本发明提供了一可用于防治人霍乱病的具有生物安全性的口服活菌苗候选株IEM108。其特征在于以天然不含CTXφ基因组的El Tor型菌苗候选株IEM101为基础，首先构建以thyA基因为选择压力的霍乱染色体质粒致死平衡系统...
- 阚飙梁未丽祁国明章丽娟李杰刘延清高守一
- 文献传递
