刘延清
- 作品数:69 被引量:213H指数:9
- 供职机构:中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 一种霍乱弧菌新菌株及其活菌苗
- 本发明提供了一种可制备理想菌苗的新的霍乱弧菌菌株,该菌株缺失了毒力因子的结构基因,又保持其表面抗原结构,对人体和动物无毒,有良好的免疫能力。本发明还提供了由该菌株制备的口服活菌苗。
- 刘延清祁国明王世霞于永茂段广才章丽娟高守一
- 文献传递
- O139群霍乱弧菌中溶原性噬菌体CTXФ的诱导及转染性研究被引量:7
- 2003年
- 目的 探讨新出现的O139群霍乱弧菌中溶原性噬菌体CTXΦ的来源及其是否可产生感染性的噬菌体颗粒 ,从而造成毒素基因的水平转移。方法 用DNA破坏剂丝裂霉素C诱导噬菌体CTXΦ基因组被四环素抗性基因标记的O139菌株BJ30 ,继而体外转染古典型标准菌株 5 6 9B和O395 ,对获得的四环素抗性的转导菌株进行转染噬菌体基因组的鉴定。结果 序列同源性分析表明 ,BJ30菌株中的rstR基因与O1群ElTor型菌株的rstR基因完全一致 ;丝裂霉素C诱导获得了感染性噬菌体颗粒 (CTX TcΦ) ,并成功感染O1群霍乱弧菌 5 6 9B和O395 ,转染率分别为 1.0 4× 10 - 4 和 3.2 7× 10 - 6 。结论 O139群霍乱弧菌能产生感染性CTXΦ颗粒 ,ElTor型菌株不是产生CTXΦ的唯一来源。
- 梁未丽阚飙祁国明刘延清高守一
- 关键词:霍乱弧菌CTXΦ
- 霍乱弧菌抗菌抗毒口服活疫苗候选株的构建被引量:1
- 2000年
- 目的 构建霍乱弧菌抗菌抗毒口服活疫苗候选株 ,并在家兔模型中评价它们的免疫原性及主动保护力。方法 应用染色体 质粒致死平衡系统 ,在无毒的霍乱弧菌中表达霍乱毒素基因 ,继而在家兔模型中进行免疫原性的比较。结果 构建的分别含有突变无毒的ctx 和ct B基因的IEM10 4和IEM10 5菌株免疫家兔后 ,刺激机体产生抗菌与抗毒抗体 ,前者的特异性抗体滴度较后者高 ,家兔主动保护试验中对纯霍乱毒素 (CT)攻击保护前者也高于后者。结论 构建的霍乱疫苗候选株IEM10 4和IEM10 5在家兔模型中均能产生较好的抗菌与抗毒免疫 ,IEM10 4对家兔的免疫原性和主动保护力略高于IEM10 5。
- 夏晓滨刘延清祁国明高守一
- 关键词:疫苗免疫原性候选株
- 多重聚合酶链式反应(MPCR)用于霍乱弧菌检测的研究被引量:6
- 1997年
- 本文首先从实用的角度探讨用三对特异的引物对不同血清群霍乱弧菌进行MPCR检测的可能性。这三对引物具有很大的应用价值,从一次扩增反应中可以得出有关菌株的毒力因子和血清群的信息。检测的敏感性可达到10CFU。实验还提示将引物数量改为五条寡核苷酸链来进行MPCR能得出同样的结果。对P3、P4引物扩增形成的617bp的DNA片段进行酶切分析表明,埃尔托型霍乱弧菌O139群霍乱弧菌的tcpA基因有很大的相似性,至少在PstⅠ和BglⅡ酶切位点上表现相同,但两者均与古典型霍乱弧菌不同。
- 刘彩莲祁国明徐建国刘延清高守一
- 关键词:聚合酶链反应霍乱弧菌毒素基因
- O139群霍乱弧菌染色体中整合两种CTXΦ前噬菌体基因组的多样性被引量:3
- 2002年
- 目的 研究同时携带两种CTXΦ基因组的O139群霍乱弧菌中CTXΦ基因组的多样性。方法 Southernblot检测分离自福建的部分O139霍乱弧菌菌株中ctxAB和zot基因的多态性 ,然后选取ctxAB和zot基因拷贝数差异较大的 3株菌 ,扩增其调控抑制基因rstR基因片段 ,克隆并进行序列测定、分析。结果 此 3株菌染色体zot杂交条带多于ctxAB 2~ 5条 ,提示 1个菌株染色体上有编码ctxAB的CTXΦ以及不编码ctxAB的CTXΦ两种基因组。以保守区设计的引物扩增此 3株菌的rstR区 ,均得到 2条大小不同的条带 ,分别克隆后进行测序 ,经GenBank同源性检索 ,发现在此 3个菌株染色体中分别有来自ElTor型的CTXETΦ与不编码ctxAB的nct CTXO13 9Φ、来自加尔各答型的CTXcalcΦ与nct CTXO13 9Φ、以及CTXETΦ与新报道的一种具有独特rstR序列的CTXΦ类基因组两两共存于 1个菌株染色体上。这 3个菌株还具有不同的 16S核糖体基因杂交图谱。结论 不同rstR序列的CTXΦ基因组可以共存于 1个菌株染色体中 ,提示CTXΦ家族进化过程中的复杂分化 ,CTXΦ家族在不同霍乱菌株间的出现及传递。
- 陈爱平阚飙陈拱立陈亢川刘延清
- 关键词:噬菌体O139群霍乱弧菌染色体
- 霍乱弧菌以thyA基因为选择压力的染色体质粒致死平衡系统的构建被引量:8
- 2000年
- 目的 为构建霍乱弧菌口服活疫苗提供稳定实用的载体系统。方法 在改良MM基本培养基的基础上 ,建立了霍乱弧菌thyA基因突变菌株的筛选方法 ,继而用PCR插入法克隆了大肠杆菌thyA基因全序列 (pXXB10 6 ) ,并电击转化入霍乱弧菌thyA基因缺陷株 (PL10 2 ) ,使后者在MM改良培养基上的生长恢复为野生状态。结果 选育出的thyA基因突变的霍乱弧菌IEM10 1菌株PL10 2突变性状及生物学性状基本稳定。进而构建了以thyA基因为选择压力的霍乱弧菌染色体 质粒致死平衡系统。结论 构建成的抗原呈递系统作为构建肠道疫苗的受体菌株是稳定的 ,也是适用的。
- 夏晓滨祁国明刘延清高守一
- 关键词:霍乱弧菌
- 大肠杆菌突变的thyA基因的克隆及序列分析被引量:3
- 2000年
- 目的 研究thyA基因天然缺陷菌株thyA基因的改变。方法 用PCR插入法将thyA基因克隆到pUC18上,进行序列测定及分析。结果 突变的thyA基因其第131位碱基T突变为碱基A。结论 thyA基因缺陷的大肠杆菌的thyA基因第131位碱基T突变为碱基A,是导致该基因功能丧失的直接原因。
- 夏晓滨刘延清祁国明高守一
- 关键词:大肠杆菌突变克隆
- 霍乱弧菌新类型溶源性噬菌体nct-CTX^(O139)ф基因组RS区及rstR-ig2基因的功能研究被引量:1
- 2006年
- 霍乱弧菌CTXφ基因组RS区的间隔区ig2包括rstR启动子区和rstA操纵区,rstR基因编码产物RstR可以和rstA操纵区结合,抑制rstA基因表达,RS区负责噬菌体的复制、整合和解离等功能[1].我们克隆并测序了nct-CTXO139φ基因组,RS区的rstR和ig2为首次发现的新类型,故进行上述功能研究.
- 芮勇宇阚飙刘忠华高守一刘延清祁国明
- 关键词:霍乱弧菌G2基因
- 霍乱弧菌的一种新的不含毒素基因CTXΦ基因组的复制功能研究
- 2006年
- 刘忠华芮勇宇祁国明刘延清高守一阚飙
- 关键词:霍乱弧菌毒素基因O139群霍乱毒素霍乱流行同源性
- 细菌毒力基因体内表达检测系统的建立及应用
- 1998年
- 细菌毒力基因体内表达检测系统的建立及应用中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所(102206)夏晓滨刘延清祁国明徐建国高守一在致病菌感染机体的过程中,宿主-寄生菌相互作用,已知有许多特异的基因产物的表达,这些产物在致病过程中起着至关重要的作用,亦是...
- 夏晓滨刘延清祁国明徐建国高守一
- 关键词:细菌毒力基因